Identifizierung von Phenylethanolglykosiden aus der Stinkenden Pfingstrose und Untersuchung des Mechanismus der In-vitro-Wirkung gegen menschliche Lungen-Adenokarzinomzellen A549
Lungenkrebs ist ein bösartiger Tumor, der in der Bronchialschleimhaut und den Drüsen auftritt. Nach Angaben des Nationalen Krebszentrums wird die Inzidenzrate von Lungenkrebs in China im Jahr 2022 bei 10,6% und die Sterblichkeitsrate bei 24% liegen, was den ersten Platz bei der Sterblichkeitsrate bösartiger Tumore in China bedeutet, und der Anteil weiblicher Patienten wird von Jahr zu Jahr steigen und tendenziell jünger sein. Die traditionelle chinesische Medizin kann aufgrund ihrer Mehrkomponenten- und Multitarget-Vorteile die Tumorprogression verzögern, die Empfindlichkeit der Tumorzellen gegenüber Strahlen- und Chemotherapie erhöhen, postoperative Infektionen reduzieren und die durch Strahlen- und Chemotherapie verursachten Nebenwirkungen auf verschiedenen Wegen minimieren, wodurch das Ziel der Verhinderung und Behandlung von Tumorrezidiven und Metastasen sowie langfristig stabiler Tumoren erreicht wird. Die Stinkende Pfingstrose ist ein wirksames traditionelles chinesisches Arzneimittel, das in der Volksmedizin von Hunan für die Behandlung bösartiger Tumore entdeckt und in mehr als 40 Jahren wiederholter klinischer und wissenschaftlicher Forschungspraxis ausgewählt worden ist. Die Stinkende Pfingstrose hat einen milden, scharfen und bitteren Geschmack und hat die Wirkung, Wind und Feuchtigkeit zu vertreiben, Blutstauungen zu entgiften und aufzulösen, Schwellungen und Schmerzen zu lindern". In der Region Hunan wird es häufig zur Behandlung verschiedener Tumore, insbesondere von Lungenkrebs, eingesetzt. Die wirksamen Bestandteile und Mechanismen der Stinkenden Pfingstrose bei der Behandlung von Tumoren sind jedoch noch nicht klar. In den Vorversuchen der Forschungsgruppe wurde festgestellt, dass Paeonia lactiflora reich an Phenylethanolglykosiden ist und eine gute Anti-Tumor-Aktivität aufweist. In dieser Studie werden wir die Phenylethanolglykoside in Paeonia lactiflora weiter identifizieren und ihren Mechanismus zur Hemmung der A549-Zellproliferation in vitro erforschen, um die Anti-Tumor-Wirkung und den Mechanismus der Phenylethanolglykoside von Paeonia lactiflora weiter zu untersuchen und den Grundstein für die Entwicklung effizienter und wenig toxischer Präparate der traditionellen chinesischen Medizin zu legen.

Lungenkrebs ist ein bösartiger Tumor, der in den Bronchialschleimhäuten und -drüsen auftritt und in der traditionellen chinesischen Medizin zu den Kategorien "Lungenansammlung" und "Lungenfelsen" gehört. Heutige Mediziner gehen davon aus, dass die kontinuierliche Zunahme von Lungenkrebs auf Umweltverschmutzung oder langjähriges Rauchen zurückzuführen ist, was zu einer Ansammlung von toxischen Krankheitserregern in der Lunge führt. Die Qi-Bewegung der Lunge ist gestört, und die Kombination von Toxinen, Qi und Blut führt im Laufe der Zeit zu einer Ansammlung in der Lunge. Der grundlegendste pathologische Mechanismus ist die Konsolidierung von Krebsgift, Schleim und Blutstau, wobei eine Kombination aus Mangel und Überschuss die wichtigsten pathologischen Veränderungen sind. Gestützt auf die Erfahrungen von Professor Ouyang Qi, einem renommierten Arzt für traditionelle chinesische Medizin und Erben der Hu Xiang Ouyang-Schule für verschiedene Krankheiten, bei der Behandlung von Lungenkrebs und der Vorbeugung eines postoperativen Rezidivs, Bei der Behandlung von Lungenkrebs und der Vorbeugung eines postoperativen Rezidivs gehen wir davon aus, dass die Ätiologie und Pathogenese von Lungenkrebs auf das Eindringen pathogener Toxine, unzureichendes positives Qi, das zu einem Verlust der Lungenfunktion führt, sowie auf die Ansammlung von Schleim und Stagnation im Laufe der Zeit zurückzuführen sind, was zu einem Mangel an Qi und Blut, Yin und Yang, im Körper führt, was letztendlich zum Auftreten von Lungenkrebs führt. Die Hauptpathogenese von Lungenkrebs ist durch die Ansammlung von pathogenen Faktoren wie Schleim, Gerinnung und Toxinen sowie Qi-Stagnation und Blutstau gekennzeichnet. Das Behandlungsprinzip besteht darin, den Blutstau zu entgiften und zu beseitigen, den Schleim zu beseitigen und die Knötchen aufzulösen. Die Stinkende Pfingstrose ist der Stamm und das Blatt von Clerodendrum bungei Steud, einer Pflanze aus der Familie der Verbenaceae. Sie ist in China weit verbreitet und verfügt über reichhaltige medizinische Ressourcen. Sie ist von ruhiger Natur und hat einen scharfen und bitteren Geschmack. In der alten Literatur wird ihm die Funktion zugeschrieben, "Wind und Feuchtigkeit zu vertreiben, Blutstau zu entgiften und aufzulösen, Schwellungen zu reduzieren und Schmerzen zu lindern", was dem Behandlungsprinzip "Entgiftung und Beseitigung von Blutstau, Beseitigung von Schleim und Auflösung von Knötchen" bei Lungenkrebs entspricht. Die Forschung hat gezeigt, dass sowohl die Stinkende Pfingstrose als auch ihr Extrakt eine gute Anti-Tumor-Aktivität haben, insbesondere die beste Anti-Tumor-Aktivität gegen Lungenkrebs. In der Voruntersuchung führte das Forschungsteam mehrere Flüssigkeitsqualitätsanalysen des Dekokts und der verschiedenen extrahierten Komponenten der Stinkenden Pfingstrose durch und stellte fest, dass die Hauptkomponenten der Stinkenden Pfingstrose Phenylethanolglykoside sind, unter denen die Hauptkomponenten blattartige und heterogene blattartige Glykoside sind. Nach einem experimentellen Screening und einer Demonstration wurde festgestellt, dass die Phenylethanolglykoside der Stinkenden Pfingstrose eine gute Antitumorwirkung haben. Daher wird spekuliert, dass die Phenylethanolglykoside, die hauptsächlich aus blattähnlichen und heterogenen blattähnlichen Glykosiden bestehen, die Hauptkomponenten der Antitumorwirkung der Stinkenden Pfingstrose sein könnten.

EphA2 ist das Hauptmitglied der Eph-Familie, der größten Unterfamilie der Rezeptortyrosinkinasen (RKT), und wird in verschiedenen bösartigen Tumoren überexprimiert, insbesondere in Tumoren mit hoher Bösartigkeit und starker Invasions- und Metastasierungsfähigkeit, und ist an der Invasion und Metastasierung von Lungenkrebs beteiligt. Untersuchungen haben ergeben, dass EphA2-Rezeptoren bei Lungenkrebspatienten und Lungenkrebszelllinien in erheblichem Maße exprimiert werden, und je höher der Expressionsgrad, desto schlechter die Prognose der Patienten. In Lungenkrebsgewebe wurde eine Mutation des phosphorylierten EphA2 S897 im epidermalen Wachstumsfaktor (EGFR) und eine Exon-19-Deletion auf der Zellmembran festgestellt. EphA2 übt biologische Wirkungen in zwei Formen aus: ligandenabhängig und ligandenunabhängig. Wenn der Ligand EphrinA1 an den EphA2-Rezeptor bindet, wird EphA2 internalisiert und anschließend durch Ubiquitinierung abgebaut. Gleichzeitig wird EphA2 durch Tyrosinkinase zur Phosphorylierung aktiviert, während die S897-Stelle von EphA2 dephosphoryliert wird, wodurch Signalwege wie PI3K/ATK und Ras/MAPK gehemmt werden, was ligandenabhängige Antitumoreffekte zur Folge hat. Wird hingegen der Ligand EphrinA1 wenig exprimiert und EphA2 stark exprimiert, wird EphA2 phosphoryliert und über die S897-Stelle aktiviert, während sein Tyrosin-Phosphorylierungsgrad abnimmt, wodurch die PI3K/ATK/mTOR- und Pyk2/c-Src-Signalwege aktiviert werden, was ligandenunabhängige tumorerzeugende Wirkungen hat. Die nicht ligandenabhängige EphA2-Signalgebung kann die Tumorproliferation und Metastasierung fördern, die Resistenz des Tumors gegen Medikamente verstärken und die stammzellähnlichen Eigenschaften des Tumors aufrechterhalten. Es zeigt sich, dass EphA2 eine doppelte Aktivität hat, nämlich eine ligandenaktivierte krebshemmende und eine nicht ligandenaktivierte krebsfördernde Wirkung, und die Dephosphorylierung oder Phosphorylierung der S897-Stelle von EphA2 ist der Schalter, der die beiden entgegengesetzten biologischen Wirkungen steuert. Die Dephosphorylierung von EphA2 S897 hängt mit dem Liganden EphrinA1 zusammen, während die Phosphorylierung von EphA2 S897 mit ATK zusammenhängt, dem frühesten und anerkanntesten wichtigen Faktor. Die ATK-Phosphorylierung ist ein wichtiger Faktor bei der Förderung der Zellmigration und -invasion durch den EphA2-Faktor, während die Bindung des EphrinA1-Liganden an EphrinA1 die ATK-Aktivierung hemmt und die Migration von Tumorzellen unterdrückt. Es gibt Berichte, dass EphA2 sowohl ein vorgelagerter negativer Regulator als auch ein nachgelagerter Effektor von ATK ist. Die Aktivierung des PI3K/ATK/mTOR-Stoffwechsels in Verbindung mit dem Fehlen des Liganden EphrinA1 führt dazu, dass EphA2 von einem Tumorsuppressor zu einem Pro-Tumorfaktor wird, der von ATK phosphoryliert wird und die Entwicklung eines bösartigen Tumors fördert. Berichten zufolge fördert EphA2 das Fortschreiten der EMT in Magenkrebszellen über den Wnt-β-Catenin-Weg.

Frühere Forschungen des Forschungsteams haben gezeigt, dass der Extrakt der Stinkenden Pfingstrose die Expression der EMT-verwandten Faktoren Vimentin, Slug, Snail, Twist und Cmyc bei Lungenkrebs signifikant reduzieren und den EMT-Prozess von Lungenkrebs durch Regulierung des Wnt-β-Catenin-Wegs hemmen kann. In dieser Studie fanden wir heraus, dass Extrakte aus Paeonia lactiflora phenylethanolic Glykoside können deutlich hemmen die Proliferation, Migration und Invasion von A549 Zellen, sowie unterdrücken die Expression von EphA2, mTOR, p-mTOR, β - Catenin, GSK-3 β, P-GSK-3 β, und P-ATK-Proteine. Unter ihnen ist die Herunterregulierung von P-ATK besonders signifikant, und die Herunterregulierung des EphA2-Proteins kann auch die Expression von EphrinA1 hochregulieren. Der Phenylethanol-Glykosid-Extrakt der Stinkenden Pfingstrose kann die Bindung von EphA2 an den Liganden EphrinA1 induzieren, den vom Liganden EphrinA1 abhängigen Anti-Krebs-Weg fördern und eine Antitumor-Wirkung ausüben, indem er EphA2, P-ATK, mTOR und andere Faktoren hemmt und den EphA2/ATK/mTOR-Signalweg blockiert. Der Anstieg von P-EphA2 ist auf die Abhängigkeit von Liganden zurückzuführen. Obwohl die S897-Stelle auf EphA2 dephosphoryliert wird, wird die EphA2-Tyrosinkinase durch Phosphorylierung aktiviert, so dass die P-EphA2-Gesamtmenge hochreguliert werden kann. Der Mechanismus der Tumorbekämpfung ist jedoch sehr komplex, und das Schicksal von Tumorzellen wird nicht durch einen einzigen Weg bestimmt. Diese Studie liefert experimentelle Beweise für die Bestimmung des molekularen Anti-Tumor-Mechanismus der Stinkenden Pfingstrose und für die Entwicklung hochwirksamer und wenig toxischer Extrakte der traditionellen chinesischen Medizin, die auf EphA2-Ziele abzielen.