Das Polysaccharid GiP-B1 von Glycyrrhiza uralensis aktiviert Makrophagen RAW264.7 \u00fcber den TLR4\/MyD88\/NF - \u03ba B-Signalweg
\nDas angeborene Immunsystem ist eine wichtige Verteidigungslinie des K\u00f6rpers gegen die Invasion von Krankheitserregern, und Toll-like-Rezeptoren (TLRs) sowie Antigen-pr\u00e4sentierende Zellen wie Makrophagen und dendritische Zellen, die TLRs exprimieren, sind wichtige Bestandteile des angeborenen Immunsystems. Forschungen zur Beteiligung der TLRs an der Immunerkennung durch Makrophagen, der Regulierung der Signaltransduktion und der Ausl\u00f6sung der Immunreaktion haben gezeigt, dass alle Mitglieder der TLR-Familie, mit Ausnahme von TLR3, Liganden wie Lipopolysaccharide (LPS) erkennen k\u00f6nnen, an den myeloischen Differenzierungsfaktor 88 (MyD88) binden, relevante Kinasen rekrutieren und den Kinase-Inhibitor des Nuklearfaktors Kappa B (IKK) aktivieren, der den Inhibitor von NF - \u03ba B (I \u03ba B) phosphoryliert, der an NF - \u03ba B bindet. Und dissoziieren, aktivieren NF-\u03ba B in den Zellkern, initiieren oder hemmen die Transkription von Zielgenen und regulieren so die angeborene Immunantwort.
\nPolysaccharide, eine wirksame Klasse von biologischen Reaktionsregulatoren, aktivieren die Immunantwort von Makrophagen durch Mechanismen, die mit der Transduktion von TLRs\/NF-\u03ba B-Signalwegen zusammenh\u00e4ngen. Die Forschung hat ergeben, dass viele pflanzliche Polysaccharide spezifisch an Rezeptoren wie TLR2\/4 auf der Oberfl\u00e4che von Makrophagen binden k\u00f6nnen, den NF-\u03ba-B-Signalweg aktivieren, die Transkription von Zytokinen und die Expression von ko-stimulierenden Molek\u00fclen in phagozytischen Zellen regulieren und nachgeschaltete Kaskaden zur Aktivierung der angeborenen und erworbenen Immunit\u00e4t einleiten.
\nGlycyrrhiza inflata Bat. ist eine charakteristische Heilpflanzenquelle in Xinjiang. Ihre getrockneten Wurzeln und Rhizome wurden als Heilpflanzen in das chinesische Arzneibuch aufgenommen. Unsere Forschungsgruppe hat best\u00e4tigt, dass das rohe Polysaccharid GiP und die gereinigten Bestandteile die Proliferation von Makrophagen und Lymphozyten f\u00f6rdern. Die gereinigte Komponente GiP-B1, die einen hohen Gehalt aufweist, ist ein saures Polysaccharid mit einer Poly-Rha-GalA-Hauptkette, mit einem relativen Molekulargewicht von mehr als 2,0 \u00d7 106Da und einem Urons\u00e4uregehalt von 16,8%. Es kann die Proliferation und Phagozytose von RAW264.7-Makrophagen signifikant f\u00f6rdern, die Sekretion von IL-1 \u03b2 und TNF - \u03b1 durch Makrophagen erh\u00f6hen und die Bildung von NO und NOS f\u00f6rdern. Das Forschungsteam verwendete au\u00dferdem monoklonale Antik\u00f6rper gegen TLR4, um in Makrophagen einzugreifen, und fand heraus, dass die Sekretion von TNF-\u03b1, IL-1-\u03b2, 1L-6 und NO, die durch GiP-B1 induziert wurde, sowie die Expression von iNOS, 1L-1-\u03b2, TNF-\u03b1 und 1L-6 mRNA in unterschiedlichem Ma\u00dfe gehemmt wurden, was darauf hindeutet, dass die Aktivierung von Makrophagen durch GiP-B1 mit TLR4 und den damit verbundenen Signalwegen zusammenh\u00e4ngen k\u00f6nnte. Um den Zusammenhang zwischen GiP-B1-aktivierten Makrophagen und dem TLR4\/NF-\u03ba B-Signalweg zu untersuchen, wurden in dieser Studie RAW264.7-Makrophagen mit TLR4 interferierender RNA (TLR4 siRNA) in vitro transfiziert, um zu erforschen, ob eine GiP-B1-Intervention Makrophagen \u00fcber den TLR4-vermittelten NF-\u03ba B-Signalweg aktivieren kann, um den molekularen Mechanismus der GiP-B1-aktivierten Makrophagen zu ergr\u00fcnden.<\/p>\n
Makrophagen sind wichtige Ausf\u00fchrungsorgane der angeborenen Immunit\u00e4t im K\u00f6rper. Als spezialisierte phagozytische Gewebezellen k\u00f6nnen sie konservierte pathogenassoziierte molekulare Muster (PAMPs) auf der Oberfl\u00e4che pathogener Mikroorganismen durch Mustererkennungsrezeptoren (PRRs) wie TLRs erkennen, die auf ihrer Oberfl\u00e4che exprimiert werden. \u00dcber nachgeschaltete Signalwege regulieren sie die Expression verschiedener Immunantwortgene, um Pathogene zu beseitigen. Die Forschung hat gezeigt, dass viele nat\u00fcrliche pflanzliche Polysaccharide als Liganden f\u00fcr TLR4 dienen k\u00f6nnen und die Makrophagensignalisierung sowohl \u00fcber MyD88-abh\u00e4ngige als auch -unabh\u00e4ngige Wege erleichtern, indem sie den Eintritt von NF-\u03ba B in den Zellkern f\u00f6rdern und an spezifische Erkennungssequenzen auf DNA-Promotoren binden, wodurch die Expression von Zytokinen wie IL-1, IL-6, TNF-\u03b1 usw. vermittelt wird. Diese Zytokine wirken auch als Stimulatoren von NF-\u03ba B, die NF-\u03ba B weiter aktivieren, um anhaltende Entz\u00fcndungsreaktionen auszul\u00f6sen und adaptive Immunreaktionen zu aktivieren.
\nAls Ausgangspflanze f\u00fcr die traditionelle chinesische Medizin Lakritze enthalten die wichtigsten medizinischen Substanzen der Lakritze aus geschwollenen Fr\u00fcchten nicht nur Chalkone mit krebshemmender Wirkung, sondern auch Polysaccharide mit antioxidativer, Alpha-Glucosidase hemmender und immunregulierender Wirkung. In den Voruntersuchungen unserer Forschungsgruppe wurde festgestellt, dass das rohe Polysaccharid GiP und seine gereinigten Bestandteile von Glycyrrhiza uralensis die Vermehrung von Makrophagen und Lymphozyten f\u00f6rdern. Unter ihnen hat die gereinigte Komponente GiP-B1 mit h\u00f6herem Gehalt eine signifikant f\u00f6rdernde Wirkung auf die Proliferation, Phagozytose und Zytokinsekretion von RAW264.7 Makrophagen. Die vorbereitende Forschungsgruppe verwendete Anti-TLR4 zur Behandlung von Zellen und fand heraus, dass der Wirkmechanismus mit der Aktivierung des TLR4\/NF-\u03ba B-Signalwegs nach der Probenintervention zusammenh\u00e4ngt. Dieser Artikel verwendet siRNA-Technologie, um das TLR4-Gen durch TLR4 siRNA zum Schweigen zu bringen, und stellt fest, dass GiP-B1 die Proliferation von RAW264.7-Makrophagen f\u00f6rdert und die Sekretion der Zytokine TNF-\u03b1, IL-1 \u03b2 und IL-6 hemmt. Dies deutet darauf hin, dass TLR4 an der Wirkung von GiP-B1 auf die Proliferation von RAW264.7-Makrophagen und die Zytokinsekretion beteiligt ist, d.h. die Aktivierung von Makrophagen durch GiP-B1 h\u00e4ngt mit TLR4 zusammen, was mit den Ergebnissen fr\u00fcherer Antik\u00f6rperblockade-Experimente \u00fcbereinstimmt. Basierend auf den Arten von Zytokinen, die von Makrophagen sezerniert werden, die durch GiP-B1 \u00fcber TLR4 aktiviert werden, wie TNF-\u03b1, IL-1-\u03b2, IL-6 usw., deutet dies darauf hin, dass die GiP-B1-Aktivierung von Makrophagen eine Polarisierung in Richtung M1-Typ induzieren kann. Makrophagen vom M1-Typ f\u00f6rdern nicht nur Entz\u00fcndungsreaktionen, sondern haben auch Antigenpr\u00e4sentationsf\u00e4higkeiten, die adaptive Immunreaktionen von T-Zellen aktivieren, Th1-Zell-Immunreaktionen induzieren und Wirtsimmun-Clearance-Funktionen gegen Krankheitserreger und Tumorzellen aus\u00fcben k\u00f6nnen. Fr\u00fchere Studien haben auch ergeben, dass GiP-B1 in vitro bestimmte Anti-Tumor-Wirkungen hat. Ob der Wirkmechanismus mit der F\u00f6rderung der Makrophagenpolarisierung durch GiP-B1 zusammenh\u00e4ngt und ob es die k\u00f6rpereigene Anti-Tumor-Immunfunktion durch die Regulierung von Makrophagen in der Tumormikroumgebung f\u00f6rdern kann, muss noch eingehender erforscht werden.
\nUm die Beziehung zwischen der GiP-B1-Aktivierung von Makrophagen und dem TLR4\/NF-\u03ba B-Weg weiter zu demonstrieren, untersuchte dieses Experiment auch die mRNA- und Proteinexpressions\u00e4nderungen der vorgelagerten regulatorischen Gene TLR4, des abh\u00e4ngigen Molek\u00fcls MyD88, der nachgelagerten Rezeptorgene NF-\u03ba Bp65, I-\u03ba B-\u03b1 usw. in Makrophagen, die durch GiP-B1 unter TLR4 siRNA-Intervention reguliert werden. Die Ergebnisse zeigten, dass durch die Ausschaltung des TLR4-Gens die Expression von TLR4-mRNA abnahm, der Gehalt an freiem NF-\u03ba Bp65 im Zellkern deutlich sank und auch die Aktivierung des NF-\u03ba B-Signalwegs entsprechend abnahm; GiP-B1 erh\u00f6ht nicht nur die Expression des TLR4-Gens in Makrophagen unter normalen Bedingungen, sondern reguliert auch die mRNA- und Proteinexpression des TLR4-Signal-abh\u00e4ngigen Molek\u00fcls MyD88 und der nachgeschalteten Gene NF - \u03ba Bp65 und p-I \u03ba B \u03b1 hoch, und p-I \u03ba B \u03b1 durch RNA-Interferenz, was beweist, dass GiP-B1 als einer der TLR4-Liganden fungieren kann, den TLR4\/NF - \u03ba B-Signalweg in Abh\u00e4ngigkeit von MyD88 aktiviert, den nuklearen Transkriptionsfaktor p65 in der NF - \u03ba B-Familie aktiviert, was zum Phosphorylierungsabbau von I \u03ba B und zur Dissoziation von NF - \u03ba B f\u00fchrt, und NF - \u03ba B f\u00f6rdert. \u00dcbertragung aus dem Zytoplasma in den Zellkern, Bindung an spezifische DNA-Sequenzen, Regulierung der Transkription von entz\u00fcndlichen Zytokinen, Zellproliferation (Anti-Apoptose) und anderen Genen, Beteiligung an Entz\u00fcndungsreaktionen, Immunreaktionen, usw. GiP-B1 aktiviert Makrophagen \u00fcber den TLR4\/MyD88\/NF-\u03ba B-Signalweg, der fast identisch ist mit dem Wirkungsweg von Polysacchariden in den oben genannten Studien.
\nZusammenfassend l\u00e4sst sich sagen, dass GiP-B1 die Immunfunktion von RAW264.7-Makrophagen \u00fcber den TLR4\/NF-\u03ba B-Signalweg regulieren kann, wobei seine regulierende Wirkung haupts\u00e4chlich \u00fcber den MyD88-abh\u00e4ngigen Weg erzielt wird. Dieses Experiment liefert experimentelle Beweise f\u00fcr die Aktivierung von Makrophagen durch Glycyrrhiza uralensis-Polysaccharide, die dazu beitragen, den Wirkmechanismus von Glycyrrhiza uralensis-Polysacchariden bei Entz\u00fcndungsreaktionen, Immunreaktionen und anderen Aspekten aufzukl\u00e4ren.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Glycyrrhiza uralensis polysaccharide GiP-B1 activates macrophage RAW264.7 via TLR4\/MyD88\/NF – \u03ba B signaling pathway The innate immune system is an important defense line for the body to resist pathogen invasion, and Toll like receptors (TLRs), as well as antigen-presenting cells such as macrophages and dendritic cells expressing TLRs, are important components of the innate immune […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n