Identifizierung von Ficus microcarpa und seiner verwandten Arten anhand der ITS2-Sequenz und des HPLC-Fingerabdrucks
Der Ficus pandurata Hance, auch als Milchbaum oder Milchsamen bekannt, ist eine Pflanze der Gattung Ficus aus der Familie der Moraceae. Er ist hauptsächlich in Guangdong, Guangxi, Jiangxi, Hainan, Fujian, Hunan, Hubei, Jiangxi, Anhui, Zhejiang und anderen Orten verbreitet. Laut dem "Dictionary of Traditional Chinese Medicine", "Fujian Medicinal Records" und "Jiangxi Folk Herbal Formula Testing" werden die Wurzel- und Blattteile des Ficus microcarpa als Medizin verwendet. Er hat eine milde Natur, einen süßen und leicht kühlen Geschmack und ist ungiftig. Er hat die Wirkung, Hitze zu beseitigen, die Milz zu beleben, den Appetit anzuregen, das Qi zu nähren und Flüssigkeiten zu erzeugen sowie Feuchtigkeit und Stagnation zu vertreiben. Er wird verwendet, um Wind und Feuchtigkeit zu vertreiben, zu entgiften, Malaria zu behandeln und die Milchbildung zu fördern. In der "Jiangxi Folk Herbal Formula Testing" wird beispielsweise festgehalten, dass mäßige Mengen von Ficus microcarpa-Wurzeln und Malan zur Behandlung von Gelbsucht verwendet werden können, wenn sie oral in einer Abkochung mit klarem Wasser eingenommen werden; eine angemessene Menge von Banyan-Wurzel, Brahma-Wurzel, Stephania tetrandra, Acanthopanax senticosus-Wurzel und Wermutstängel kann zur Behandlung von Lendenwirbelsäulenschmerzen mit einer Mischung aus Baijiu und Wasser desselben Volumens verwendet werden. In Guangdong hat Ficus microcarpa eine lange Geschichte als Nahrungsmittel und Medizin und eine tiefe Massenbasis, die zu einem wichtigen Teil der lokalen charakteristischen tonischen Diät und den Rohstoffen der diätetischen Medizin geworden ist. Die moderne Forschung hat gezeigt, dass Ficus microcarpa aktive Inhaltsstoffe wie Triterpenoide, Flavonoide, Cumarine und Phenolsäuren enthält. Bergamotte-Lacton hat verschiedene pharmakologische Wirkungen wie Anti-Tumor, Blutzuckerregulierung, Verbesserung der Schlaflosigkeit, Vorbeugung und Behandlung von Osteoporose, Anti-Aging, entzündungshemmende und antiallergische Wirkungen; Psoralen hat pharmakologische Wirkungen wie Anti-Osteoporose, Neuroprotektion, Anti-Tumor, östrogenähnlich, entzündungshemmend usw.; beide haben Anti-Osteoporose-Wirkungen, sind reichlich vorhanden und leicht verfügbar und sind repräsentative Wirkstoffe von Ficus microcarpa.
Derzeit gibt es drei Haupttypen von Mischprodukten aus Ficus microcarpa Heilkräutern auf dem Markt: Ficus microcarpa var. holophylla, Ficus microcarpa var. angustifolia und Ficus microcarpa var. hirta. Quanyuan Qinye Ficus und Tiaoye Ficus sind Varianten von Qinye Ficus, wobei die Blattformen zwischen den drei Arten übergehen. Außerdem werden sowohl Ficus microcarpa als auch Ficus microcarpa mit ihren Wurzeln als Medizin verwendet und haben ein milchiges Aroma. Sie werden auf dem Markt oft unter dem Handelsnamen Milchbaumwurzeln verkauft, was zu einer uneinheitlichen Qualität der medizinischen Materialien führt. Gegenwärtig konzentriert sich die moderne Forschung über Ficus microcarpa hauptsächlich auf die Pharmakognosie, die chemische Zusammensetzung und die pharmakologische Aktivität, und es gibt keine Berichte über die Qualitätsstandards von Ficus microcarpa. Die DNA-Barcode-Identifizierung ist eine molekularbiologische Identifizierungsmethode, bei der eine standardisierte, relativ kurze DNA-Sequenz zur Artenidentifizierung verwendet wird. Diese Methode ist von großer Bedeutung, um die Entwicklung und Nutzung neuer Ressourcen der chinesischen Medizin zu fördern, den Mangel an Fachleuten für die Identifizierung chinesischer Medizin zu lindern, den Verkehr auf den Märkten für chinesische Medizin zu steuern und die versteckten Probleme mit dem Saatgut zu lösen, die morphologisch nur schwer zu lösen sind. Der HPLC-Fingerprint ist eine zuverlässige Methode zur Identifizierung der Authentizität, zur Bewertung der Qualitätskonsistenz und der Stabilität der chemischen Komponenten der traditionellen chinesischen Medizin, die durch chromatographische Techniken gewonnen werden, die auf dem Verständnis der Gesamtwirkung von Substanzgruppen basieren. In diesem Experiment wurden die ITS2-Sequenzen zur molekularen Identifizierung von Ficus microcarpa und verwandten Arten verwendet. Es wurden HPLC-Fingerprint-Spektren erstellt, um die Unterschiede im Gehalt an Psoralen und Bergamotte-Lacton zu bestimmen und Ficus microcarpa und die mit ihm verwandten Arten aus verschiedenen Herkunftsgebieten zu identifizieren. Dies bietet eine wissenschaftliche Grundlage für die Qualitätskontrolle und Bewertung von Ficus microcarpa-Arzneimitteln.

Im Rahmen des Versuchs wurden die ITS2-Sequenz, der genetische K2P-Abstand, die NJ-Baum-Clustering-Analyse und die Sekundärstruktur von Ficus microcarpa und seinen verwandten Arten analysiert. Sowohl die NJ-Baum-Clustering-Analyse als auch die Sekundärstruktur können Ficus microcarpa und seine verwandten Arten effektiv unterscheiden. Der genetische Abstand innerhalb und zwischen K2P-Arten hat jedoch gewisse Einschränkungen bei der Identifizierung von Ficus microcarpa und seinen verwandten Arten und erfordert die Kombination von NJ-Baumclusteranalyse und Sekundärstruktur zur Identifizierung.

In dem Versuch wurden chromatografische Bedingungen wie verschiedene Extraktionslösungsmittel, Detektionswellenlängen, Säulentemperaturen, mobile Phasensysteme und chromatografische Säulen untersucht. Die Ergebnisse zeigten, dass bei der Verwendung von 95% Ethanol-Extraktion, XBridge Peptide BEH C18 (5 μm, 4.6mm × 250mm) Chromatographiesäule, Detektionswellenlänge 330nm, Säulentemperatur 30 ℃, Flussrate 1.0mL/min und mobiler Phase Methanol-PH8 Phosphatpufferlösung, die Peakformen und der Trennungsgrad der einzelnen Farbspektren gut waren. Wir haben HPLC-Fingerprint-Spektren von Ficus microcarpa und seinen verwandten Arten erstellt und damit die Lücke in der Untersuchung der charakteristischen HPLC-Spektren von Ficus microcarpa geschlossen. Die Fingerprint-Spektren von Ficus microcarpa und seinen verwandten Arten zeigen signifikante Unterschiede in der Anzahl der charakteristischen Peaks und der relativen Retentionszeit, wodurch Ficus microcarpa intuitiv von seinen verwandten Arten unterschieden werden kann und die Qualität von Ficus microcarpa bewertet werden kann. Es gibt insgesamt 10 chromatographische Peaks in Ficus microcarpa unterschiedlicher Herkunft, von denen die meisten in Ficus microcarpa und Ficus microcarpa nicht nachgewiesen wurden. Die Ähnlichkeit zwischen eng verwandten Arten und Ficus microcarpa beträgt weniger als 0,807; es besteht ein signifikanter Unterschied im Gehalt an Psoralen und Bergamotte-Lacton zwischen Ficus microcarpa und seinen verwandten Arten. Der Gehalt von Ficus microcarpa und Ficus microcarpa ist signifikant niedriger als der von Ficus microcarpa, was auf einen Qualitätsunterschied zwischen Ficus microcarpa und seinen verwandten Arten hinweist. Die Verwendung des Gehalts an Psoralen und Bergamottlacton als Indikatoren für die Qualitätskontrolle von Ficus microcarpa ist von großer praktischer Bedeutung. Daher können die Fingerabdruck-Spektren, die Ähnlichkeit und die Bestimmung des Gehalts objektiv und genau die Echtheit von Ficus microcarpa-Arzneimitteln unterscheiden, was für die Qualitätskontrolle und die Identifizierung der Echtheit von Ficus microcarpa-Arzneimitteln effektiv genutzt werden kann.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass der DNA-Barcode und der HPLC-Fingerabdruck von Ficus microcarpa und seinen verwandten Arten erstellt wurden. Die Methode ist einfach, zuverlässig, stabil und weist eine gute Wiederholbarkeit auf. Sie kann für die Fingerabdruckforschung und die Echtheitsidentifizierung von Ficus microcarpa und seinen verwandten Arten verwendet werden. Gleichzeitig bietet sie eine wissenschaftliche Grundlage für die weitere Verbesserung der Qualität von Ficus microcarpa.
Im PPI-Netz wurden 42 wichtige Targets auf der Grundlage des Grad-Rankings ausgewählt, die hauptsächlich in 5 Kategorien unterteilt wurden: Protein-Tyrosin-Phosphatasen (PTPN1, PTPN2, PTPN6, PTPN11, etc.), Phosphatidylinositol-3-Kinasen (PIK3R1, PIK3CB, PIK3CA usw.), mitogenaktivierte Proteinkinasen (MAPK1, MAPK3, MAPK8, MAPK14 usw.), zyklinabhängige Kinasen (CDK1, CDK2, CDK4 usw.) und andere wichtige Ziele (VEGFA, HSP90AA1, LCK usw.). Diese wichtigen Zielmoleküle können als Referenz für eine gezielte Therapie der UC dienen.