Schnelles Screening von lipidsenkenden Wirkstoffen in Rhabarber unter Verwendung chemisch modifizierter biokompatibler L02-Leberzellmembranen
\nDas Screening von Wirkstoffen in der traditionellen chinesischen Medizin st\u00fctzt sich haupts\u00e4chlich auf die Aktivit\u00e4tsverfolgung mit monomeren Komponenten als Screening-Objekten, was die Nachteile eines hohen Arbeitsaufwands, einer umst\u00e4ndlichen Bedienung und einer geringen Effizienz hat. Im Vergleich zu den traditionellen Methoden der Aktivit\u00e4tsverfolgung ist die Zellmembranchromatographie (CMC) eine sich in den letzten Jahren rasch entwickelnde biologische Affinit\u00e4tschromatographietechnik, die sich durch eine spezifische Erkennung und eine effiziente Trennung auszeichnet. Das Grundprinzip der CMC besteht darin, die Zellmembran an die Oberfl\u00e4che eines Kieselgeltr\u00e4gers zu binden, um eine station\u00e4re Phase zu bilden. Der Zellmembranrezeptor kann spezifisch an Arzneimittelmolek\u00fcle binden, und die Wechselwirkung zwischen Arzneimittelmolek\u00fclen und Zellmembranrezeptoren kann mittels chromatographischer Analyse untersucht werden. CMC kombiniert die Vorteile der chromatographischen Technologie, der Zell- und Molekularbiologie und der Rezeptorpharmakologie, um eine ann\u00e4hernd dynamische Simulation des Wirkungsprozesses von pharmazeutischen Wirkstoffen in vivo innerhalb der chromatographischen S\u00e4ule zu erreichen; im Vergleich zu den \u00fcblicherweise verwendeten Adsorbentien wie Ionenaustauscherharzen und makropor\u00f6sen Adsorptionsharzen hat CMC den Vorteil, die chromatographische Trennung mit einem Aktivit\u00e4tsscreening zu kombinieren. Es ist einfach zu bedienen, schnell und stabil und hat eine hohe Empfindlichkeit, wodurch es sich besonders f\u00fcr das Screening von Wirkstoffen in komplexen Systemen wie der traditionellen chinesischen Medizin eignet.
\nBei der Vorbereitung der Zellmembran-Chromatographie kann man zwischen physikalischer Adsorption und chemischer Modifikation unterscheiden, je nach den unterschiedlichen Bindungsformen von Zellmembran und Kieselgeltr\u00e4ger. Bei der biologischen Affinit\u00e4tschromatographie mit Zellmembranen durch physikalische Adsorption wird der Verschmelzungseffekt der Zellmembran selbst und der Adsorptionseffekt der Hydroxylgruppen des Siliciums auf der Oberfl\u00e4che des Kieselgels ausgenutzt; diese Art von Kraft ist relativ schwach, so dass sich die Zellmembran leicht vom Tr\u00e4ger abl\u00f6st, was zu einer kurzen Lebensdauer der Chromatographies\u00e4ule f\u00fchrt. Die chemische Modifizierung der Zellmembran f\u00fcr die biologische Affinit\u00e4tschromatographie beinhaltet eine kovalente Bindung zwischen Kieselgel und Zellmembran; die Silanolgruppe des Kieselgels wird durch eine Kondensationsreaktion mit einem Silankopplungsmittel in Aminogruppen umgewandelt, die sich mit Glutaraldehydmolek\u00fclen vernetzen. Die Zellmembran enth\u00e4lt eine gro\u00dfe Anzahl von Aminogruppen, die dazu neigen, bei Raumtemperatur Aldoamin-Kondensationsreaktionen einzugehen, wodurch eine kovalente Verbindung zwischen Kieselgel und Zellmembran erreicht wird. Bei der chemisch modifizierten Zellmembran-Bioaffinit\u00e4tschromatographie ist das Tr\u00e4gerkieselgel kovalent an die Zellmembran gebunden, was relativ stabil ist, und die Zellmembran l\u00e4sst sich nicht so leicht abl\u00f6sen, wodurch sich die Lebensdauer der Chromatographies\u00e4ule verl\u00e4ngert.<\/p>\n
Rhabarber ist ein authentisches Heilkraut aus der Provinz Gansu und eines der am h\u00e4ufigsten verwendeten traditionellen chinesischen Arzneimittel in der klinischen Praxis; es hat pharmakologische Wirkungen wie antibakteriell, antitumor\u00f6s, entz\u00fcndungshemmend, antiviral und lipidsenkend. Viele Wissenschaftler und Forschungsgruppen haben die lipidsenkende Wirkung von Rhabarber in fr\u00fcheren Studien best\u00e4tigt, und unsere Forschungsgruppe hat 30% Ethanolextrakt als wirksamen Teil zur Lipidsenkung bei hyperlipid\u00e4mischen Ratten untersucht, aber seine spezifische pharmakologische Substanzbasis ist immer noch unklar; Die Forschungsgruppe hat auch ein biologisches Affinit\u00e4tschromatographiematerial f\u00fcr die physische Adsorption von L02 Leberzellmembranen vorbereitet, aber seine Zellmembranabl\u00f6sung ist schwer und seine Verwendung ist begrenzt. Aus diesem Grund wurde in diesem Experiment APTES modifiziertes Kieselgel als Tr\u00e4ger verwendet, um ein biologisches Affinit\u00e4tschromatographiematerial f\u00fcr die L02-Leberzellmembran herzustellen. Das Target auf der Zellmembranoberfl\u00e4che wurde zur spezifischen Adsorption der chemischen Komponenten im 30%-Ethanolextrakt von Rhabarber verwendet. Die Ver\u00e4nderungen der chromatographischen Peaks der einzelnen chemischen Komponenten vor und nach der Adsorption wurden mittels HPLC analysiert. Auf der Grundlage der Peakfl\u00e4chen-\u00c4nderungsrate des chromatographischen Peaks wurden die lipidsenkenden aktiven Komponenten von Rhabarber schnell \u00fcberpr\u00fcft; au\u00dferdem wurde die Wiederverwendbarkeit des Materials untersucht, was neue Ideen f\u00fcr ein Hochdurchsatz-Screening der Substanzbasis der lipidsenkenden Wirkung von Rhabarber liefert.<\/p>\n
Silikongel unterliegt Vernetzungs- und Kondensationsreaktionen mit APTES und Glutaraldehyd und wird kovalent mit der Zellmembran verbunden, um ein mit APTES als Tr\u00e4ger modifiziertes L02-Zellmembran-Bioaffinit\u00e4tsmaterial herzustellen. Rasterelektronenmikroskopie und Infrarotspektroskopie best\u00e4tigen die erfolgreiche Herstellung. Das mit APTES modifizierte L02-Zellmembran-Bioaffinit\u00e4tsmaterial wurde zur Adsorption von 30%-Ethanolextrakt aus Rhabarber verwendet, und die Ergebnisse zeigten, dass 11 Komponenten spezifisch gebunden werden konnten; Darunter 4 Anthrachinonglykoside, 5 Anthrachinonglykoside und 2 unbekannte Komponenten, von denen Aloe Emodin \ud83d\ude2f - \u03b2 - D-Glucosid, Rhein \ud83d\ude2f - \u03b2 - D-Glucosid, Emodin \ud83d\ude2f - \u03b2 - D-Glucosid und die unbekannte Komponente 1 die wichtigsten spezifischen Komponenten sind, die als potenzielle Wirkstoffe f\u00fcr die \u00dcberpr\u00fcfung der lipidsenkenden Aktivit\u00e4t verwendet werden k\u00f6nnen. Aufgrund der zahlreichen Targets auf der Oberfl\u00e4che von Zellmembranen ist dieses Material jedoch nur f\u00fcr ein vorl\u00e4ufiges Screening von lipidsenkenden Wirkstoffen geeignet; und in der sp\u00e4teren Phase muss die LC-MS\/MS f\u00fcr die vorl\u00e4ufige strukturelle Identifizierung von zwei unbekannten Komponenten verwendet werden. Im Vergleich zur physikalischen Adsorption von L02-Zellmembran-Bioaffinit\u00e4tsmaterialien f\u00fchrt dieses Material bis zu einem gewissen Grad chemische kovalente Bindungen ein, wodurch die Abl\u00f6sung der Zellmembran vermieden und die Nutzungszeiten verl\u00e4ngert werden. Es kann f\u00fcr ein schnelles Screening von Wirkstoffen in Rhabarber zur Senkung der Blutfette verwendet werden und kann auch als Referenz f\u00fcr ein schnelles Screening von anderen Wirkstoffen zur Senkung der Blutfette dienen.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Rapid screening of lipid-lowering active ingredients in rhubarb using chemically modified L02 liver cell membrane biocompatible materials The screening of active ingredients in traditional Chinese medicine mainly relies on activity tracking, with monomer components as the screening objects, which has the disadvantages of large workload, cumbersome operation, and low efficiency. Compared with traditional activity tracking […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n