Bewertung der Qualität von Lotosblüten unterschiedlicher Herkunft anhand des Fingerabdruckspektrums in Kombination mit einer chemischen Mustererkennungsmethode
Der Schlafende Lotus ist eine mehrjährige krautige Wasserpflanze aus der Familie der Nymphaeaceae, die in Ili, Altay, Bohu und anderen Gebieten in Xinjiang heimisch ist. Die getrockneten Blütenknospen des Schlafenden Lotus werden in der uigurischen Medizin häufig als Heilpflanze verwendet und wurden in den Band der uigurischen Medizin der Arzneimittelstandards des Gesundheitsministeriums der Volksrepublik China aufgenommen. Sie wirken fiebersenkend, hustenlindernd, hitzeabbauend und entgiftend, beruhigend auf den Geist und können zur Behandlung von Kopfschmerzen, fieberbedingtem Husten, akutem und chronischem Windschock bei Kindern, der durch Fieber verursacht wird, eingesetzt werden. Der schlafende Lotus enthält hauptsächlich Flavonoide und phenolische Verbindungen. Moderne pharmakologische Studien haben gezeigt, dass er verschiedene biologische Wirkungen hat, wie z. B. antioxidativ, entzündungshemmend, blutzuckersenkend, antiviral usw. Um die intrinsische Qualität chinesischer Heilkräuter besser kontrollieren zu können, soll in dieser Studie das Fingerabdruck-Spektrum in Kombination mit der Methode der chemischen Mustererkennung verwendet werden, um den Gehalt an mehreren Komponenten zu bestimmen, die Unterschiede in der Zusammensetzung chinesischer Heilkräuter in verschiedenen Anbaugebieten umfassend zu analysieren, die Unterschiede in den Anbaugebieten und die charakteristischen Komponenten zu klären, eine Referenz für die Identifizierung und die Formulierung von Qualitätsstandards für chinesische Heilkräuter zu liefern und eine Grundlage für die weitere Entwicklung und Nutzung zu schaffen.

Auswahl des Extraktionslösungsmittels. Das Heilkraut des Schlafenden Lotus enthält viele chemische Komponenten und unterschiedliche Eigenschaften. Um die Informationen über die in der Heilpflanze enthaltenen chemischen Komponenten im Chromatogramm besser widerzuspiegeln, wurde in diesem Artikel eine große Anzahl an Literatur konsultiert und Methanol, 50%-Methanol und Ethanol als Extraktionslösungsmittel für diesen Versuch ausgewählt. Bei der Verwendung von 50%-Methanol und Ethanol als Extraktionsmittel ergab die Analyse der Fingerabdruck-Spektren von 15 Chargen des Schlafenden Lotus, dass es 23 gemeinsame Peaks bei einer Wellenlänge von 273 nm gab. Peak 1 wies eine gute Trennung der Gallussäure und eine große Peakfläche auf, weshalb er als Referenzpeak verwendet wurde. Es gibt 17 gemeinsame Peaks bei 350 nm, von denen 4 Komponenten identifiziert wurden, nämlich Gerbsäure, Feuerwerksglykosid, Purpurglykosid und Quercetin. In der Zwischenzeit wurde die Ähnlichkeit der Fingerabdruckspektren von 15 Probenchargen bewertet, und die Ergebnisse zeigten eine gute Ähnlichkeit mit den Fingerabdruckspektren der Kontrollen. Die geringe Anzahl von Peaks führt zu einer unvollständigen Extraktion. Durch eine umfassende Analyse verschiedener Faktoren wurde die optimale Extraktionsmethode mit Methanol als Lösungsmittel bestimmt.

Auswahl der Detektionswellenlänge. In dieser Studie wurde ein Diodenarray-Detektor verwendet, um das Fingerabdruckspektrum der Lotusblume bei voller Wellenlänge (190-800nm) zu scannen. Anhand des dargestellten 3D-Spektrums lässt sich erkennen, dass die chromatografische Peak-Trennung hoch, die Peak-Symmetrie gut, die Basislinie stabil und die Peak-Kapazität unter den Wellenlängenbedingungen von 273 nm und 350 nm groß ist. Das erhaltene Spektrum der Testlösung kann reichere Informationen anzeigen. Daher wurden 273 nm und 350 nm als Messwellenlängen gewählt.

Auswahl der chromatographischen Bedingungen. Der Einfluss von Methanol und Acetonitril als mobile Phasen auf das Fingerabdruckspektrum von Lotusblumen wurde untersucht. Bei der Verwendung von Methanol und Acetonitril als mobile Phasen für die isokratische Analyse ist die Trenneffizienz schlecht. Um eine bessere Trennung der einzelnen chromatographischen Peaks zu erreichen, wird eine Gradientenelution gewählt. Im Vergleich zu Methanol und Acetonitril als mobiler Phase lassen sich im Chromatogramm des Fingerabdrucks mehr chromatographische Peaks erzielen. Der Vergleich der Chromatogramme, die mit zwei verschiedenen mobilen Phasen erhalten wurden, ergab, dass die Trennleistung mit Acetonitril besser war als mit Methanol. Daher wurde Acetonitril als mobile Phase für diese Studie gewählt.
Bewertung der Analysemethoden. Die Analyse der Fingerabdruckspektren von 15 Chargen schlafender Lotusblüten ergab, dass es 23 gemeinsame Peaks bei einer Wellenlänge von 273 nm gab. Peak 1 wies eine gute Trennung der Gallussäure und eine große Peakfläche auf, weshalb er als Referenzpeak verwendet wurde. Es gibt 17 gemeinsame Peaks bei 350 nm, von denen 4 Komponenten identifiziert wurden, nämlich Gerbsäure, Feuerwerksglykosid, Purpurglykosid und Quercetin. In der Zwischenzeit wurde die Ähnlichkeit der Fingerabdruckspektren von 15 Probenchargen bewertet, und die Ergebnisse zeigten eine gute Ähnlichkeit mit den Fingerabdruckspektren der Kontrollen. Die Kombination von HPLC-Fingerprint und Clusteranalyse, PCA, OPLS-DA kann für die Clusterbildung und die Analyse der Komponentenunterscheidung von medizinischen Materialien unterschiedlicher Herkunft und Chargen verwendet werden. In dieser Studie wurden chemische Mustererkennungsmethoden verwendet, um Clusteranalyse, PCA und OPLS-DA Klassifizierungsmuster für das Heilkraut Nelumbo nucifera durchzuführen. Die Analyseergebnisse der drei Methoden waren konsistent. Fünfzehn Chargen von Nelumbo nucifera wurden bei 273 nm in vier Kategorien unterteilt, wobei sich die Unterschiede hauptsächlich in den Peaks 17, 1, 4, 15, 20, 23, 3, 6, 2 und 21 widerspiegelten. Unter ihnen war Peak 1 Gallussäure, Peak 15 war Puerarin und Peak 20 war Quercetin. Bei 350 nm wird es in drei Kategorien unterteilt, wobei sich die Unterschiede hauptsächlich im Screening der Peaks 14, 1, 13, 7, 8, 11, 10 und 2 zeigen. Bei Peak 14 handelt es sich um Quercetin, bei Peak 7 um Feuerwerksglykosid und bei Peak 8 um Purpurglykosid. Diese Komponenten können als die wichtigsten charakteristischen Komponenten für die Unterscheidung und Identifizierung der Qualität von Lotosarzneimitteln aus verschiedenen Anbaugebieten dienen. Unsere Forschungsgruppe wird weiterhin eingehende Studien über unbekannte unterschiedliche Komponenten durchführen, um eine umfassendere Referenz für die Bewertung der Qualität von Lotus-Arzneimitteln zu erhalten.