Studie über die Qualitätsunterschiede zwischen Zhejiang Fritillaria und Hubei Fritillaria auf der Grundlage von HPLC-ELSD-Fingerprint und Multikomponentenquantifizierung
Fritillaria thunbergii Miq. ist eine getrocknete Zwiebel der Liliengewächse Fritillaria thunbergii Miq. und wird in der Liste der "Acht Aromen von Zhejiang" an erster Stelle geführt und wurde in verschiedene Ausgaben des Arzneibuchs der Volksrepublik China (im Folgenden als "Chinesisches Arzneibuch" bezeichnet) aufgenommen. Sie wird geerntet, gewaschen, befeuchtet, in dicke Scheiben geschnitten und getrocknet, wenn die Pflanze im Frühsommer verwelkt; Xi nannte sie "Zhe Bei Pian". Zhejiang Fritillaria hat die Funktion, Hitze zu beseitigen, Schleim zu lösen, Husten zu lindern, Knötchen zu entgiften und zu zerstreuen und Karbunkel zu beseitigen. Klinisch wird es zur Behandlung von Windhitze, Schleimfeuerhusten, Lungenabszess, Brustabszess und Wunden eingesetzt.

Hubei Fritillaria ist eine getrocknete Zwiebel von Fritillaria hupehensis Hsiao et K.C. Hsiao, einer Pflanze aus der Familie der Liliengewächse. Ihre Hauptfunktionen sind die Befreiung von Hitze und Schleim, die Linderung von Husten und die Auflösung von Knötchen. In der klinischen Praxis wird sie häufig zur Behandlung von Symptomen wie Hitzehusten und Schleimhusten eingesetzt. Sowohl Zhejiang Fritillaria als auch Hubei Fritillaria gehören zur Gattung der Fritillaria und können als traditionelle chinesische Medizin für medizinische Zwecke verwendet werden. Zu den Hauptwirkstoffen von Zhejiang Fritillaria gehören Fritillaria A, Fritillaria B, IsoFritillaria A, usw. Zu den wichtigsten Wirkstoffen von Hubei Fritillaria gehören Fritillaria A, Fritillaria B, Hubeijia, Hubeiyi, Hubeixin usw. Daher gibt es gewisse Unterschiede in den pharmakologischen Wirkungen zwischen Zhejiang Fritillaria und Hubei Fritillaria. Im Chinesischen Arzneibuch 2020 wurden Zhejiang Fritillaria und Hubei Fritillaria in der Kategorie der Heilkräuter getrennt aufgeführt, was darauf hindeutet, dass es gewisse Unterschiede zwischen den beiden Heilkräutern gibt.

Aufgrund der großen Vielfalt und der Preisunterschiede bei den Fritillaria-Arten auf dem Markt kommt es zu einer gegenseitigen Substitution von gefälschten Fritillaria und Hubei-Fritillaria. Aufgrund von Einschränkungen bei der morphologischen, mikroskopischen und physikalisch-chemischen Identifizierung ist es nicht möglich, die Ähnlichkeiten und Unterschiede in der Qualität der beiden Arzneistoffe wirksam nachzuweisen. Daher muss eine spezifischere und genauere Methode entwickelt werden, um die beiden wirksam zu unterscheiden und zu differenzieren.

In der Ausgabe 2020 des chinesischen Arzneibuchs werden als Indikatoren für die Bestimmung des Gehalts von Fritillaria thunbergii Fritillaria A und Fritillaria B angegeben, während der Indikator für die Bestimmung des Gehalts von Fritillaria thunbergii in der Provinz Hubei Fritillaria B ist, und der Grenzwert für den Gehalt von Fritillaria thunbergii B in der Provinz Hubei deutlich höher ist als der Gesamtgrenzwert für Fritillaria thunbergii A und Fritillaria thunbergii B in der Provinz Zhejiang, was objektive Bedingungen für die Verfälschung und Verwendung von Fritillaria thunbergii schafft. Angesichts des komplexen Systems der chemischen Zusammensetzung der traditionellen chinesischen Medizin reicht ein einziges quantitatives Modell nicht mehr aus, um den Anforderungen der Qualitätskontrolle in der modernen chinesischen Medizin gerecht zu werden. Gegenwärtig gibt es nur wenige Berichte über den Unterschied im Gehalt an Wirkstoffen zwischen den beiden Fritillaria-Arten. Daher wurde in dieser Studie die HPLC-ELSD-Methode verwendet, um Fingerabdruck-Spektren von Fritillariae Thunbergii Bulbus (FTB) und Fritillariae Hupehensis Bulbus (FHB) in Fritillariae thunbergii bzw. Fritillariae Hupehensis Bulbus in Hubei zu erstellen. Gleichzeitig wurden fünf identische Alkaloid-Komponenten bestimmt und eine umfassende vergleichende Studie zu Fritillariae thunbergii und Hubei unter qualitativen und quantitativen Aspekten durchgeführt, die als Referenz für die Identifizierung und Qualitätsbewertung der beiden medizinischen Materialien dient.

 

Bei der Erstellung und Anwendung von Fingerabdruckspektren wurden HPLC-ELSD-Fingerabdruckspektren von Fritillaria thunbergii und Fritillaria thunbergii auf der Grundlage der Merkmale der Alkaloidkomponenten in Fritillaria thunbergii und Fritillaria thunbergii erstellt. Die Ergebnisse der Ähnlichkeitsbewertung zeigten, dass die Fingerabdruckspektren derselben Fritillaria thunbergii sehr ähnlich waren. Daher können die Fingerabdruckspektren als gemeinsame Merkmale für die Qualitätskontrollforschung von Fritillaria thunbergii und Fritillaria thunbergii verwendet werden. Ein Vergleich der Unterschiede zwischen den Fingerabdruckspektren der beiden Fritillaria-Arten zeigt, dass im Fingerabdruckspektrum von Fritillaria thunbergii der Peak des Hubeijia-Pigmentspektrums eindeutig fehlt oder der Hubeijia-Pigmentgehalt extrem niedrig ist, so dass er in Fritillaria thunbergii nur schwer zu erkennen ist. Daher kann Hubeijia als differentieller Biomarker zur Unterscheidung und Differenzierung zwischen zwei Fritillaria-Arten, Zhejiang Fritillaria und Hubei Fritillaria, dienen.

Unter Verwendung der Peakfläche des gemeinsamen Peaks als Variable wurden HCA-, PCA- und OPLS-DA-Analysen separat durchgeführt. Die Ergebnisse von HCA und PCA waren in der Lage, effektiv zwischen Fritillaria thunbergii und Fritillaria thunbergii zu unterscheiden und zu differenzieren, was darauf hindeutet, dass die Kombination von Fingerprint, HCA oder PCA eine effektive Methode zur Identifizierung von Fritillaria thunbergii und Fritillaria thunbergii ist. Zur weiteren Klärung der Unterschiede in der chemischen Zusammensetzung zwischen den beiden Arten von Fritillaria thunbergii wurde eine OPLS-DA-Analyse durchgeführt, um vier unterschiedliche Biomarker zu identifizieren. Je nach Signifikanz der Unterschiede wurden sie wie folgt sortiert: Fritillaria thunbergii>Peak 4>Berberine A>Berberine B, was darauf hinweist, dass es signifikante Unterschiede im Gehalt der oben genannten Komponenten zwischen den beiden Arten von Fritillaria thunbergii gibt. Dieser Unterschied ist zum Teil auf die Unterschiede bei den Arzneistoffen selbst zurückzuführen. Die unterschiedliche Herkunft kann auch eng mit Faktoren wie der Pflanzumgebung und dem Wachstumszyklus der Heilpflanzen zusammenhängen.

Bei der Auswahl der Indikatoren für die Inhaltsbestimmung werden die in Fritillaria thunbergii und Fritillaria thunbergii enthaltenen Alkaloide hauptsächlich in Steroidalkaloide und Steroidalkaloide unterteilt. Die Forschung hat ergeben, dass die Alkaloide verschiedene pharmakologische Wirkungen haben, wie z. B. schleimlösende, hustenstillende, asthmabewältigende, entzündungshemmende und antitumorale Wirkungen, die mit den funktionellen Indikationen von Zhejiang Fritillaria und Hubei Fritillaria übereinstimmen. Fünf identische Alkaloide wurden anhand der HPLC-ELSD-Fingerprint-Spektren von Fritillaria thunbergii und Fritillaria thunbergii identifiziert. Die Ergebnisse der Gehaltsbestimmung zeigten, dass mit Ausnahme des Gehaltsunterschieds von Ibuprofen die anderen vier Bestandteile von Fritillaria thunbergii, Berberin A, Berberin B und IsoBerberin A, signifikante Gehaltsunterschiede aufwiesen. Unter ihnen war der Gehalt an Berberin A in Fritillaria thunbergii signifikant höher als der in Fritillaria thunbergii, während der Gehalt an Berberin A, Berberin B und IsoBerberin A signifikant niedriger war als der in Fritillaria thunbergii. Durch Messung des Gehalts an Berberin A, Berberin A, Berberin B und IsoBerberin A ist es daher möglich, zwischen Fritillaria thunbergii und Fritillaria thunbergii zu unterscheiden. Die erzielten Forschungsergebnisse stimmen im Wesentlichen mit den Ergebnissen der OPLS-DA-Analyse überein. In der Literatur wird berichtet, dass die Unterschiede im Gehalt und Anteil der Alkaloide ein wichtiger Faktor sein könnten, der zu den Unterschieden in der husten- und schleimlösenden, antibakteriellen und entzündungshemmenden Wirkung der beiden Arten von Fritillaria thunbergii führt. Die gleichzeitige Bestimmung mehrerer Alkaloide ist von großer Bedeutung für die Qualitätskontrolle und die Bewertung von klinisch orientierten traditionellen chinesischen Arzneimitteln, Fritillaria thunbergii und Fritillaria thunbergii. Es wird daher empfohlen, die Bestimmung von Berberin und Isoberberin bei der Qualitätskontrolle von Fritillaria thunbergii und Fritillaria thunbergii-Arzneimitteln zu verstärken.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass diese Studie HPLC-ELSD-Fingerprinting-Methoden für Fritillaria thunbergii und Fritillaria thunbergii etabliert und gleichzeitig den Gehalt an fünf Alkaloiden bestimmt hat, die wichtige Hinweise für die Identifizierung und Qualitätskontrolle von Fritillaria thunbergii und Fritillaria thunbergii-Medizinprodukten liefern können.