Erstellung eines UPLC-Fingerprint-Spektrums und Bestimmung von Indikatorkomponenten für das Heilkraut Verbena officinalis
Verbena officinalis L., eine Pflanze aus der Familie der Verbenaceae, ist der getrocknete oberirdische Teil der Pflanze. Sie wirkt durchblutungsfördernd, zerstreuend, entgiftend, harntreibend, reduziert die Gelbfärbung und fängt Malaria ab. Studien zur chemischen Zusammensetzung haben gezeigt, dass Eisenkraut ätherische Öle, Iridoide, Phenylpropanoide, Flavonoide und andere Bestandteile enthält, die verschiedene pharmakologische Wirkungen haben, wie z. B. entzündungshemmend, antioxidativ, schmerzlindernd, husten- und asthmamildernd, gegen Myokard- und Hirnischämie. In der Ausgabe 2020 des Arzneibuchs der Volksrepublik China, Teil 1, werden Oleanolsäure und Ursolsäure als Indikatoren für die Inhaltsstoffe des Eisenkrauts verwendet, aber die Spezifität ist nicht sehr hoch. Darüber hinaus werden in der traditionellen chinesischen Medizin traditionelle Abkochungen verwendet, und lipophile Bestandteile wie Oleanolsäure und Ursolsäure werden als Inhaltsindikatoren verwendet. Es ist diskussionswürdig, ob dies bei der Qualitätskontrolle von Heilkräutern hilfreich ist. In der Literatur wird berichtet, dass die Messung des hohen Gehalts an Cyclohexenether-Terpenoidglykosiden, wie Verbascosid und Verbascosid, sowie des Phenylpropanoidglykosids Verbascosid in Verbascosid eine gewisse Spezifität und positive Bedeutung für die Sicherstellung der klinischen Wirksamkeit von Verbascosid hat. Die oben genannten Inhaltsindikatoren wurden bei der Qualitätskontrolle von Verbascosid-Standardabkochungen und -Granulaten verwendet. Fingerabdruck-Spektren wurden ebenfalls für die Qualitätskontrolle von Verbascosid verwendet, aber die Identifizierung der chemischen Komponenten konzentriert sich hauptsächlich auf Verbascosid, Verbascosid und Verbascosid. Es gibt keine Berichte über die Untersuchung anderer wasserlöslicher Bestandteile. In dieser Studie wurden die Erstellung eines Fingerabdruckspektrums von Eisenkraut in Verbindung mit einer hochauflösenden Massenspektrometrie-Identifizierung sowie die Erstellung von Methoden zur Bestimmung des Gehalts von vier Wirkstoffen, nämlich Verbascosid, Verbascosid, Verbascosid und Isoverbascosid, als Referenz für die allgemeine Qualitätskontrolle von Eisenkraut verwendet.

Auswahl der Inhaltsindikatoren. Laut Literaturberichten und unseren früheren Untersuchungen kann Verbascosid unter bestimmten Bedingungen in Isoverbascosid umgewandelt werden. Sowohl Verbascosid als auch Isoverbascosid haben antioxidative, antihämolytische, anti-Angiotensinase-Aktivität, blutdrucksenkende und die Immunfunktion verbessernde Wirkungen. Dies deutet darauf hin, dass Verbascosid und Isoverbascosid für die Qualitätskontrolle und Bewertung von Eisenkraut von großer Bedeutung sind. Daher wird unser Unternehmen auf der Grundlage der bisherigen Forschung die Bestimmung von Isoverbascosid verstärken, um eine Referenz für die Qualitätskontrolle chinesischer pflanzlicher Zubereitungen, die Eisenkraut enthalten, zu schaffen. Studien zur chemischen Zusammensetzung haben gezeigt, dass sowohl Verbascosid als auch Verbascosid Iridoidglycoside sind. Verbascosid, auch als 5-Hydroxyverbascosid bekannt, hat im Vergleich zu Verbascosid eine zusätzliche Hydroxylgruppe an Kohlenstoffposition 5. Die chemische Struktur der beiden Komponenten ist ähnlich, und ihre Absorptionskurven im UV-sichtbaren 3D-Spektrum sind im Wesentlichen identisch. Daher empfiehlt es sich, die beiden Komponenten für den Nachweis zu kombinieren und die Gesamtmenge der beiden Komponenten zu berechnen. In dieser Studie wurden vier Methoden zur Bestimmung des Wirkstoffgehalts festgelegt. Die Zubereitungsmethode der Testlösung stimmte mit dem Fingerabdruckspektrum überein, aber die chromatographischen Bedingungen wurden separat festgelegt und stimmten nicht mit dem Fingerabdruckspektrum überein. Die wichtigsten Aspekte waren der Trennungsgrad, die Reinheit und die Reproduzierbarkeit der Indikatorkomponenten. Die Ergebnisse der Gehaltsbestimmung zeigten, dass es gewisse Unterschiede im Gehalt an Verbascosid, Verbascosid, Verbascosid und Isoverbascosid in den verschiedenen Anbaugebieten des Eisenkrauts gab. Sogar innerhalb desselben Anbaugebiets gab es Unterschiede im Gehalt verschiedener Chargen von Kräutern, die vor allem mit Unterschieden in der Erntezeit, den Verarbeitungsmethoden, den Lagerungsmethoden und der Lagerungszeit der Kräuter zusammenhingen. Darüber hinaus stellte unser Unternehmen bei seinen Untersuchungen fest, dass es erhebliche Unterschiede im Gehalt an Verbascosid, Verbascosid, Verbascosid und Isoverbascosid in den verschiedenen medizinischen Teilen desselben Eisenkrautkrauts gibt. Dabei ist der Gehalt an Verbascosid, Verbascosid, Verbascosid und Isoverbascosid in den Blüten und Blättern deutlich höher als in den Stängeln. Daher sind eine strenge Kontrolle des Erntezeitpunkts von Heilkräutern und die Gewährleistung des Verhältnisses von Blüten und Blättern in den Kräutern von großer Bedeutung für die Qualitätskontrolle von Eisenkraut-Heilkräutern.
Untersuchung der Fingerabdruckspektren. Die UPLC-Methode wurde zur Erstellung des Fingerabdruckspektrums von Herba Verbena verwendet. Die chromatographischen Bedingungen des Fingerabdruckspektrums und die Zubereitungsmethode der Testlösung wurden systematisch untersucht. Die Ergebnisse der Ähnlichkeitsberechnung zeigten, dass die Ähnlichkeit der Fingerabdruckspektren von 15 Chargen medizinischer Materialien über 0,9 lag und die Gesamtähnlichkeit hoch war, was für die Identifizierung und Qualitätskontrolle von Herba Verbena verwendet werden kann. Durch den Einsatz der hochauflösenden Massenspektrometrie zur Identifizierung gemeinsamer Peaks wurden drei Arten von Wirkstoffen identifiziert, nämlich Iridoidglykoside, Phenylpropanoidglykoside und Flavonoide. Zum ersten Mal wurden Fingerprint-Spektren zur Charakterisierung der drei Arten von Wirkstoffen in Eisenkraut verwendet, und zum ersten Mal wurden Isoverbascosid, Luteolin 7-Diglucosid und Apigenin 7-O-Glucuronid anhand des Fingerprint-Spektrums von Eisenkraut identifiziert, was die Gesamtintegrität und die Eigenschaften von Eisenkraut besser widerspiegelt. Unter Verwendung der relativen Peakfläche gemeinsamer Peaks als Variablen wurden die 15 Chargen der medizinischen Materialien durch Clusteranalyse und Hauptkomponentenanalyse in drei Kategorien eingeteilt. Darunter wiesen die medizinischen Materialien aus Henan, Jiangsu und Guizhou ähnliche chemische Zusammensetzungen auf. Die OPLS-DA fand sieben chromatographische Peaks mit signifikanten Unterschieden in den Peakverhältnissen, nämlich die Peaks 2, 6, 16, 10, 11, 5 und 9. Diese Unterschiede können mit Unterschieden in der Erntezeit und den Verarbeitungsmethoden der medizinischen Materialien zusammenhängen.
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass diese Methode die Qualitätsunterschiede von chinesischen Heilkräutern unterschiedlicher Herkunft wirksam analysieren kann und eine Referenz für die Bewertung der Qualität chinesischer Heilkräuter unterschiedlicher Herkunft darstellt.