Efecto de la terapia combinada de ciclopamina de regaliz y flavonoides totales de orquídea fragante en ratones con fibrosis pulmonar
La fibrosis pulmonar (FP) es una enfermedad pulmonar crónica progresiva con patrones histopatológicos evidentes, que incluye un gran número de lesiones crónicas del sistema respiratorio, acompañadas por el crecimiento de tejido conectivo en diversos compartimentos pulmonares. Entre ellas, la enfermedad pulmonar intersticial y la fibrosis pulmonar idiopática (FPI) son las enfermedades más graves e irreversibles de la fibrosis progresiva del parénquima pulmonar. La FPI está causada por una reparación tisular anormal y se asocia a un daño tisular grave y sostenido y a estrés celular. Esta propiedad anormal implica una reparación insuficiente de la barrera celular epitelial, acompañada de una regulación deficiente de los fibroblastos, lo que provoca cambios profundos en las células epiteliales alveolares y en los fibroblastos, dando lugar a una fibrosis incontrolada caracterizada por el engrosamiento de las paredes alveolares fibróticas, la alteración de la transmisión de gases, la limitación de los patrones de ventilación y, en última instancia, la insuficiencia respiratoria. En los últimos años, la enfermedad de la PF ha puesto en grave peligro la salud humana en el ámbito de la medicina moderna. Debido al continuo avance de los métodos de diagnóstico y al envejecimiento de la población, la tasa de mortalidad e incidencia de la PF sigue aumentando. La patogénesis de esta enfermedad es compleja, y el mecanismo patológico aún no está claro. Las manifestaciones clínicas de los pacientes son la disminución progresiva de la distensibilidad del tejido pulmonar, la disminución de la función de difusión y el desequilibrio de la ventilación/flujo sanguíneo, lo que provoca en los pacientes disnea refractaria y, en última instancia, insuficiencia respiratoria y muerte.
La vía Hedgehog (Hh) desempeña un papel importante en el desarrollo embrionario y la remodelación tisular. La vía de señalización Hh se compone principalmente de moléculas de señalización (SHH, IHH, DHH), receptores transmembrana (Ptch, SMO) y factores de transcripción corriente abajo (familia de proteínas Gli1). Tras su activación, la vía Hh ejerce sus efectos principalmente a través de la familia de proteínas Gli1. En la FPI se ha confirmado que la actividad de la vía Hh aumenta, y se ha detectado una expresión significativa de SHH y sus efectores de señalización en el epitelio alveolar y los fibroblastos submucosos de la zona sometida a remodelación de la fibrosis. En los pulmones, el tratamiento con SHH aumentó la proliferación, supervivencia, migración y producción de matriz extracelular (MEC) de los fibroblastos, pero no aumentó la expresión de α - actina de músculo liso (α - SMA). En el modelo de FP inducido por bleomicina, la expresión de SHH es elevada en las células epiteliales alveolares y de las vías respiratorias. En el modelo de bleomicina, la inhibición de la señalización Hh no previene la fibrosis, pero la sobreexpresión de SHH durante la fibrosis exacerba la FP. Por lo tanto, aunque la señalización de SHH es crucial para el desarrollo pulmonar normal y el mantenimiento de la homeostasis intersticial, también se activa crónicamente en la FP.
La ciclopamina (Cyc) es un alcaloide esteroide y un inhibidor de la vía de señalización Hh. Al cambiar la conformación espacial de SMO, se inhibe la actividad de SMO para suprimir la transducción de señales corriente abajo de la vía de señalización Hh, poniendo así la vía Hh en un estado inhibido. Cyc puede inhibir la transcripción y expresión de genes tumorales, intervenir en la vía de señalización Hh mediada por SHH, ejercer efectos antitumorales y anti FP, y por tanto inhibir la progresión de enfermedades relacionadas. Estudios relacionados han demostrado que al unirse a las proteínas SMO en la vía de señalización Hh y afectar a la transducción de señales corriente abajo de las proteínas SMO, se puede reducir la expresión de las proteínas α - SMA y colágeno tipo 1 (Col-1), debilitando así o incluso previniendo este cambio en la proteína C reactiva de alta sensibilidad y mejorando la hipertensión portal. Además, fármacos como Cyc que interfieren en la señalización Hh pueden ayudar a prevenir la resistencia a los andrógenos y la progresión de la enfermedad en células de cáncer de próstata. La vía de señalización Hh afecta a la aparición y desarrollo de enfermedades, sin embargo, el papel de Cyc en las enfermedades relacionadas con la PF aún no está claro.
Dracocephalum moldevica L. es una planta de Labiatae, que se utiliza como medicina en toda la pradera. Sus principales componentes químicos son aceite volátil, polisacáridos, terpenoides, flavonoides, aminoácidos y oligoelementos. Tiene diversos efectos farmacológicos, como la protección de los vasos cardiovasculares y cerebrovasculares, antiaterosclerosis, antiasma, limpieza del calor y desintoxicación, fomento de la circulación sanguínea y desbloqueo de colaterales, antioxidante, regulación de la dislipidemia, así como limpieza del viento y el calor, resfriado y fiebre, tos y asma. Las investigaciones han descubierto que el Xiangqinglan contiene un total de 41 flavonoides, y las propiedades medicinales del Xiangqinglan proceden principalmente de los flavonoides. Estudios anteriores han demostrado que el TFDM, uno de los principales principios activos del Xiangqinglan, tiene un efecto muy eficaz para aliviar la tos y el asma. Puede ralentizar significativamente la alta reactividad en el interior de las vías respiratorias de los ratones, reparando así los daños en la función pulmonar. La liberación de interleucina-6 (IL-6), interleucina-17 (IL-17), y factor de necrosis tumoral - α (TNF - α) en ratones redujo significativamente la proporción de interleucina-4 (IL-4) a interferón - γ (IFN - γ), ajustando así el desequilibrio inmunológico Th1/Th2. Entre ellos, TFDM puede controlar la expresión de NOD como receptor térmico dominio de la proteína asociada a la proteína 3 (NL-RP3) mediante la reducción del contenido de Col-1 en el tejido pulmonar, en última instancia, lograr el objetivo de aliviar la fibrosis pulmonar. Y estudios previos han demostrado que los flavonoides totales de Dracocephalum moldavica L. (TFDM) pueden aliviar eficazmente la FP causada por bleomicina mediante la regulación a la baja o al alza de importantes proteínas reguladoras como SHH, Ptch1, SMO, SUFU, Gli1 en la vía de señalización Hh. Por lo tanto, este artículo estudia el mecanismo de acción de Cyc y TFDM sobre el FP basado en la vía de señalización Hh.

Se realizaron numerosas investigaciones sobre el Xiangqinglan en su fase inicial y se determinó el proceso de extracción óptimo. El extracto de Xiangqinglan se purificó utilizando resina de adsorción macroporosa para obtener las partes efectivas de Xiangqinglan. Las partes efectivas del Xiangqinglan se separaron y se analizaron estructuralmente para su identificación. Previamente, se determinó el contenido de las partes efectivas de Xiangqinglan y, basándose en la dosis clínica, se convirtió a la dosis in vivo animal de acuerdo con la bibliografía pertinente. Y en estudios anteriores, se exploró el mecanismo de acción de las dosis relacionadas con TFDM (90, 180, 360mg/kg) en modelos de ratones con FP, basándose en la vía de señalización Hh. Se descubrió que la vía de señalización Hh se activaba en el modelo de ratón con FP, y que TFDM podía mejorar la FP al intervenir en proteínas reguladoras importantes de la vía de señalización Hh, observándose un efecto más significativo a dosis altas de TFDM (360mg/kg).
Por lo tanto, basándose en investigaciones previas, este artículo se centra en explorar la inhibición de la vía de señalización Hh por Cyc y los efectos relacionados de TFDM (360mg/kg) en ratones con FP inducida por bleomicina. Se estableció un modelo de ratón con FP mediante instilación intratraqueal de bleomicina. Al segundo día de la construcción del modelo, se administró a los ratones por vía oral fármacos relacionados como Cyc y TFDM. Debido a la insolubilidad de los fármacos Cyc y TFDM, se preparó carboximetilcelulosa sódica 0,5% como la suspensión correspondiente y se administró por sonda.
En la fase inicial de construcción del modelo de FP, los ratones enfermos mostraron síntomas como pérdida de peso, pérdida de apetito, color desordenado del pelaje y mal estado mental, así como un gran número de muertes. Al mismo tiempo, basándose en los resultados de las secciones patológicas de tejido pulmonar teñidas con HE y Masson, se concluyó que la construcción del modelo de FP había tenido éxito. Tras una intervención farmacológica continua, varios síntomas de los ratones mejoraron significativamente en la última fase de la construcción del modelo de FP. Los resultados de las secciones patológicas del tejido pulmonar mostraron que la estructura del tejido pulmonar del grupo Cyc y del grupo TFDM era normal, y que las células inflamatorias y el tejido fibrótico se habían reducido significativamente. Posteriormente, se midió el contenido de HYP, y los resultados de la investigación mostraron que el contenido de HYP en el grupo modelo aumentaba, mientras que el grupo Cyc y el grupo TFDM podían reducir significativamente el contenido de HYP. Las manifestaciones clínicas de la PF son tos seca persistente y dificultad respiratoria aguda, acompañadas de un empeoramiento de la lesión pulmonar, lo que provoca una disminución continua de la función pulmonar y, en última instancia, conduce a la muerte. La PF puede causar pérdida de la función pulmonar, caracterizada por una dificultad respiratoria progresiva, que conduce a trastornos del intercambio gaseoso y problemas de ventilación restrictiva. Por lo tanto, este estudio llevó a cabo pruebas de función pulmonar y descubrió que el grupo Cyc y el grupo TFDM pueden mejorar la limitación del flujo de aire de la PF y aliviar la disfunción de la ventilación restrictiva mediante la reducción de RL, RE y FEV0.1/FVC, al tiempo que aumentan Cdyn, FVC y PEF, aliviando eficazmente los síntomas de la PF inducida por bleomicina.
La vía Hh desempeña un papel importante en el proceso de la FP, como la secreción de ECM y el metabolismo, para controlar la FP. La vía de señalización Hh se inicia por la secreción de ligandos, y Ptch elimina el efecto inhibidor sobre SMO, promoviendo así la activación del factor de transcripción Gli1 y la translocación nuclear, lo que conduce a la expresión de genes diana Hh como Gli1 y SMO. Por lo tanto, en el presente estudio, el inhibidor de SMO Cyc se utilizó para inhibir la vía Hh para determinar el papel de TFDM en ratones PF. En este estudio se detectaron proteínas relacionadas como Col-1, α - SMA, FN1, SHH, SMO, SUFU, Gli1, etc. La inhibición de Cyc y TFDM de la vía Hh puede inhibir la producción de ECM y la angiogénesis, lo que puede lograrse mediante la regulación a la baja de proteínas relacionadas como Col-1, α - SMA, FN1, SHH, SMO, Gli1 y la regulación al alza de la proteína SUFU. Esto confirma aún más que la PF está relacionada con la inhibición de la vía de señalización Hh. Tanto el grupo Cyc como el grupo TFDM fueron capaces de reparar el daño tisular pulmonar, mejorar el contenido de fibras de colágeno, regular a la baja o al alza el contenido de proteínas relacionadas con la vía de señalización Hh, aliviando así la progresión de la fibrosis tisular pulmonar. Además, la combinación de Cyc y TFDM mostró una mayor eficacia.
En resumen, este artículo profundiza en la aparición y el desarrollo del FP, y verifica que el TFDM tiene cierto efecto terapéutico. También profundiza en el mecanismo de acción de la vía de señalización Hh relacionada con el FP, proporcionando una buena base de investigación para el estudio de los mecanismos de acción relacionados con el FP.