La Medicina Tradicional China para Eliminar la Estasis Sanguínea y Activar las Colaterales Mejora la Inflamación Renal en Ratas con Nefropatía Diabética Inhibiendo la Infiltración y Activación de Macrófagos a través de la Vía TAK1/JNK
La nefropatía diabética (ND) es una complicación frecuente y grave de la diabetes y la principal causa de enfermedad renal terminal en todo el mundo. En la actualidad, el tratamiento de la ND consiste principalmente en limitar la ingesta de sodio en la dieta, controlar la glucemia, reducir la presión arterial y bloquear el sistema renina-angiotensina (SRA). Aunque puede retrasar en cierta medida la progresión de la DN, su eficacia no es la ideal. Cada vez hay más pruebas de que la respuesta inflamatoria desempeña un papel importante en la aparición y el desarrollo de la nefropatía diabética, y la infiltración y la activación de macrófagos son eslabones centrales de la inflamación renal. La vía de señalización TAK1/JNK es una vía importante que regula la infiltración y activación de macrófagos. Por lo tanto, el bloqueo de la vía de señalización TAK1/JNK es una estrategia eficaz para prevenir y tratar la DN.

Nuestro grupo de investigación cree que la "estasis sanguínea que obstruye las colaterales" es la patogénesis básica de la nefropatía diabética, y la adición de la medicina tradicional china para eliminar la estasis sanguínea y promover las colaterales sobre la base de la diferenciación y el tratamiento del síndrome se ha convertido en el principio básico para tratar la nefropatía diabética. La medicina tradicional china para eliminar la estasis sanguínea y promover la circulación sanguínea contiene numerosos fármacos. Tras más de 20 años de práctica clínica y repetidos análisis, nuestro grupo de investigación ha determinado finalmente cinco medicamentos chinos, a saber, Chuanxiong, Danshen, Dilong, Leech y Scorpion, como medicamentos básicos relativamente fijos para el tratamiento de la ND. Nuestra investigación anterior ha confirmado que la medicina tradicional china para eliminar la estasis sanguínea y promover la circulación de la sangre puede inhibir la activación del SRA renal en ratas DN, reducir la pérdida de proteína de membrana de poro podocyte y proteína citoesquelética, y retrasar la progresión de DN. Pero en la actualidad no se ha investigado la respuesta inflamatoria de este fármaco en el estado de DN. En vista de esto, este estudio toma ratas SD como objeto de investigación para observar los efectos de la medicina tradicional china para la eliminación de la estasis sanguínea y la promoción de colaterales en la infiltración de macrófagos, la activación y la vía de señalización TAK1/JNK en el tejido renal de ratas DN, aclarando aún más los objetivos de la medicina tradicional china para la eliminación de la estasis sanguínea y la promoción de colaterales, y proporcionando una base experimental para su aplicación clínica.

De 40 ratas SD, se seleccionaron aleatoriamente 10 ratas como grupo normal (grupo C), y las otras 30 ratas fueron alimentadas con una única inyección intraperitoneal de estreptozotocina (STZ, 40 mg/kg) combinada con una dieta alta en azúcar y grasa para establecer modelos de diabetes. Las ratas modeladas con éxito se dividieron aleatoriamente en un grupo modelo (grupo M) y un grupo de medicina herbal china (grupo Z). El grupo Z recibió la intervención de la medicina tradicional china. Después de 16 semanas, se realizó la cuantificación de proteínas en orina de 24 horas (UTP de 24 horas) en cada grupo de ratas; se utilizó el método ELISA para detectar la expresión de la proteína quimioatrayente de monocitos-1 (MCP-1), la interleucina-1 β (IL-1 β) y el factor de necrosis tumoral - α (TNF - α) en suero; Se recogió tejido renal y se utilizó inmunofluorescencia para detectar la expresión de la proteína marcadora de macrófagos CD68 y la proteína marcadora de macrófagos activados clásica óxido nítrico sintasa inducible (iNOS). Se utilizó Western blot para detectar la expresión de proteínas relacionadas con la vía de señalización TAK1/JNK, incluidas la quinasa-1 activada por el factor de crecimiento transformante (TAK1), p-TAK1, c-Jun N-terminal quinasa (JNK) y p-JNK.

En los últimos años, la medicina tradicional china ha adquirido una comprensión más profunda de la nefropatía diabética, y la mayoría de los médicos argumenta basándose en la estasis sanguínea. Cuando se padece sed, la deficiencia de Qi y la incapacidad para transportar la sangre provocan un retraso en el flujo sanguíneo, que con el tiempo conduce gradualmente a la estasis sanguínea; la deficiencia de Yin y el exceso de fuego pueden provocar el sufrimiento de los fluidos corporales, lo que da lugar a una insuficiencia de fluidos corporales y a una mala circulación sanguínea. Con el tiempo, esto puede conducir a la estasis sanguínea. La "Teoría del Síndrome de la Sangre: La estasis sanguínea" afirma: "Cuando la estasis sanguínea se produce entre los meridianos y los órganos, constituye la causa fundamental de la enfermedad". La "Lectura esencial de la Facultad de Medicina" afirma: "La acumulación de estasis sanguínea es rectitud, acumulada a lo largo del tiempo, día y noche". Si la estasis sanguínea persiste y no se cura, está causada por enfermedades meridianas y colaterales. El curso de la DN es largo, por lo que su progresión se ajusta a los cambios de la medicina tradicional china, como agregación y formación, acumulación en el tiempo, y estasis y obstrucción de colaterales. El principio de "estasis sanguínea que obstruye las colaterales" atraviesa la DN de principio a fin y es su patogenia fundamental. El método de promover la circulación sanguínea, eliminar la estasis sanguínea y desobstruir las colaterales se ha convertido en el principio básico del tratamiento de la DN. Sin embargo, esta estasis sanguínea es difícil de disipar debido a su acumulación, que está fuera del alcance de los fármacos convencionales para activar la sangre y eliminar la estasis. Por lo tanto, nuestro grupo de investigación añadió sanguijuelas, lombrices de tierra, escorpiones y otros medicamentos especializados para el dragado de los meridianos y la eliminación de parásitos sobre la base del uso de medicamentos convencionales para la activación de la sangre y la eliminación de la estasis, como Danshen y Chuanxiong. El Danshen es un medicamento esencial para promover la circulación sanguínea y eliminar la estasis sanguínea, cuyos principales ingredientes activos son los ácidos salvianólicos y las tanshinonas. Estudios farmacológicos modernos han demostrado que el Danshen puede regular el metabolismo de la glucosa y los lípidos en pacientes con DN y animales de experimentación, inhibir el estrés oxidativo, la inflamación y la fibrosis, y proteger la función renal. Chuanxiong tiene el efecto de promover la circulación sanguínea y la circulación del qi. Sus principales ingredientes activos son la ligustrazina y el ácido ferúlico. Estudios farmacológicos modernos han demostrado que el Chuanxiong tiene diversas actividades biológicas, como la inhibición de la agregación plaquetaria y la trombosis, la reducción de la viscosidad sanguínea, la disminución de la proliferación de células mesangiales y la inhibición de la proliferación de células endoteliales. La eficacia de las sanguijuelas consiste en romper la sangre, eliminar la estasis sanguínea y favorecer la menstruación. El principal ingrediente activo de las sanguijuelas es la hirudina, que tiene efectos anticoagulantes, antitrombóticos, hipolipemiantes, antiinflamatorios, inhibición de la transición epitelio-mesénquima, reducción de la apoptosis de las células epiteliales tubulares renales y alivio de la fibrosis renal. Las lombrices de tierra favorecen la circulación sanguínea y la diuresis en el tratamiento de las enfermedades renales. Lumbricus contiene lombriz quinasa, que tiene los efectos de mejorar el desequilibrio del sistema fibrinolítico, inhibir la activación plaquetaria, regular los trastornos del metabolismo lipídico, e inhibir la proliferación de células mesangiales glomerulares y la acumulación excesiva de matriz extracelular. El escorpión tiene los efectos de disipar el viento, desbloquear los meridianos y dispersar los nudos. Estudios farmacológicos modernos han demostrado que el escorpión puede anticoagular, antitrombótico, promover la fibrinólisis, aumentar el flujo sanguíneo renal y reducir la proteinuria. La combinación de estas cinco hierbas puede desbloquear los meridianos y eliminar la estasis sanguínea.

Estudios recientes han demostrado que la infiltración de macrófagos es una de las manifestaciones características de la respuesta inflamatoria de la DN. La infiltración de macrófagos se detectó tanto en pacientes como en modelos animales de DN, y el grado de infiltración se correlacionó positivamente con la proteinuria y la disfunción renal de la DN. La investigación ha demostrado que el principal factor que determina la dirección del desarrollo de la enfermedad renal no es la cantidad de infiltración de macrófagos, sino más bien el estado de activación de los macrófagos en los tejidos locales. Tras una lesión renal, los monocitos de la sangre migran al tejido renal y se diferencian en macrófagos. Los macrófagos adquieren dos fenotipos de activación diferentes en un microentorno específico, a saber, macrófagos activados clásicamente (M1) y macrófagos no activados clásicamente (M2). Los macrófagos M1 median en la inflamación y la fibrosis renales mediante la secreción de iNOS, quimiocinas (MCP-1, IL-8) y factores proinflamatorios (TNF-α, IL-1 β); los M2 producen factores antiinflamatorios como la IL-1 y la IL-10, que tienen funciones antiinflamatorias y de reparación tisular. INOS es un marcador de la activación de los macrófagos M1. En la fase inicial de la lesión renal, los macrófagos M1 se infiltran principalmente y liberan factores inflamatorios como MCP-1, IL-1 β, TNF - α, ROS, etc., induciendo y potenciando la respuesta inflamatoria. En este estudio, en comparación con el grupo normal, el grupo modelo de ratas mostró un aumento en la agregación de macrófagos CD68 positivos en el tejido renal, un aumento en la expresión del marcador de activación de macrófagos M1 iNOS, y un aumento en los niveles de factores inflamatorios como MCP-1, IL-1 β, TNF - α. La fitoterapia china para eliminar la estasis sanguínea y promover la circulación sanguínea puede inhibir la infiltración, activación y liberación de factores inflamatorios de los macrófagos renales en ratas DN, reduciendo así la inflamación renal.

La infiltración y activación de macrófagos en el tejido renal DN están estrechamente relacionadas con la vía de señalización TAK1/JNK. La JNK pertenece a la familia de las proteínas cinasas activadas por mitógenos (MAPK). Cada familia MAPK está compuesta por un conjunto de tres quinasas que actúan en secuencia: MAPKK quinasa (MAPKKK), MAPK quinasa (MAPKK) y MAPK. MAPKKK activada puede fosforilar a MAPKK y activarla. La MAPKK activada fosforila la MAPK y la activa. La MAPK activada puede translocarse al núcleo para regular la transcripción de genes diana. En los últimos años, experimentos con animales y células han confirmado que la vía JNK promueve la respuesta inflamatoria renal. TAK1 es una serina/treonina quinasa perteneciente a la familia MAPKKK, situada aguas arriba de JNK, y es una importante molécula de señalización en la transducción de señales JNK. La activación de la vía de señalización TAK1/JNK puede observarse en enfermedades renales como la DN, la nefropatía IgA y la isquemia/reperfusión del trasplante renal, y está estrechamente relacionada con la progresión de la respuesta inflamatoria. En ratones UUO, la inhibición de la vía de señalización TAK1/JNK puede reducir la infiltración de macrófagos, inhibir la activación de macrófagos M1 y disminuir los niveles de factores inflamatorios. En este estudio, en comparación con el grupo normal, la vía de señalización TAK1/JNK se activó significativamente en las ratas DN. La medicina herbal china para eliminar la estasis sanguínea y promover la circulación sanguínea puede reducir significativamente la expresión de proteínas relacionadas con la vía de señalización TAK1/JNK e inhibir la activación de la vía de señalización TAK1/JNK.

En resumen, los resultados de nuestra investigación indican que la medicina tradicional china para eliminar la estasis sanguínea y promover la circulación sanguínea puede mejorar la proteinuria y aliviar la inflamación renal en ratas DN. El mecanismo de acción puede estar relacionado con su inhibición de la infiltración de macrófagos mediada por la vía de señalización TAK1/JNK, la activación y la liberación de factores inflamatorios.