Studie zur Qualitätsbewertung von Bombyx mori durch chemische Mustererkennung in Kombination mit HPLC-Fingerprint
Bombyx mori ist eines der in der klinischen Praxis am häufigsten verwendeten Tierarzneimittel, das hauptsächlich zur Behandlung von Krankheiten wie Leberblähungen, Krampfanfällen, Kinderschreck, Tetanus usw. eingesetzt wird. Seine Quelle ist der getrocknete Körper der Larven des 4. bis 5. Larvenstadiums der Seidenraupe Bombyx mori Linnaeus, die mit Beauveria bassiana (Bals.) Vuillart infiziert wurden und starben. Chemische Untersuchungen haben gezeigt, dass die wichtigsten Wirkstoffe Proteine, Aminosäuren, Flavonoide und andere Bestandteile sind. Moderne pharmakologische Studien haben gezeigt, dass der proteinreiche Extrakt von Bombyx mori antiepileptische, immunmodulatorische und hemmende Wirkungen hat. Das Tumorwachstum von Mäusen, die einen G7-Tumor tragen, hat verstärkte schützende Wirkungen, fördert die Erholung der durch MPTP induzierten motorischen Beeinträchtigung bei Mäusen mit Parkinson-Krankheit, verhindert den Dopaminabbau usw.
Da sich die Seidenraupe nur von Maulbeerblättern ernährt, sind die Aufnahme, die Umwandlung und der Stoffwechsel der wichtigsten Flavonoide der Maulbeerblätter in ihrem Körper reichhaltig und vielfältig. Untersuchungen haben gezeigt, dass nach einer Infektion mit Fusarium oxysporum die Flavonoide in den Seidenraupen einer Biotransformation unterliegen. Zum Beispiel werden Flavonoide wie Quercetin und Kaempferol durch eine 4-O-Methylglucosylierungsreaktion in Quercetin-7-O-β-D-4-O-Methylglucosid und Kaempferol-7-O-β-D-4-O-Methylglucosid umgewandelt. Xing et al. stellten fest, dass sich mit zunehmendem Todeszeitpunkt auch der Gehalt und die Umwandlung von Flavonoiden im Körper unterscheiden, und spekulierten, dass Quercetin-7-O-β-D-4-O-Methylglucosid und Kaempferol-7-O-β-D-4-O-Methylglucosid als einer ihrer Qualitätskontrollindikatoren verwendet werden können. Daher können Flavonoide als wichtige Indikatoren für die Bewertung der Qualität von Seidenraupen dienen.

Die Kombination von Fingerabdruckspektren und chemischer Mustererkennung ist eine wirksame Methode zur Bewertung der Qualität traditioneller chinesischer Medizin, die bei der Qualitätsbewertung von traditioneller chinesischer Medizin, Abkochungen chinesischer Medizin, Granulatformeln usw. weit verbreitet ist. Gegenwärtig gibt es verschiedene Studien über Fingerabdruck-Spektren im Zusammenhang mit Seidenraupen, einschließlich Ultraviolett-Fingerabdruck, Infrarot-Fingerabdruck, HPLC, HPCE und Protein-Fingerabdruck-Spektren. Die Zusammensetzungskategorien umfassen wasserlösliche Komponenten, lipidlösliche Komponenten, alkohollösliche Komponenten usw. Allerdings gibt es Probleme mit der schlechten Trennleistung und den begrenzten Identifizierungspeaks, die eine Charakterisierung der Qualitätsmerkmale erschweren. Forscher haben gezeigt, dass in Sichuan produzierte Seidenraupen eine bessere Qualität und höhere Gehalte an Beauveria bassiana aufweisen als in anderen Regionen wie Guangxi, Yunnan und Zhejiang. Obwohl es einige Forschungsberichte über die chemische Zusammensetzung und Qualitätskontrolle von Bombyx mori gibt, gibt es derzeit keine gute Methode zur Qualitätskontrolle, da die Zusammensetzung komplex und der Gehalt gering ist. Daher wurden in dieser Studie mit Hilfe der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie Fingerabdruckspektren von 20 Chargen von Seidenraupenarzneimitteln unterschiedlicher Herkunft erstellt und Differenzierungsuntersuchungen durchgeführt, indem chemische Identifizierungsmethoden wie Ähnlichkeitsanalyse, Clusteranalyse und Hauptkomponentenanalyse kombiniert wurden. Unter Bezugnahme auf die Anforderungen des Seidenraupenartikels in der Ausgabe 2020 der chinesischen Pharmakopöe wurden der Feuchtigkeitsgehalt, der Gesamtaschegehalt, der Gehalt an säureunlöslicher Asche und der Extrakt bestimmt. Der Gehalt des wirksamen Bestandteils Beauveria bassiana wurde mit der früheren Methode der Forschungsgruppe bestimmt, um die Qualität von Arzneimitteln unterschiedlicher Herkunft umfassend zu bewerten, eine wissenschaftliche Grundlage für die Qualitätskontrolle und Standardverbesserung von Seidenraupen-Arzneimitteln zu schaffen und als Referenz für die Erforschung anderer Arzneimittel zu dienen.

In diesem Experiment wurden die Vorbehandlungsbedingungen wie Extraktionsmethode, Extraktionslösungsmittel und Extraktionszeit untersucht und festgestellt, dass die Extraktionsmethode (Rückflussextraktion, Ultraschallextraktion) für die Ultraschallextraktion, das Extraktionslösungsmittel (Methanol, 80%-Methanol, Acetonitril und Wasser) für 80%-Methanol und die Extraktionszeit (15, 30, 45 Minuten) für 30 Minuten optimal war. Der ermittelte Fingerabdruck der Seidenraupe hat eine Ähnlichkeit zwischen 0,92 und 0,99, was relativ hoch ist und eine Grundlage für die Qualitätsbewertung der Seidenraupe darstellt.
Das von unserem Forschungsinstitut erstellte Fingerabdruckspektrum konzentriert sich hauptsächlich auf die Flavonoide in den medizinischen Materialien von Bombyx mori. Wang et al. untersuchten die Ergebnisse mit Hilfe von Netzwerk-Pharmakologie und molekularem Docking, was zeigte, dass Quercetin, Kaempferol und andere Komponenten die wichtigsten materiellen Basiskomponenten für die Fähigkeit von Bombyx mori, Blähungen und Krämpfe zu lindern, sein könnten. Mehrere Studien haben auch gezeigt, dass Quercetin und Kaempferol einer der wichtigsten Wirkstoffe bei der Behandlung von Epilepsie sind. Als eine der wichtigsten Pflanzen zur Linderung von Blähungen und Krämpfen könnten die Flavonoide eine der Grundlagen für die Wirkung von Bombyx mori sein. Darüber hinaus wurde in dieser Studie eine Korrelationsanalyse zwischen den Peakflächen der einzelnen gemeinsamen Peaks und den Merkmalen, Extrakten, dem Gesamtaschegehalt und dem Gehalt an weißem Muskardin der medizinischen Materialien durchgeführt. Die Ergebnisse zeigten, dass die Querschnittsmerkmale positiv mit den Oberflächenmerkmalen, der Länge der Arzneistoffe und dem Gehalt an weißem Muskardin sowie positiv mit den Peakflächen der Peaks 1, 2, 3, 4, 6 und 7 korreliert waren. Nach dem Vergleich wurden die Peaks 1, 2, 4, 6 und 7 als Rutin, Hyperosid, Astragalosid, Quercetin und Kaempferol identifiziert, die die wichtigsten Flavonoide in Maulbeerblättern sind. Dies deutet darauf hin, dass die Umwandlung von Flavonoiden während der Bildung von Seidenraupen mit dem "Glaskörper" des Querschnitts zusammenhängt. Es besteht eine starke Korrelation zwischen der Qualität der Heilkräuter und der Bildung, was auch das seit der Antike geltende Qualitätsmerkmal "weiße Farbe, gerade Streifen und schwarze und helle Querschnitte werden für Seidenraupen bevorzugt" bestätigt.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass das in diesem Artikel ermittelte Fingerabdruck-Spektrum nicht nur die möglichen materiellen Grundkomponenten der pharmakologischen Wirkung von "Xifeng Zhijing" der Seidenraupe umfasst, sondern auch eine gewisse Korrelation mit den Qualitätsindikatoren des Seidenraupen-Arzneimittels selbst aufweist, die die Qualität des Seidenraupen-Arzneimittels umfassend widerspiegeln und eine wissenschaftliche Grundlage für die Qualitätskontrolle des Seidenraupen-Arzneimittels liefern kann. Bei den Qualitätskontrollstandards für Cordyceps sinensis-Arzneimittel sollte berücksichtigt werden, dass es sich um einen Komplex von "Bakterien-Insektenblättern" handelt, und es sollten mehrere Indikatoren verwendet werden, um die Qualität umfassend zu bewerten und einen wissenschaftlicheren und angemesseneren Qualitätsstandard für Arzneimittel zu schaffen.