Gleichzeitige Bestimmung von sechs Flavonoiden in Wuyao-Bl\u00e4ttern durch Ultra-Hochleistungs-Fl\u00fcssigkeitschromatographie-Tandem-Massenspektrometrie
\nLindera aggregata (Sims) Kosterm, eine Pflanze aus der Familie der Kampfergew\u00e4chse und der Gattung Piper, hat entz\u00fcndungshemmende, schmerzlindernde, antioxidative und tumorhemmende Wirkungen. Sie wird haupts\u00e4chlich in den s\u00fcd\u00f6stlichen K\u00fcstenprovinzen Chinas angebaut, wobei der Kreis Tiantai in der Provinz Zhejiang der bekannteste ist, weshalb sie auch Tiantai Wuyao genannt wird. Im Jahr 2018 wurde er als eine der neuen \"Zhejiang Eight Flavors\" in Zhejiang ausgew\u00e4hlt. Die moderne pharmakologische Forschung hat gezeigt, dass die schwarze Medizin auch immunmodulatorische Wirkungen auf das zentrale Nervensystem und das Herz-Kreislauf-System hat, was ihre Marktaussichten breit macht. Die medizinischen Teile von Wuyao wachsen jedoch langsam und brauchen oft 8-10 Jahre, um die Anforderungen f\u00fcr eine hochwertige Heilpflanzenverarbeitung zu erf\u00fcllen. W\u00e4hrend des Wachstumszyklus werden die St\u00e4ngel- und Blattteile oft weggeworfen, was zu einer geringen Nutzung der Ressourcen f\u00fchrt. In den volkst\u00fcmlichen Gegenden von Zhejiang werden Wuyao-Bl\u00e4tter h\u00e4ufig zur Behandlung von akuter Zellulitis, rheumatischer Arthritis und anderen Entz\u00fcndungen verwendet und auch oft zu Teegetr\u00e4nken verarbeitet, die fettsenkend wirken, die Leber sch\u00fctzen und andere gesundheitliche Vorteile bieten. Fr\u00fchere Studien haben gezeigt, dass Extrakte aus Wuyao-Bl\u00e4ttern eine gewisse lipidsenkende Wirkung haben. Das Forschungsteam f\u00fchrte eine pharmakologische Korrelationsstudie \u00fcber Wuyao-Blattextrakte durch und fand heraus, dass sie einen bestimmten Wirkmechanismus gegen Hyperlipid\u00e4mie und Osteoporose haben. Gleichzeitig wurden die Wuyao-Bl\u00e4tter in der Anfangsphase auch systematisch von chemischen Komponenten getrennt und extrahiert. Sechs Flavonoide wurden zum ersten Mal aus dem Ethanolextrakt der Wuyao-Bl\u00e4tter isoliert, die wie folgt identifiziert wurden Kaempferol-3-O - \u03b1 - L-Rhamnosid (1), Quercetin (2), Kaempferol-3-O - \u03b2 - D-Xylosid (3), Kaempferol-3-O - \u03b1 - L-Arabinofuranosid (4), Kaempferol-3-O - (2 \u2033 -3-O-trans-3-O-p-3-O-coumaroyl) - \u03b1 - L-Rhamnosid (5), Kaempferol-3-O - (2 \u2033, 4 \u2033 -3-O-di-3-3-O-3-3-O-di-3-glucosid) O-trans-3-O-p-3-O-coumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnosid (6), chemische Struktur in Abbildung 1 dargestellt.<\/p>\n
Gegenw\u00e4rtig gibt es einschl\u00e4gige Forschungsberichte \u00fcber die Qualit\u00e4tsbewertung von Wuyao-Bl\u00e4ttern. Yi et al. bestimmten mittels HPLC den Gehalt von vier Flavonoiden in Wuyao-Bl\u00e4ttern unterschiedlicher Herkunft aus der Provinz Hunan. Sun et al. bestimmten den Gesamtflavonoidgehalt in Wuyao-Blattextrakten mittels UV-Spektrophotometrie und untersuchten die f\u00fcr die Extraktion der Gesamtflavonoide relevanten Faktoren, um den Extraktionsprozess zu optimieren. Gleichzeitig verwendeten Sun et al. HPLC, um den Gehalt von vier sesquiterpenoiden Laktonen in Wuyao-Bl\u00e4ttern unterschiedlicher Herkunft zu bestimmen. Dabei handelt es sich jedoch um traditionelle Nachweismethoden, denen es an hoher Effizienz und Genauigkeit bei der Inhaltsbestimmung mangelt. Mit der Weiterentwicklung der Massenspektrometrie-Technologie wurde die Ultrahochleistungs-Fl\u00fcssigkeitschromatographie-Tandem-Massenspektrometrie-Technologie mit hoher Effizienz, hoher Spezifit\u00e4t und hoher Empfindlichkeit entwickelt. Die Chromatographie-Tandem-Massenspektrometrie (UPLC-MS\/MS) hat sich zu einer wichtigen Analysemethode f\u00fcr den Nachweis der Qualit\u00e4t traditioneller chinesischer Heilmittel entwickelt. Daher wird in dieser Studie die UPLC-MS\/MS-Technologie verwendet, um die sechs wichtigsten Flavonoide in Wuyao-Bl\u00e4ttern unterschiedlicher Herkunft quantitativ zu untersuchen und die Entropie-Gewicht-\u03b1-L-approximale ideale L\u00f6sung-Ranking-Methode (TOPSIS) f\u00fcr die Analyse und Bewertung zu kombinieren, um eine wissenschaftliche Grundlage f\u00fcr die interne Qualit\u00e4tskontrolle von Wuyao-Bl\u00e4ttern zu schaffen.<\/p>\n
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Auswahl der Extraktionsbedingungen. In dieser Studie wurde die UPLC-MS\/MS-Methode zur gleichzeitigen Bestimmung des Gehalts von sechs Indikatorverbindungen verwendet, n\u00e4mlich Kaempferol-3-O - \u03b1 - L-Rhamnosid (1), Quercetin (2), Kaempferol-3-O - \u03b2 - D-Xylosid (3), Kaempferol-3-O - \u03b1 - L-Arabinofuranosid (4), Kaempferol-3-O - (2\" - trans - p-Coumaroyl) - \u03b1 - L-Rhamnosid (5) und Kaempferol-3-O - (2\", 4 \"- di trans - p-Coumaroyl) - \u03b1 - L-Rhamnosid (6), in Wuyao-Bl\u00e4ttern innerhalb von 10 Minuten. Die Methanolkonzentrationen betrugen 30%, 50% bzw. 70%. Auf der Grundlage der Analyse des Spektrums wurde 70% Methanol f\u00fcr die beste Extraktionswirkung ausgew\u00e4hlt. Gleichzeitig wurde ein Vergleich zwischen der Erhitzung unter R\u00fcckfluss und der Ultraschallextraktion durchgef\u00fchrt. Nach den Ergebnissen der Inhaltsstoffe waren die erzielten Extraktionsraten vergleichbar. In Anbetracht des Zeitaufwands und der Kosten f\u00fcr Verbrauchsmaterialien wurde die Ultraschallextraktion gew\u00e4hlt.
\nChromatographie-Massenspektrometrie-Bedingungen. In dieser Studie wurden drei mobile Phasensysteme untersucht: Acetonitril-Wasser, Acetonitril-0,1% Ameisens\u00e4ure-Wasser und Acetonitril-0,1% Ammoniumformiat-Wasser. Die Peakfl\u00e4che und die Peakform von sechs Flavonoiden wurden als Bewertungsindikatoren verwendet, um das geeignete Mobilphasensystem zu bestimmen. Es wurde festgestellt, dass, wenn Acetonitril-Wasser als mobile Phase gew\u00e4hlt wurde, gab es ein Tailing-Ph\u00e4nomen in den Verbindungen von Kaempferol-3-O - (2 \"- trans-pcoumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnosid und Kaempferol-3-O - (2\", 4 \"- di-trans-pcoumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnosid; Wenn Acetonitril 0.1%-Ammoniumformiat-Wasser als mobile Phase gew\u00e4hlt wird, zeigt Quercetin-3-O - \u03b1 - L-Arabinofuranosid ein leichtes Tailing; Wenn Acetonitril 0,1%-Ameisens\u00e4ure-Wasser als mobile Phase gew\u00e4hlt wurde, waren die Peakformen aller sechs Verbindungen relativ symmetrisch. Daher wurde Acetonitril 0,1% Ameisens\u00e4ure-Wasser als mobiles Phasensystem gew\u00e4hlt. Bei der Auswahl der Massenspektrometriebedingungen wurden in der Studie positive und negative Ionenmodi verwendet, um den Gehalt der sechs Zielverbindungen zu bestimmen. Um sicherzustellen, dass die Zielverbindungen eine bessere Stabilit\u00e4t, h\u00f6here Ansprechwerte und bessere Peakformen aufweisen, haben mehrere wiederholte Experimente gezeigt, dass die sechs Flavonoidverbindungen durch die Verwendung des Negativ-Ionen-Scanning-Modus f\u00fcr den Nachweis stabiler sind und unter den Nachweisbedingungen bessere Peakformen und Ansprechwerte aufweisen. Gleichzeitig waren bei der Untersuchung der Chromatographie-Massenspektrometrie-Bedingungen die Retentionszeiten der Flavonoide 2 und 5, die aus dem Ionenchromatogramm in Abbildung 2 extrahiert wurden, im Wesentlichen identisch. Im Vergleich zu den traditionellen HPLC-Analysetechniken ist die Chromatographie-Massenspektrometrie, die auf der Analyse des Masse-Ladungs-Verh\u00e4ltnisses basiert, nicht auf die Trennung von Peak zu Peak angewiesen und verf\u00fcgt \u00fcber eine kurze Signalerfassungszeit und eine hohe Empfindlichkeit. Daher wurde in dieser Studie die UPLC-MS\/MS-Analysetechnik zur gleichzeitigen Bestimmung von sechs Flavonoiden in Wuyao-Bl\u00e4ttern verwendet, die weitere Vorteile bietet.
\nAnalyse der Ergebnisse. In dieser Studie wurden medizinische Proben aus 10 Wuyao-Anbaugebieten in China gesammelt und mit Hilfe der UPLC-MS\/MS-Technologie gleichzeitig der Gehalt von sechs chemischen Komponenten in Wuyao-Bl\u00e4ttern bestimmt. Die TOPSIS-Methode mit Entropie-Gewichtung wurde verwendet, um die sechs Bestandteile aus den 10 Anbaugebieten umfassend zu analysieren und zu bewerten. Das umfassende Ranking sah wie folgt aus: Tiantai, Zhejiang>Jinhua, Zhejiang>Changsha, Hunan>Ningde, Fujian>Kunming, Yunnan>Tonglu, Zhejiang>Guilin, Guangxi>Yingtan, Jiangxi. Die Ergebnisse zeigten, dass die umfassende Qualit\u00e4t der Wuyao-Bl\u00e4tter in Tiantai, Zhejiang, relativ hoch war, was mit dem traditionellen Glauben zusammenh\u00e4ngt, dass Tiantai, Zhejiang, ein echtes Wuyao-Heilmittelproduktionsgebiet ist. Gleichzeitig best\u00e4tigt es auch den Eintrag im Compendium of Materia Medica, dass Tiantai bei Wuyao der Gewinner ist; im Dictionary of Traditional Chinese Medicine wird festgehalten, dass die Produktion von Wuyao in Zhejiang am gr\u00f6\u00dften und die Qualit\u00e4t der in Tiantai, Zhejiang, hergestellten Produkte am besten ist, weshalb sie \"Tiantai Wuyao\" oder \"Tai Wuyao\" genannt werden. Gleichzeitig spiegeln die Bewertungsergebnisse auch wider, dass es signifikante Unterschiede im Gehalt der sechs wichtigsten Flavonoide in Wuyao-Bl\u00e4ttern verschiedener Herkunft gibt, und es gibt auch signifikante Unterschiede in Wuyao-Bl\u00e4ttern aus verschiedenen St\u00e4dten in derselben Provinz. Dies k\u00f6nnte mit den Quellen der Wuyao-Einf\u00fchrung in verschiedenen Anbaubasen und unterschiedlichen \u00f6kologischen Umgebungen zusammenh\u00e4ngen.
\nDerzeit ist Wuyao Ye als neues Ressourcennahrungsmittel zugelassen, so dass seine Produktentwicklung weiter erforscht werden wird. In dieser Studie wurde eine Methode entwickelt, die einfach zu bedienen ist, eine gute Pr\u00e4zision, Stabilit\u00e4t und Wiederholbarkeit aufweist und gleichzeitig den Gehalt von sechs Flavonoiden in Wuyao Ye bestimmen kann. Sie kann zur quantitativen Analyse und umfassenden Bewertung der wichtigsten Flavonoide in Wuyao Ye verwendet werden, und die verwendete TOPSIS-Methode mit Entropiegewicht bietet auch eine theoretische Grundlage f\u00fcr die Bewertung der Qualit\u00e4t anderer Heilkr\u00e4uter mit medizinischem Wert.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Simultaneous determination of six flavonoids in Wuyao leaves by ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry Lindera aggregata (Sims) Kosterm, a plant belonging to the Camphor family and the Piper genus, has anti-inflammatory, analgesic, antioxidant, and anti-tumor effects. It is mainly produced in southeastern coastal provinces of China, with Tiantai County in Zhejiang Province being […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n