Studie über die Abtrennung und Herstellung von Anthocyanen aus grüner Maulbeere durch Hochgeschwindigkeits-Gegenstromchromatographie und ihre antioxidative Aktivität
Die Maulbeere, die Frucht des Maulbeerbaums aus der Familie der Maulbeergewächse, ist reich an Nährstoffen und hat verschiedene Wirkungen, wie z. B. krebshemmende, antioxidative, schmerzlindernde und entzündungshemmende Wirkung und Schönheit der schwarzen Haare. Grüne Maulbeeren, die auch als gelbe Maulbeeren bezeichnet werden, sind unreife Maulbeeren. Als traditionelle chinesische Medizin sind grüne Maulbeeren im Vergleich zu reifen Maulbeeren leichter zu pflücken, zu transportieren und zu lagern, und ihr Gehalt an Anthocyanen, Catechinen und Epicatechinen ist viel höher als der von reifen Maulbeeren. Sowohl im Inland als auch auf internationaler Ebene wurden Studien zur Extraktion und Isolierung von Anthocyanen aus verschiedenen Pflanzen wie Traubenkernen, Rosen, Maisseide, Cranberries, Kakaobohnen usw. durchgeführt. Liu et al. verwendeten LSA-10-Harz zur Anreicherung und Reinigung von Anthocyanen aus Weißdorn; Chen Wenliang et al. verwendeten Membrantrennung und Filtration zur Abtrennung oligomerer Anthocyane aus Traubenkernen, was zu einem Gehalt von 65% oligomeren Anthocyanen führte, aber keine monomeren Trennkomponenten ergab; Glavnik et al. analysierten die Anthocyane in japanischem Zuckerrohr mittels Hochleistungs-Dünnschichtchromatographie und identifizierten Monomere, Decamere und Anthocyane vom Typ B aus dem Rohextrakt. Sun et al. verwendeten semipräparative Hochleistungsflüssigkeitschromatographie zur Abtrennung von Anthocyanen aus Traubenkernen, aber die Vorbehandlung war komplex und die Trennungsausbeute gering. In diesem Artikel wird die Hochgeschwindigkeits-Gegenstromchromatographie (HSCCC) gewählt, die eine große Trennungskapazität hat, für die Batch-Vorbereitung und -Trennung verwendet werden kann, einfach zu bedienen ist und eine hohe Trennungseffizienz aufweist.
Procyanidine (PC), eine Art von polyphenolischen Verbindungen, sind in Pflanzen weit verbreitet. Sie bestehen hauptsächlich aus Catechinen, Epicatechinen (EC), Epigallocatechinen (EGC) und Epicatechingallaten (ECG) und haben eine starke antioxidative Wirkung. Ziel dieser Arbeit ist es, die Hochgeschwindigkeits-Gegenstromchromatographie zur Trennung und Reinigung von Anthocyanen aus grünen Maulbeeren einzusetzen. Mit Hilfe der Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (HPLC) werden die chemischen Bestandteile der einzelnen Komponenten identifiziert und ihre Reinheit analysiert. Durch die Untersuchung der Fähigkeit, DPPH-Radikale, ABTS+-Radikale und Hydroxylradikale in den einzelnen Komponenten zu fangen, kann die Stärke ihrer antioxidativen Kapazität ermittelt werden. Diese Arbeit erweitert den Umfang der tiefen Verarbeitung und Nutzung von Maulbeeren, gibt eine Richtung für die industrielle Produktion von Anthocyanen in grünen Maulbeeren und hat einen gewissen Referenzwert für die Entwicklung und Nutzung von Maulbeeren als medizinische Ressourcen.

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Unter Verwendung von grüner Maulbeere als Rohstoff wurde der Rohextrakt durch Extraktion, Entfettung, Entfernung von Verunreinigungen und Extraktionsanreicherung unter den experimentellen Bedingungen gewonnen. Das optimale Lösungsmittelsystem für die HSCCC-Trennung und -Reinigung war n-Hexan, Ethylacetat und Wasser (1:20:20, V/V/V). 200 mg Anthocyan-Rohextrakt aus grüner Maulbeere wurden durch HSCCC in fünf Komponenten getrennt, nämlich F1 (28,5 mg), F2 (10,43 mg), F3 (6,85 mg), F4 (10,65 mg) und F5 (13,65 mg). Jede Komponente enthielt Catechine, Anthocyan B2, Anthocyan A1 usw. Unter ihnen enthielt F4 Epigallocatechingallat mit einer Reinheit von 95,05%; F5 enthält Catechine mit einer Reinheit von 73,75%. Die getrennten Bestandteile haben alle eine gewisse antioxidative Wirkung. Unter Verwendung von Vc als Kontrolle stellt sich die Fähigkeit, freie DPPH-Radikale zu fangen, wie folgt dar: Vc>F5>F4>F2>F3>F1>Rohextrakt aus grüner Maulbeere; ABTS+Fangvermögen für freie Radikale: Vc>F5>F4>F2>F3>F1>Rohextrakt aus grüner Maulbeere; Fängigkeit von Hydroxylradikalen: F1>F5>Vc>F4>F2>Rohextrakt aus grüner Maulbeere>F3. HSCCC hat eine große Aufbereitungskapazität und kein Füllmaterial in der Chromatographiesäule. In diesem Experiment kann der Rohextrakt einmal getrennt werden, um fünf Komponenten zu erhalten, und einige Komponenten haben hochreine monomere Substanzen und eine starke antioxidative Aktivität. Der Forschungsinhalt dieses Artikels hat neue Ideen für die Herstellung von Anthocyanen eröffnet und theoretische Unterstützung für die Untersuchung der medizinischen Wirksamkeit von Anthocyanen in grünen Maulbeeren geliefert.