Analyse multivariater aktiver Komponenten in verschiedenen Teilen der dreiblättrigen Kletterrebe mittels UFLC-QTRAP-MS/MS-Technologie
San Ye Qing ist die Wurzel oder ganze Pflanze von Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg (THDG) aus der Familie der Weintrauben. Sie wird seit langem als Heilpflanze verwendet und ist eine der "Neuen Acht Aromen von Zhejiang". Er wirkt hitzelösend und entgiftend, fördert die Blutzirkulation und vertreibt den Wind. Er wird vor allem bei Fieberkrämpfen, Lungenentzündung, Asthma, Hepatitis, Rheuma, Skrofulose und Verletzungen durch Stürze eingesetzt. Die moderne pharmakologische Forschung hat gezeigt, dass San Ye Qing pharmakologische Wirkungen wie Antitumor, Antioxidationsmittel, entzündungshemmend, antibakteriell, fiebersenkend, schmerzstillend und immunregulierend hat.
Die dreiblättrige Kletterrebe wächst hauptsächlich in der südlichen Region des Jangtse-Flusses und wird seit langem in den volkstümlichen Gebieten von Zhejiang als Heilpflanze verwendet. Die ganze Pflanze und die Wurzel können verwendet werden. In den letzten Jahren haben Studien signifikante Unterschiede in der chemischen Zusammensetzung und der pharmakologischen Aktivität zwischen den verschiedenen medizinischen Teilen der Pflanze festgestellt. So ist beispielsweise die antioxidative Aktivität des oberirdischen Extrakts deutlich höher als die des unterirdischen Extrakts, während die Aktivität des unterirdischen Extrakts zum Fangen von Hydroxylradikalen deutlich höher ist als die des oberirdischen Extrakts. Da San Ye Qing derzeit nur in den lokalen Normen und Spezifikationen der traditionellen chinesischen Medizin enthalten ist, sind seine Indikatorkomponenten nicht klar definiert. In den letzten Jahren hat die Forschung gezeigt, dass neben Flavonoiden, Phenolsäuren, Polyphenolen, Polysacchariden und anderen aktiven Bestandteilen von San Ye Qing auch Tannine, Aminosäuren und Nukleoside potenzielle physiologische Aktivitäten haben. Unter ihnen haben Tanninkomponenten wie Anthocyane B2 hemmende Wirkungen auf Magenkrebs, Aminosäurekomponenten haben gute therapeutische Wirkungen auf Leberverletzungen, und Nukleosidkomponenten haben gute antibakterielle und antivirale Wirkungen. Derzeit konzentriert sich die Forschung zu den Wirkstoffen der verschiedenen Teile der Dreiblättrigen Kletterrebe hauptsächlich auf die Gesamtmenge der Flavonoide, die Gesamtmenge der Phenolsäuren und die Gesamtmenge der Polysaccharide, wobei nur wenige gleichzeitige Inhaltsbestimmungen mehrerer Wirkstoffkategorien durchgeführt werden. Zu den Analysemethoden für die Qualitätsbewertung und -kontrolle der verschiedenen Teile gehören hauptsächlich die Hochleistungsflüssigkeitschromatographie, die Gaschromatographie-Massenspektrometrie und die Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie-Technologie. Um Referenzdaten für die Qualitätskontrolle und die rationelle Ressourcennutzung verschiedener Teile der Dreiblättrigen Kletterrebe bereitzustellen, ist es daher notwendig, eine schnelle Methode zur Bestimmung des Gehalts an Wirkstoffen in verschiedenen Teilen und zur Qualitätsbewertung zu entwickeln.
Die ultraschnelle Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie-Triple-Quadrupol-Linear-Ionenfallen-Massenspektrometrie (UFLC-QTRAP-MS/MS) zeichnet sich durch hohe Trennleistung, hohe Selektivität und hohe Empfindlichkeit aus und kann gemischte Verbindungen schnell trennen und identifizieren. Sie eignet sich für die Trennung und Analyse von komplexen Mehrkomponentensystemen von Trifolium repens. Daher wurden in dieser Studie die Wurzeln, Stängel und Blätter der Dreiblättrigen Kletterpflanze als Versuchsobjekte verwendet und gleichzeitig 60 Wirkstoffe mittels UFLC-QTRAP-MS/MS-Technologie bestimmt. Multivariate statistische Analysemethoden wie die Hauptkomponentenanalyse (PCA), die partielle Kleinstquadrat-Regressionsanalyse (PLS-DA) und die Varianzanalyse wurden verwendet, um die Unterschiede der Wirkstoffe zwischen den verschiedenen Teilen zu erkennen und aufzuzeigen. Die Graue-Relationen-Analyse (GRA) wurde zur Bewertung der Qualität der verschiedenen Teile eingesetzt. Die Ergebnisse dieser Studie können methodische Hinweise für die schnelle Quantifizierung und Qualitätskontrolle der verschiedenen Wirkstoffe in den verschiedenen Teilen der Dreiblatt-Kletterpflanze liefern und die Grundlage für eine rationelle Entwicklung und Nutzung ihrer Ressourcen bilden.

Die Forschungsergebnisse deuten darauf hin, dass es signifikante Unterschiede in der Qualität von Wurzeln, Stängeln und Blättern der Dreiblättrigen Kletterrebe gibt, und dass es signifikante Unterschiede im Gehalt einiger Bestandteile gibt. Acht Verbindungen wurden mittels PLS-DA, VIP-Wert und Varianzanalyse als Wirkstoffmarker ausgewählt, um verschiedene Teile zu unterscheiden. Unter ihnen zeigten Vitexin, Isovitexin, Paeoniflorin und Isopaeoniflorin eine hohe bis niedrige Tendenz im Gehalt in Blättern, Stängeln und Knollen und waren alle Flavonoid-Kohlenstoffglykosid-Verbindungen. Aufgrund der starken Fähigkeit der Flavonoidkohlenstoffglykoside, DPPH-Radikale zu fangen, können die Ergebnisse dieses Versuchs auch als Datengrundlage für die Schlussfolgerung dienen, dass die antioxidative Aktivität des oberirdischen Teils der Dreiblatt-Kletterrebe höher ist als die des unterirdischen Teils. Darüber hinaus beträgt der Gehalt an Proanthocyanidin B2 in den Stängeln 5029,22 μ g/g, was viermal bzw. 15-mal höher ist als in den Wurzeln und Blättern. Es hat auch signifikante antioxidative und Anti-Tumor-Aktivitäten, was darauf hindeutet, dass Proanthocyanidin-Komponenten eine wichtige Rolle bei metabolischen Aktivitäten in verschiedenen Teilen der Pflanze spielen können. Der Wert der relativen Korrelation (ri) in der grauen relationalen Analyse kann zur Einstufung der Qualitätsstufen von Wurzel-, Stamm- und Blattproben verwendet werden. Die Endergebnisse zeigen, dass die Blattproben (S7-S12) höher eingestuft werden, was bedeutet, dass ihre Qualität besser ist als die der Stamm- und Wurzelproben.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass in dieser Studie eine Methode zur gleichzeitigen Bestimmung von 60 Wirkstoffen in verschiedenen Teilen der Dreiblättrigen Kletterrebe mit Hilfe der ultraschnellen Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie (UFLC-QTRAP-MS/MS) entwickelt und die verschiedenen Teile mit Hilfe einer multivariaten statistischen Analyse verglichen und bewertet wurden. Die Ergebnisse der Inhaltsstoffbestimmung deuten darauf hin, dass es in den verschiedenen Teilen eine Fülle von Wirkstoffen gibt, wobei der Gesamtgehalt an mehreren Wirkstoffen in den Blättern höher ist als in den Stängeln und Knollen. Darüber hinaus zeigte die multivariate statistische Analyse, wie die Hauptkomponentenanalyse, signifikante Unterschiede in den Wirkstoffen der verschiedenen Teile der Dreiblatt-Kletterrebe und offenbarte acht signifikant unterschiedliche Komponenten, nämlich Vitexin, Isovitexin, Icariin, Isoicariin, Proanthocyanidin B2, Tyrosin, Phenylalanin und Leucin. Die graue Korrelationsanalyse zeigt, dass die Qualität der Blattteile relativ besser ist, gefolgt von den Stängeln und Knollen. Die Ergebnisse dieser Studie bieten einen methodischen Bezugspunkt für die Bestimmung und Qualitätskontrolle von Wirkstoffen in verschiedenen Teilen der Dreiblatt-Kletterrebe und bilden die Grundlage für die rationelle Entwicklung und Nutzung ihrer Ressourcen.