Investigación sobre la Evaluación de la Calidad de la Verbena y la Ley de Transferencia de la Dosis de Decocción Estándar Basada en el Mapa de Características UPLC y el Método de Evaluación Múltiple de Una Prueba
La Verbena officinalis L., parte aérea seca de la planta Verbena officinalis L. de la familia de las Verbenáceas, se registró por primera vez en el "Catálogo de Médicos Famosos" y se clasificó como de grado inferior. Los componentes químicos de la verbena son principalmente glucósidos iridoides, flavonoides, esteroles, triterpenos, polifenoles, aceites volátiles, taninos, betacaroteno, ácido cafeico, azúcares, etc. Los principales principios activos son los glucósidos iridoides. Tiene un carácter fresco, un sabor amargo y pertenece a los meridianos del hígado y el bazo. Tiene los efectos de promover la circulación sanguínea, dispersar la estasis sanguínea, desintoxicar, promover la diuresis, reducir la ictericia e interceptar la malaria. Clínicamente, se utiliza para la acumulación de síntomas como dismenorrea, amenorrea, faringitis, absceso, edema, ictericia y malaria. Los recursos de la verbena son abundantes, entre los cuales los glucósidos iridoides tienen diversos efectos como antioxidante, hepatoprotector, neuroprotector, protector de la isquemia cardíaca y cerebral, antiinflamatorio, etc. Las decocciones de hierbas chinas (decocciones estándar) son las preparaciones compuestas de medicina tradicional china más utilizadas en la práctica clínica, y también las preparaciones más antiguas y más utilizadas en la historia de la medicina china. Ya se trate de piezas de decocción de medicina tradicional china, piezas de decocción de pared rota, gránulos de fórmula de medicina tradicional china y otras piezas de decocción de medicina china nueva, todas se toman por decocción o enjuague con agua. Por lo tanto, es de gran importancia utilizar la investigación de decocción estándar como el control preferido para el estudio de otras preparaciones de medicina china. Este estudio dilucida la ley de transferencia cuantitativa de las piezas de decocción a las decocciones estándar, sentando las bases para la investigación y la evaluación de la calidad de las formulaciones de la medicina tradicional china de verbena.
Este estudio se centra en la preparación de verbascósido, 5-hidroxiverbascósido y verbascósido en rodajas de verbascósido, y establece su mapa característico UPLC. La información del mapa se analiza utilizando el análisis de modo químico, y el contenido de verbascósido, 5-hidroxiverbascósido, y verbascósido en verbascósido se determina simultáneamente por cromatografía líquida de ultra alto rendimiento combinada con un método de evaluación múltiple de prueba. Los resultados se comparan con los obtenidos por el método estándar externo. Además, se mide el rendimiento de la decocción estándar, el contenido de verbascósido, 5-hidroxiverbascósido y verbascósido, se calcula la tasa de transferencia y, en base a ello, se realiza un estudio sobre la transferencia de trozos de decocción de verbascósido a la decocción estándar para demostrar la racionalidad de varios indicadores de calidad.

La elución isocrática del espectro característico de la muestra de verbena no puede lograr la separación de la línea de base, por lo que se utilizó la elución gradiente. En los experimentos preliminares, este estudio comparó fases móviles como metanol agua, acetonitrilo agua, acetonitrilo-0,1% solución de ácido fosfórico y acetonitrilo-0,05% solución de ácido fosfórico. Por último, se seleccionó como fase móvil la solución de ácido fosfórico acetonitrilo-0,05%. En las condiciones cromatográficas anteriores, los parámetros cromatográficos de separación de picos, número teórico de platos y forma de los picos fueron buenos. Este estudio utilizó un sistema experimental de factor único para investigar los efectos del disolvente de extracción, el método y el tiempo de extracción y la proporción sólido-líquido en la eficacia de la extracción. Los resultados mostraron que la eficiencia de extracción era mayor cuando el disolvente de extracción era metanol 80%, la relación sólido-líquido era 1:50 (g/mL), y la extracción a reflujo se llevaba a cabo durante 120 minutos. Por lo tanto, el método anterior se utilizó como método de extracción para las rodajas de verbena.
El control de calidad global de los componentes multiíndice de la medicina tradicional china se ha convertido en una tendencia inevitable en el desarrollo del control de calidad de la medicina tradicional china. El espectro característico/huella dactilar es un método eficaz de evaluación de la calidad, y su combinación con el método de análisis de evaluación múltiple de una prueba puede lograr la integridad y precisión de la evaluación de la calidad. Este estudio estableció un mapa característico UPLC de trozos de decocción de verbascósido, identificó 5 picos comunes e identificó 3 componentes. El tiempo de análisis se acortó significativamente en comparación con HPLC, y las condiciones cromatográficas podrían utilizarse para la determinación del contenido de 5-hidroxiverbascósido, verbascósido y verbascósido. El análisis de componentes principales se llevó a cabo en el área de pico de los picos característicos, y el modelo de evaluación integral de componentes principales mejoró aún más la evaluación de la calidad y el método de análisis de la verbena.

El índice de determinación del contenido de verbena en la Farmacopea China 2020 es la cantidad total de ácido oleanólico y ácido ursólico, ambos triterpenoides de baja polaridad y baja solubilidad en agua. Los resultados preliminares de la investigación experimental muestran que el contenido total de ácido oleanólico y ácido ursólico en la decocción estándar de verbena es inferior a 2,0mg/g, y la tasa de transferencia es inferior a 6%. Por lo tanto, basándose en el mapa de características, se estableció un método de evaluación múltiple para la determinación del contenido de 5-hidroxi verbascósido, verbascósido y verbascósido. Los componentes polares de la verbena son principalmente terpenos de éter de ciclohexeno, entre los cuales el verbascósido y el 5-hidroxiverbascósido son los componentes principales con el contenido más alto, y la decocción estándar tiene una tasa de transferencia más alta. La tasa de transferencia de algunos lotes supera los 100%, mientras que el intervalo de transferencia total de 5-hidroxiverbastósido y verbastósido se sitúa entre 56,6% y 91,2%. La posible razón es que componentes similares sufren transformaciones estructurales durante el calentamiento, la ebullición y otros procesos. Existen diferencias en el contenido y la tasa de transferencia de verbascósido, 5-hidroxiverbascósido y verbascósido entre los 18 lotes de decocción estándar de verbascósido, que pueden estar relacionadas con el contenido y la textura de las piezas de decocción. Algunas piezas de decocción tienen colores más claros, tiempos de almacenamiento más largos y más restos durante el procesamiento, lo que puede ser la razón de las grandes fluctuaciones en su contenido y tasa de transferencia. Los tres ingredientes seleccionados tienen un alto contenido en verbena, y poseen buenas actividades farmacológicas antioxidantes, hepatoprotectoras, neuroprotectoras, protectoras contra la isquemia cardíaca y cerebral, antiinflamatorias y otros aspectos. Son una de las principales bases materiales para que la verbena ejerza sus efectos farmacológicos.

Los resultados del método de evaluación múltiple de una prueba no mostraron diferencias significativas en comparación con el método estándar externo, y pueden utilizarse para el análisis cuantitativo de componentes múltiples en la verbena. El mapa de características de UPLC combinado con el método de evaluación múltiple de una medición de componentes de índices múltiples puede proporcionar una referencia para la investigación y la evaluación de la calidad del proceso de producción de verbena y preparaciones herbales chinas de verbena.