Aislamiento de componentes químicos del ciprés acolchado e inhibición de su actividad de proliferación de células tumorales
Selaginella pulvinata (Hook.&Grev.) Maxim. es una planta herbácea perenne del género Selaginella de la familia Selaginellaceae. También se conoce como hierba perenne, hierba de la longevidad, hierba de la resurrección de los nueve muertos, etc. Hay más de 50 especies de plantas Selaginella en China, ampliamente distribuidas en Guangxi, Liaoning, Yunnan, Fujian, Zhejiang, Shandong, Jilin, Hunan, Shaanxi, Hebei y otros lugares. El libro "Seeking Truth from Materia Medica" recoge que su tratamiento se divide en dos categorías: madura y cruda, ligeramente fría cuando está cruda, y lo suficientemente fuerte como para romper la sangre y los meridianos, tratando así síntomas como el estancamiento y los ganglios linfáticos; si se tuesta, estará caliente y será eficaz para detener las hemorragias, tratando así síntomas como el enrojecimiento intestinal y el prolapso. La investigación farmacológica moderna ha demostrado que la Selaginella en forma de cojín tiene efectos despejadores del calor y desintoxicantes, antiinflamatorios, antitumorales, antienvejecimiento, de regulación inmunológica y de tratamiento de enfermedades cardiovasculares. Los principales componentes del Platycodon grandiflorus incluyen flavonoides, flavonas, alquinos, alcaloides, ácidos orgánicos, etc. Entre ellos, los flavonoides y los alquinos son los principales ingredientes activos del Platycodon grandiflorus, y los compuestos de selaginelina son un nuevo tipo de compuestos de esqueleto de alquinos que sólo se encuentran en las plantas del género Platycodon grandiflorus. Por lo tanto, es de gran importancia purificar los flavonoides y los fenoles alquinos del ciprés almohadillado y realizar estudios farmacológicos en profundidad sobre sus mecanismos de acción.
Debido a las estructuras similares de la selaginelina y los flavonoides, es difícil separarlos utilizando métodos de separación convencionales. Por lo tanto, utilizando tecnología de purificación y separación automática guiada por espectrometría de masas, se detectaron por espectrometría de masas los pesos moleculares y los fragmentos de selaginelinas y flavonoides, y se prepararon en línea los compuestos correspondientes en fase líquida. Al mismo tiempo, se utilizó la cromatografía en columna al vacío y a presión atmosférica para separar selectivamente los flavonoides y los alquinefenoles de la parte de extracción en acetato de etilo del extracto etanólico 95% de Selaginella cuspidata. Se obtuvieron cuatro flavonoides y siete selaginelinas, y sus estructuras se determinaron mediante datos químicos y espectrales. Se evaluó la actividad inhibidora de la proliferación in vitro de estos compuestos en la célula H322 de cáncer de pulmón humano no microcítico (CPNM).
Utilizando la tecnología de separación PHPL-MS guiada por espectrometría de masas, combinada con cromatografía en columna al vacío y a presión atmosférica, se llevó a cabo la preparación y separación selectiva de flavonoides y fenoles alquinos en ciprés acolchado, obteniéndose cuatro flavonoides (1-4) y siete fenoles alquinos (5-11). Este método permite obtener flavonoides y alquino fenoles de gran pureza de forma rápida y eficiente. Los resultados de la evaluación de la actividad inhibidora de la proliferación de células tumorales mostraron que estos compuestos naturales tienen una buena actividad inhibidora de la proliferación en la línea celular de cáncer de pulmón humano de células no pequeñas H322, con valores de IC50 de 16,70 μ mol/L para el compuesto 3 y 9,54 μ mol/L para el compuesto 10. Tanto los flavonoides como los alquinos han mostrado una fuerte actividad antitumoral y de inhibición de la COX-2, mientras que los alquinos han mostrado efectos sinérgicos in vitro sobre la actividad antifúngica del fluconazol y el ketoconazol. Por lo tanto, los compuestos preparados en este artículo tienen valor para futuras investigaciones y modificaciones estructurales. Especialmente, las estructuras fenólicas alquíneas sólo se encuentran actualmente en plantas del género Selaginella. El método de preparación rápida establecido también proporciona un medio eficaz para la separación y purificación rápida y a gran escala de flavonoides y compuestos alquíno fenólicos en Selaginella acolchada.