Vergleichende Studie über die charakteristischen UPLC-Spektren und den Gehalt an Multi-Index-Komponenten in verschiedenen Spezifikationen von Qingpi-Medizinprodukten
Qingpi wurde erstmals in dem Buch "Pearl Sac" erwähnt. Li Shizhen sagte: "Die Qingju-Schale war im Altertum nutzlos, aber erst in der Song-Dynastie begannen medizinische Experten, sie zu verwenden." Erst in der Song-Dynastie wurden unreife und reife Orangenschalen verglichen und es wurde festgestellt, dass sie leicht unterschiedliche medizinische Wirkungen haben, daher die Unterscheidung zwischen Qingju- und Huangju-Schalen. Qingpi bezieht sich auf die getrocknete oder unreife Fruchtschale von Citrus reticulata Blanco und seinen Kultursorten aus der Familie der Rutaceae. Es gibt zwei verschiedene Spezifikationen für Qingpi, die in der Medizin verwendet werden: das Sammeln junger Früchte, die zwischen Mai und Juni vom Boden fallen, das Trocknen in der Sonne, allgemein bekannt als "Geqingpi"; das Ernten unreifer Früchte von Juli bis August, das Längsschneiden in vier Blütenblätter von der Schale bis zur Basis, das Entfernen aller Blütenblätter und das Trocknen in der Sonne, allgemein bekannt als "Four Flower Green Skin". Die grüne Haut ist von Natur aus warm und hat einen bitteren und scharfen Geschmack. Sie kehrt zu den Leber-, Gallenblasen- und Magenmeridianen zurück. Es hat die Wirkung, die Leber zu beruhigen und das Qi abzubauen, Stauungen zu reduzieren und Stagnationen aufzulösen. Es wird bei Brust- und Rippenschmerzen, Leistenbruchschmerzen, Brustfetisch, Brustabszess, Nahrungsansammlungen und Qi-Stagnation sowie bei Blähungen und Schmerzen im Bauchraum eingesetzt. Die Hauptbestandteile von Qingpi sind ätherische Öle, Flavonoide, Aminosäuren usw. Moderne pharmakologische Studien haben gezeigt, dass Qingpi den Magen-Darm-Trakt reguliert, den Gallenfluss fördert, gegen Herzrhythmusstörungen wirkt, schleimlösend ist und Mastitis behandelt. Die beiden Spezifikationen der grünen Haut haben leicht unterschiedliche funktionelle Indikationen. Eine Art von grüner Haut konzentriert sich hauptsächlich auf die Auflösung von Qi-Stagnation, während die andere Art sich auf die Regulierung der Leber und des Qi konzentriert.
Darüber hinaus weisen die beiden auch leichte Unterschiede in ihrer Zusammensetzung auf. Die Ausgabe 2020 des Chinesischen Arzneibuchs enthält unterschiedliche Vorschriften zu den Merkmalen und zur Identifizierung der verschiedenen Spezifikationen von grünen Schalen, und bei der Bestimmung des Gehalts gibt es nur Grenzwerte für Hesperidin. Die Forschungsergebnisse von Li et al. zeigten, dass der Gehalt an Hesperidin und Sinomenin in Geqingpi höher war als in Sihuaqingpi, während der Gehalt an N-Methylamin und flüchtigem Öl niedriger war. Die Tendenz der hohen und niedrigen Gehalte der vier Komponenten in zwei Spezifikationen aus verschiedenen Regionen war im Grunde die gleiche. Zhao et al. analysierten mit GC-MS die ätherischen Öle von Eucommia ulmoides und Eucommia ulmoides und stellten fest, dass neun Verbindungen, darunter Geraniol, Nerolidol und α-Isoterpinen, nur in Eucommia ulmoides vorkommen. Die Hauptbestandteile, Limonen und Linalool, waren mehr als doppelt so hoch wie in Eucommia ulmoides, während der Gehalt an anderen Bestandteilen stark variierte. Yi et al. wiesen ebenfalls auf gewisse Unterschiede in der Zusammensetzung von Geqingpi und Sihuaqingpi hin, indem sie deren Bestandteile mittels Gaschromatographie und Flüssigkeitschromatographie untersuchten. Die oben genannten Studien deuten alle darauf hin, dass es Unterschiede in der chemischen Zusammensetzung von Geqingpi und Sihuaqingpi gibt.
In dieser Studie wurden die charakteristischen Spektren von Qingpi und Sihua Qingpi mittels Ultra-Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (UPLC) in Kombination mit chemometrischen Methoden ermittelt, um die Unterschiede zwischen den beiden Spezifikationen von Qingpi zu vergleichen und den Gehalt an fünf wirksamen Inhaltsstoffen in den beiden Spezifikationen von Qingpi-Arzneimitteln zu ermitteln, um so Anhaltspunkte für die Verbesserung der Mengenstandards von Qingpi in den beiden Spezifikationen zu erhalten.

 

Herstellung der Testlösung. In dieser Studie wurde eine Einzelfaktorenanalyse durchgeführt, um die Auswirkungen der Extraktionslösungsmittel (Methanol, 70%-Methanol, 50%-Methanol, Ethanol, 70%-Ethanol, 50%-Ethanol), der Extraktionsmethoden (Ultraschallextraktion, Erhitzen unter Rückfluss) und der Extraktionszeiten (15, 30, 45 Minuten) auf die charakteristischen Spektren und die Bestimmung des Gehalts der einzelnen Bestandteile, wobei die chromatographische Peakfläche/Probengröße" und der Gehalt an Sinomenin, Hesperidin, Naringin und Hesperidin als Bewertungsindikatoren herangezogen wurden. Die Ergebnisse zeigten, dass die Erhitzung unter Rückfluss mit 70% Methanol für 30 Minuten die beste Wirkung hatte.
Erstellung und Analyse von Merkmalskarten. Die Ergebnisse der Merkmalskartenstudie zeigten, dass es 7 gemeinsame Peaks in den UPLC-Merkmalskarten von Geqingpi und Sihuaqingpi gab. Fünf charakteristische Komponenten von Geqingpi und Sihuaqingpi wurden durch Referenzstandards identifiziert, nämlich Sinomenin, Naringin, Hesperidin, Naringin und Hesperidin. Wir untersuchten verschiedene wässrige Phasen (0,1% Phosphorsäure und 0,1% Ameisensäure), zwei verschiedene Typen von Chromatographiesäulen Waters ACQUITY HSS T3 (100mm × 2,1mm, 1,8 μ m), YMC Triart C18 (100mm × 2,1mm, 1.9 μ m) und verglichen die Auswirkungen verschiedener Detektionswellenlängen (275nm und 284nm), Säulentemperaturen (38, 40, 42 ℃) und Flussraten (0,28, 0,30, 0,32mL/min) auf die chromatographischen Peaks der charakteristischen Spektren von Qingpi. Die Ergebnisse zeigten, dass unter Verwendung der Waters ACQUITY HSS T3 (100mm × 2,1 mm, 1,8 μ m) Chromatographiesäule mit 0,1% Ameisensäure als wässrige Phase, unter den chromatographischen Bedingungen von 275nm Detektionswellenlänge, Säulentemperatur von 40 ℃, und Flussrate von 0,30mL/min, die chromatographischen Peaks erhalten wurden. Der Trennungsgrad ist gut, die Basislinie ist stabil, die Anzahl der chromatographischen Peaks ist hoch, und das Signal ist entsprechend hoch.
Der Unterschied in der chemischen Zusammensetzung zwischen Geqingpi und Sihuaqingpi. Die in dieser Studie ermittelten charakteristischen UPLC-Spektren der verschiedenen Spezifikationen von Qingpi-Medizinprodukten ergaben 7 gemeinsame Peaks in Geqingpi und Sihuaqingpi, von denen 5 charakteristische Peaks identifiziert wurden. Peak 1 wurde als Sinomenin bestimmt; Peak 3 ist das Glykosid der Yunxiang-Pomelo-Schale; Peak 4 ist Hesperidin; Peak 6 ist Chenpi-Extrakt; Peak 7 ist Orangenschalenextrakt. In dieser Studie wurden HCA, PCA und OPLS-DA verwendet, um verschiedene Spezifikationen von medizinischen Materialien aus grünen Schalen in zwei Kategorien zu klassifizieren. Die weitere Analyse zeigt, dass die chemischen Komponenten, die durch die Peaks 1, 4 und 2 repräsentiert werden, die differenziellen Komponenten zwischen diesen beiden Spezifikationen der Qingpi-Heilkräuter sind. Daher können diese drei Komponenten als Ansatzpunkte für weitere Analysen verwendet werden, um zwischen diesen beiden Spezifikationen von Qingpi-Heilkräutern zu unterscheiden.
Flavonoide sind die wichtigsten Wirkstoffe in Qingpi. Die Ergebnisse der Gehaltsbestimmung von fünf bekannten Flavonoiden in Geqingpi und Sihuaqingpi zeigten, dass der Gehalt an Sinomenin und Hesperidin in Geqingpi höher war als der in Sihuaqingpi, während der Gehalt an Naringin und Hesperidin in Geqingpi niedriger war als der in Sihuaqingpi. Insgesamt war der Gehalt an Naringin in den beiden Spezifikationen von Qingpi Yunxiangyupi relativ ähnlich. Die Analyse des t-Tests für unabhängige Stichproben ergab, dass die Unterschiede bei Sinomenin, Hesperidin und Naringin statistisch signifikant waren. Dieses Ergebnis stimmt mit den Forschungsergebnissen von Li et al. überein. Neben den in diesem Experiment untersuchten Flavonoiden ist auch das ätherische Öl einer der wirksamen Bestandteile der Qingpi-Heilkräuter. Zhaos Untersuchungen der ätherischen Öle von Geqingpi und Sihuaqingpi zeigten, dass neun Verbindungen, darunter Geraniol, Nerolidol und α-Isoterpinen, nur in Geqingpi vorkommen. Die Hauptbestandteile, Limonen und Linalool, sind mehr als doppelt so hoch wie in Sihuaqingpi. In der klinischen Anwendung sind die funktionellen Indikationen von Four Flower Green Skin milder als die von Geqing Skin, was auf den geringeren Gehalt an Wirkstoffen wie Hesperidin und Sinomenin sowie an ätherischem Öl in Four Flower Green Skin im Vergleich zu Geqing Skin zurückzuführen sein könnte. Laut einschlägiger Literatur handelt es sich bei Geqingpi um eine junge Frucht, die von Mai bis Juni geerntet wird; Vierblütige Grüne Schale wird von unreifen Früchten im Juli bis August geerntet, und der Unterschied zwischen den beiden liegt in der Erntezeit und im Reifestadium. Aus den obigen Ergebnissen geht hervor, dass unterschiedliche Wachstums- und Entwicklungsstadien die Akkumulation der Wirkstoffe in Qingpi beeinflussen können. Während der Reproduktions- und Entwicklungsphase zeigen die Wirkstoffe in Qingpi jedoch nicht einfach einen zunehmenden oder abnehmenden Trend, sondern eher eine gewisse Zunahme und eine gewisse Abnahme: Chenpi-Extrakt und Hesperidin zeigen eine steigende Tendenz; Simulin, Hesperidin und Naringin zeigen eine abnehmende Tendenz. Ob die Unterschiede in diesen Gehalten direkt oder indirekt zu unterschiedlichen Wirksamkeitsschwerpunkten der verschiedenen Spezifikationen von Qingpi führen, müssen weitere pharmakologische Experimente zeigen. Auf der Grundlage des unterschiedlichen Gehalts der fünf Wirkstoffe in zwei verschiedenen Spezifikationen von Qingpi in Verbindung mit dem unterschiedlichen Schwerpunkt der beiden Wirkungen können wir die Syndromdifferenzierung und Behandlung nach traditioneller chinesischer Medizin besser umsetzen und die Effizienz der Behandlung verbessern, wenn das Rezept für die Verwendung in klinischen Anwendungen separat gekennzeichnet ist. Wenn die gegenwärtigen Arzneibuchstandards getrennte Qualitätsstandards für Geqingpi und Sihuaqingpi festlegen können, kann dies der Qualitätskontrolle von Qingpi-Arzneimitteln förderlich sein.