Qualitätsanalyse von Rosen auf der Grundlage des UPLC-Fingerprints und der Bestimmung von zwei chemischen Komponenten
Die Rosenblüte ist die getrocknete Blüte der Rosa chinensis Jacq. aus der Familie der Rosaceae. Sie ist auch unter den Namen Rosenrot, Siegesschnee, Schlanker Gast, Kampfschneerot, Vierjahreszeitenblume, Kostbare Mondblume und Helle Schneeflocke bekannt und wird als Königin der Blumen bezeichnet. Rosenblüten wurden erstmals im Kompendium der Materia Medica erwähnt. Sie haben einen süßen Geschmack, eine warme Natur und gehören zum Lebermeridian. Sie wirken durchblutungsfördernd, menstruationsregulierend, leberberberuhigend und depressionslindernd. Sie können zur Behandlung von Menstruationsstörungen, Dysmenorrhoe und Amenorrhoe, Blutstau, Schwellungen und Schmerzen, Verbrennungen, Sturzverletzungen, Abszessen und Skrofulose verwendet werden. Sie wird landesweit angebaut, hauptsächlich in Yunnan, Hubei, Sichuan und Gansu, und kann das ganze Jahr über geerntet werden. Die chemische Zusammensetzung der Rosen ist reichhaltig und vielfältig und umfasst Flavonoide, Gerbstoffe, Phenolsäuren, ätherische Öle, Pigmente und Glykosidverbindungen.
In den letzten Jahren hat die Forschung über Rosen gewisse Fortschritte gemacht. Wu et al. untersuchten mit Hilfe der UPLC-Q-Tof-MS-Technologie die Unterschiede bei den nichtflüchtigen chemischen Komponenten zwischen Rosen und Rosen. Die Ergebnisse zeigten, dass 43 Verbindungen in Rosen und 25 Verbindungen in Rosen nachgewiesen wurden. Die wichtigsten Komponenten, die in Rosen nachgewiesen wurden, waren jedoch Phenolglykoside, Gerbstoffe und Phospholipide, und die einzige nachgewiesene Flavonoidkomponente war Kaempferolglucosid. Nach den Forschungsberichten in der Literatur sind Flavonoide die wichtigsten aktiven Bestandteile von Rosenblüten. Shangguan et al. untersuchten Rosenblüten zu verschiedenen Erntezeiten, maßen den Gesamtgehalt an Flavonoiden in Rosenblüten zu verschiedenen Erntezeiten und bewerteten ihre antioxidative Aktivität auf der Grundlage ihrer Fähigkeit, DPPH- und Hydroxylradikale zu fangen. Sie untersuchten die Korrelation zwischen dem Gesamtflavonoidgehalt und der antioxidativen Aktivität, untersuchten aber nicht die Gesamtflavonoide von Rosenblüten unterschiedlicher Herkunft. Gegenwärtig gibt es viele Studien über Rosen, aber nur wenige Berichte über die Qualitätsstandards von Rosen. Die moderne pharmakologische Forschung hat herausgefunden, dass Hyperosid und Isoquercitrin antioxidativen Stress und Zell-Apoptose, Anti-Akut-Leber-Verletzungen, entzündungshemmende, antidepressive, gefäßschützende und andere Wirkungen haben, die mit der leberberberuhigenden und depressionslindernden Wirkung von Rosen übereinstimmen. Dies deutet darauf hin, dass Hyperosid und Isoquercitrin zu den wichtigsten Wirkstoffen in Rosen gehören. Bei der Bestimmung des Gehalts von Rosenblüten in der Ausgabe 2020 des chinesischen Arzneibuchs wird nur die isokratische Elutionsmethode verwendet, um die Gesamtmenge von Hyperosid und Isoquercitrin zu begrenzen. Unter dieser chromatographischen Bedingung wird nur die Information von Hyperosid und Isoquercitrin wiedergegeben, aber sie kann die Qualität der Rosenblüten nicht vollständig widerspiegeln. Die Informationen über andere charakteristische Komponenten wie Flavonoide und Phenolsäuren können nicht umfassend wiedergegeben werden. Das Fingerabdruck-Spektrum kann die in der traditionellen chinesischen Medizin enthaltenen chemischen Komponenten umfassend wiedergeben und ist zu einem wichtigen Mittel der umfassenden Qualitätskontrolle der traditionellen chinesischen Medizin geworden. Auf dieser Grundlage wurde in diesem Experiment eine UPLC-Fingerprint-Methode für Rosenblüten entwickelt und gleichzeitig die Gesamtmenge ihrer Flavonoidkomponenten, Hyperosid und Isoquercitrin, unter den Bedingungen des Fingerprints gemessen, um eine qualitative und quantitative Kontrolle von Rosenblüten ausschließlich durch Fingerprint-Methoden zu erreichen. Die Clusteranalyse und die Hauptkomponentenanalyse wurden kombiniert, um Rosenblüten unterschiedlicher Herkunft zu bewerten, wodurch die Grundlage für die Forschung zur Qualitätskontrolle von Rosenblüten gelegt wurde. Darüber hinaus ist diese Methode auch auf die Qualitätsstandards von Rosen derselben Familie und Gattung anwendbar und kann für die Identifikationsforschung von Rosen und Rosen verwendet werden.

 

Bestimmung der Vorbereitungsmethode und der chromatographischen Bedingungen für die Testprobe. In diesem Experiment wurden das Extraktionslösungsmittel, die Extraktionsmethode, die Extraktionszeit und das Fest-Flüssig-Verhältnis untersucht. Die chromatographische Methode wurde verwendet, um den Informationsgehalt zu maximieren, die beste Extraktionseffizienz zu erreichen und die Stabilität der Methode zu gewährleisten. Schließlich wurde 50% Methanol als Extraktionslösungsmittel verwendet, gefolgt von einer 30-minütigen Ultraschallbehandlung und einem Fest-Flüssig-Verhältnis von 1,0 g: 50 ml als Probenvorbereitungsmethode. Im Hinblick auf die chromatographischen Bedingungen wurden verschiedene chromatographische Säulen, mobile Phasensysteme, Säulentemperaturen, Flussraten und Nachweiswellenlängen untersucht. Nach dem Vergleich wurde festgestellt, dass bei der Auswahl von Agilent SB C18 als Chromatographiesäule, Acetonitril 0,2% Phosphorsäure als mobile Phase, einer Säulentemperatur von 35 ℃ und einer Flussrate von 0,4mL/min die Peakform und der Trennungsgrad der chromatographischen Peaks gut waren. Die Testlösung wurde bei voller Wellenlänge unter sichtbarem UV-Licht bei 190-400nm gescannt, und die Ergebnisse zeigten, dass die gemeinsamen Peaks des Fingerabdruckspektrums bei 254nm hohe Ansprechwerte und gute Peakformen hatten. Außerdem wurde das Absorptionsmaximum von Hyperosid und Isoquercitrin bei 254 nm beobachtet, so dass 254 nm als Nachweiswellenlänge gewählt wurde.
Analyse des Fingerabdruckspektrums und der Ergebnisse der Inhaltsstoffbestimmung. In dieser Studie wurde die "Chinese Herbal Medicine Chromatographic Fingerprint Similarity Evaluation Software" (Version 2012) verwendet, um eine Ähnlichkeitsanalyse der Fingerabdruckspektren von 15 Chargen von Rosenblüten durchzuführen. Insgesamt wurden 30 gemeinsame Peaks entdeckt, und die Ähnlichkeit der Fingerabdruckspektren der 15 Probenchargen war größer als 0,95, was auf die Konsistenz der chemischen Zusammensetzung von Rosenblüten aus verschiedenen Chargen hinweist. Insgesamt wurden 10 charakteristische Peaks durch den Vergleich mit Referenzstandards identifiziert, von denen 8 Flavonoide waren. Mit Hilfe der Clusteranalyse und der Hauptkomponentenanalyse zur Analyse der Fingerabdruckspektren von Rosen unterschiedlicher Herkunft können Rosen aus verschiedenen Chargen bei einem Clusterabstand von 10 in 5 Kategorien eingeteilt werden, was darauf hindeutet, dass Rosen unterschiedlicher Herkunft gewisse Unterschiede aufweisen. Die PCA-Analyse zeigt, dass es gewisse Qualitätsunterschiede bei Rosen aus verschiedenen Regionen gibt. Die Messung des Hyperosid- und Isoquercitrin-Gehalts in 15 Partien Rosenblüten ergab einen Gesamtgehalt an Hyperosid und Isoquercitrin von 3,88-8,67 mg/g, der über dem Arzneibuchwert von 0,38% lag. Dies zeigt, dass alle 15 Chargen von Rosenblüten qualifizierte medizinische Materialien sind, mit dem höchsten Gesamtgehalt an Hyperosid und Isoquercitrin in Zhoukou City, Henan Province.
Die etablierte Fingerprint-Methode kann für die Qualitätsbewertung von Rosen verwendet werden. Die Fingerabdruck-Spektren von 15 Chargen von Rosenarzneimitteln wurden mit der "Chinese Medicine Chromatographic Fingerprint Similarity Evaluation Software" (Version 2012) analysiert, und es wurden insgesamt 22 gemeinsame Peaks identifiziert. Die Ähnlichkeit der Fingerabdruckspektren von 15 Chargen von Rosenarzneimitteln war größer als 0,95. Rose und Rose gehören beide zur Familie der Rosengewächse (Rosaceae) und lassen sich anhand ihrer morphologischen, mikroskopischen und physikochemischen Merkmale unterscheiden. Es gibt jedoch keine Berichte über die Identifizierung von Fingerabdrücken. Der in dieser Studie erstellte UPLC-Fingerabdruck kann für die Identifizierung von Rose und Rose verwendet werden. Aus dem Vergleich der Fingerabdruckspektren geht hervor, dass die beiden 15 gemeinsame Komponenten haben, wobei die Rose 10 exklusive Komponenten und die Rose 5 exklusive Komponenten aufweist.
Auf der Grundlage der Erstellung des UPLC-Fingerprints von Rosenblüten wurden in dieser Studie mehrere Flavonoidkomponenten identifiziert und mit Hilfe der chemischen Mustererkennungsmethode bewertet; es wurde eine Methode zur Bestimmung des Hyperosid- und Isoquercitrin-Gehalts in Rosen entwickelt, die eine Grundlage für die Qualitätskontrolle von Rosen bietet. Diese Methode ist einfach und genau und kann als Referenz für die weitere Forschung an Rosen dienen.