Estudio sobre el efecto antiinflamatorio y el mecanismo de Sophora alopecuroides en la inflamación inducida por lipopolisacáridos en células RAW264.7
La inflamación es una respuesta defensiva que se produce cuando el organismo es atacado o infectado por estímulos nocivos internos y externos, como los agentes patógenos. Desencadena una respuesta inmunitaria para proteger al organismo. Cuando el sistema inmunitario se activa de forma excesiva o continua, puede dar lugar a una serie de enfermedades relacionadas con la inflamación, como la artritis reumatoide, la enfermedad inflamatoria intestinal, tumores, etc., que en última instancia provocan una inflamación permanente o temporal. Los macrófagos desempeñan un papel central en el inicio, mantenimiento y alivio de las respuestas inflamatorias, y su acumulación y activación sostenidas son indicativas de inflamación crónica. El lipopolisacárido (LPS) puede activar los macrófagos y promover su secreción de mediadores inflamatorios como el factor de necrosis tumoral alfa (TNF - α), la interleucina-1 β (IL-1 β), la interleucina-6 (IL-6), el óxido nítrico (NO), etc. La liberación excesiva de estos mediadores inflamatorios puede provocar daños en los órganos y enfermedades crónicas. El NF - κ B desempeña un papel importante en la regulación de procesos como la apoptosis celular y la respuesta inflamatoria, y es una diana importante para la terapia antiinflamatoria.

Sophora alopecuroides L, también conocida como Sophora alopecuroides, es una planta perteneciente a la familia Leguminosae del género Sophora. Se distribuye en varias provincias del noroeste de China y países de Asia Central, y tiene las funciones de despejar el calor y desintoxicar, aliviar el dolor y la inflamación, secar la humedad y detener la disentería. Es una planta medicinal importante en la región noroccidental de China. La Sophora alopecuroides contiene principalmente alcaloides, flavonoides, ácidos orgánicos, polisacáridos, aceites volátiles, esteroides, fenoles y otros componentes. Los alcaloides tienen efectos antiinflamatorios, anticancerígenos, antibacterianos y reguladores del sistema inmunitario; los flavonoides tienen efectos antiinflamatorios, antivirales y antioxidantes; y los polisacáridos tienen funciones reguladoras del sistema inmunitario y antitumorales, que pueden mejorar eficazmente la inmunidad del organismo y desempeñar un papel importante en la promoción antitumoral e inmunitaria. Todos los estudios anteriores se basan en un determinado grupo de composición química de Sophora alopecuroides, y la medicina tradicional china tiene las características de efectos combinados multicomponente, multiobjetivo y multivía, que pueden lograr el mismo efecto terapéutico o incluso mejor con dosis más bajas de fármacos, incluida la compatibilidad efectiva de partes y la compatibilidad efectiva de ingredientes. Por lo tanto, es necesario explorar si los diferentes grupos de composición química de Sophora alopecuroides pueden mejorar la eficacia. En este artículo se utilizan células RAW 264.7 como modelo inflamatorio para el cribado de fármacos antiinflamatorios en Sophora alopecuroides, y explora el extracto convencional de decocción en agua (WDE), el extracto ultrasónico en agua (WUE), el extracto de reflujo de etanol 75% (ERE), 75% extracto ultrasónico de etanol (EUE), así como el extracto total de alcaloides (TAE), el extracto total de flavonoides (TFE), el extracto total de polisacáridos (TPE) de Sophora alopecuroides y sus nueve combinaciones de diferentes partes eficaces. El efecto antiinflamatorio y el mecanismo de acción de (1:1:1, 1:2:2, 1:3:3, 2:1:2, 2:2:3, 2:3:1, 3:1:3, 3:2:1, 3:3:2).

Los macrófagos participan en la respuesta inmunitaria del organismo. Cuando son estimulados por LPS, los macrófagos desencadenan vías de señalización (como NF - κ B) para promover la producción de mediadores proinflamatorios como NO, TNF - α, IL-1 β, IL-6, etc. La producción excesiva de NO está estrechamente relacionada con la aparición de inflamación. Un aumento de los niveles de TNF - α e IL-6 puede promover la secreción de más citoquinas proinflamatorias por parte de las células. La IL-6 es una importante citoquina proinflamatoria que puede inducir la activación de las células B y T, y participar en la respuesta inmunitaria del organismo. La IL-1 β aumenta en la inflamación aguda o crónica. Los resultados de este estudio encontraron que después del tratamiento con LPS de RAW 264.7, la liberación de NO, TNF - α, IL-6, y IL-1 β aumentó significativamente, lo que indica el éxito del establecimiento de un modelo de inflamación in vitro. Sophora alopecuroides WDE, WUE, EUE, ERE y su TAE, TFE, TPE todos pueden inhibir la producción de NO, TNF - α, IL-6, y IL-1 β en células RAW 264.7 estimuladas por LPS, entre los cuales TFE, EUE, ERE El efecto inhibidor de TAE es más significativo Después de mezclar TFE y TPE en diferentes proporciones, se encontró que podían inhibir la liberación de TNF - α en diversos grados. Entre ellas, excepto las combinaciones 1:1:1 y 1:1:2, las otras siete combinaciones tenían mejores efectos inhibidores sobre la liberación de TNF - α que cuando actuaban solas. La combinación 2:1:2 tuvo el mejor efecto inhibidor, demostrando un efecto sinérgico significativo.

Para explorar el mecanismo molecular de la actividad antiinflamatoria de Sophora alopecuroides, este estudio utilizó WB para detectar la expresión de proteínas clave IkB α, NF - κ B p65, y p-IkB α, p-NF - κ B p65 en la vía de señalización NF - κ B. NF - κ B es un factor regulador clave en la inflamación, que puede regular la transcripción de muchos mediadores inflamatorios clave, como IL-1 β, IL-6, TNF - α, etc. El LPS se une a los receptores TLR4 para activar la vía de señalización NF - κ B, que es un eslabón importante para inducir a los macrófagos a liberar mediadores inflamatorios. Cuando se estimulan las células, la proteína inhibidora IkBa que se une a NF - κ B se fosforila rápidamente a p-IkB α bajo la acción de IkB α quinasa, liberando p-NF - κ B p65 activo en el núcleo, promoviendo así la síntesis y secreción de factores relacionados con la inflamación. En los últimos años, se han publicado numerosos informes sobre los efectos antiinflamatorios de alcaloides, flavonoides y polisacáridos. Por ejemplo, los estudios han descubierto que los alcaloides de Sophora flavescens pueden aliviar la inflamación inducida por LPS en macrófagos RAW 264.7 inhibiendo la fosforilación de IkB α y la translocación nuclear de p-NF - κ B p65. Zhao et al. descubrieron que los alcaloides totales de Sophora flavescens pueden aliviar la colitis inducida por sulfato de dextrano mediante la inhibición de la activación de NF - κ B. Los estudios han demostrado que los flavonoides de la medicina tradicional china pueden reducir los niveles de fosforilación de las proteínas IkB α y p65 en la vía de señalización NF - κ B para ejercer efectos antiinflamatorios. Li et al. descubrieron que los flavonoides totales de Sophora flavescens pueden ejercer efectos inmunomoduladores en la colitis ulcerosa mediante la inhibición de la activación de la vía de señalización JAK2/STAT3, y los polisacáridos de Cistanche pueden inhibir la activación de la vía de señalización JAK2/STAT3. NF - κ B MAPK y la activación de STAT3 se utilizan para inhibir la inflamación inducida por LPS en macrófagos RAW 264.7, mientras que el estudio de Qu et al. demostró que los polisacáridos de Pinus koraiensis pueden inhibir la inflamación inducida por LPS mediante la regulación de la vía de señalización Nrf2/HO-1. En la actualidad, hay relativamente poca investigación sobre los efectos de la combinación de alcaloides, flavonoides y polisacáridos en la inflamación. Este estudio encontró que cuando se utilizó la combinación de TAE, TFE, y TPE en Sophora alopecuroides, la fosforilación de NF - κ B p65 y IkB α proteínas se redujo significativamente, y la expresión de p-IkB α y p-NF - κ B p65 proteínas fue inhibida. Esto indica que la combinación de biomasa total de Sophora alopecuroides, flavonoides totales y polisacáridos totales puede aliviar la inflamación inducida por LPS en macrófagos RAW 264.7 inhibiendo la activación de la vía NF - κ B.

En resumen, este estudio comparó principalmente la actividad antiinflamatoria de WDE, WUE, EUE, ERE convencionales y sus diferentes partes efectivas TAE, TFE, TPE y nueve combinaciones (1:1:1, 1:2:2, 1:3:3, 2:1:2, 2:2:3, 2:3:1, 3:1:3, 3:2:1, 3:3:2) de Sophora alopecuroides in vitro. Se descubrió que la combinación de TAE, TFE, TPE (2:1:2) tenía el mejor efecto inhibidor sobre la inflamación inducida por LPS en células RAW 264.7, y ejercía efectos antiinflamatorios in vitro al inhibir la activación de la vía inflamatoria NF - κ B. Este experimento sólo completó el cribado de fármacos antiinflamatorios a nivel celular, y sólo cribó las combinaciones de compatibilidad de diferentes partes farmacológicas de Sophora alopecuroides. Sin embargo, sigue habiendo problemas como la composición química compleja, los componentes farmacológicos poco claros y la base material de sus efectos, que requieren más investigación.