Unders\u00f8gelse af aktiviteten og mekanismen af RCE-4, en aktiv ingrediens i Lucky Grass, i forbindelse med h\u00e6mning af spredning, invasion og migration af Ca Ski Cells i livmoderhalskr\u00e6ft
\nLivmoderhalskr\u00e6ft er en almindelig gyn\u00e6kologisk ondartet tumor, og i \u00f8jeblikket er kirurgi, str\u00e5lebehandling og kemoterapi de vigtigste behandlinger for den i klinisk praksis. Men da livmoderhalskr\u00e6ft for det meste er en invasiv tumor med karakter af let metastase og spredning, f\u00f8rer det ofte til d\u00e5rlige behandlingsforventninger. Derfor har s\u00f8gningen efter nye kemoterapeutiske l\u00e6gemidler mod livmoderhalskr\u00e6ft, der kan h\u00e6mme dens invasion og migration, tiltrukket sig stor opm\u00e6rksomhed. L\u00e6gemidler fra naturlige kilder har altid v\u00e6ret h\u00f8jt v\u00e6rdsat af forskere p\u00e5 grund af deres fordele med flere m\u00e5l, effektivitet og lav toksicitet. RCE-4 er et spirostan-saponin isoleret fra Reineckia carnea (Andr.) Kunth, en plante af Liliaceae-familien, i vores laboratorium. Dets kemiske navn er (1 \u03b2, 3 \u03b2, 5 \u03b2, 25S) - spirostan-1,3-diol1- [\u03b1 - L-rhamnose - (1 \u2192 2) - \u03b2 - D-xylopyranosid. Strukturen er vist i figur 1, og den har det h\u00f8jeste indhold (op til 13%) i de samlede saponiner fra Reineckia carnea (Andr.) Kunth. Samtidig er dets farmakologiske aktivitet ogs\u00e5 den bedste. RCE-4 er blevet inkluderet som en vigtig komponent i Reineckia carnea i de lokale standarder for kinesisk urtemedicin i Hubei-provinsen.
\nTidligere forskning i vores laboratorium har vist, at RCE-4 har en god selektiv cytotoksicitet mod livmoderhalskr\u00e6ft Ca Ski-celler og kan h\u00e6mme v\u00e6ksten af Ca Ski-celletransplantationstumorer hos n\u00f8gne mus betydeligt. Den h\u00f8jeste tumorinhiberingshastighed kan n\u00e5 69,1%. Der blev ikke observeret tumorcellemetastaser, infiltration eller patologiske \u00e6ndringer i vigtige v\u00e6v som livmoderen og \u00e6ggestokkene hos de behandlede mus. Med inspiration fra tidligere resultater spekulerer vi i, at RCE-4 kan have en h\u00e6mmende effekt p\u00e5 invasionen og migrationen af livmoderhalskr\u00e6ftceller. I \u00f8jeblikket har der ikke v\u00e6ret nogen rapporter om dets relaterede aktiviteter og molekyl\u00e6re virkningsmekanismer.
\nWnt\/\u03b2 - catenin og Hippo\/YAP er to intracellul\u00e6re signalveje, der er t\u00e6t forbundet med tumorinvasion og -migration. Begge veje regulerer tumorinvasion og -migration ved at komme ind i kernen gennem deres centrale signalmolekyler (\u03b2-catenin og YAP\/TAZ) og binde sig til transkriptionsfaktorer for at transkribere downstream-m\u00e5lgener. Blokering af Wnt\/\u03b2 - catenin-stien har en betydelig h\u00e6mmende effekt p\u00e5 tumorproliferation. Unormal aktivering af Wnt\/\u03b2 - catenin-signalvejen kan for\u00e5rsage v\u00e6kst- og udviklingsdefekter samt forekomst, migration og invasion af tumorer. Nedregulering af downstream-proteiner som MMP2 og MMP9 i Wnt\/\u03b2 - catenin-signalvejen kan h\u00e6mme metastase af tumorceller. I mods\u00e6tning til den biologiske funktion af Wnt\/\u03b2 - catenin-vejen h\u00e6mmer aktivering af Hippo\/YAP-vejen celleproliferation og fremmer celleapoptose. I frav\u00e6r af Hippo-relaterede aktiverende faktorer overf\u00f8res ikke-phosphoryleret YAP til kernen og interagerer med den transkriptionsaktiverende faktor TEAD\/TEF-familien for at regulere udtrykket af m\u00e5lgener. Ekstracellul\u00e6re stimuleringssignaler kan aktivere Mst1\/2 gennem en uklar mekanisme og derefter fosforylere andre kernemedlemmer gennem en r\u00e6kke kaskadefosforyleringsreaktioner.
\nDerfor vil denne unders\u00f8gelse fokusere p\u00e5 livmoderhalskr\u00e6ft Ca Ski-celler og unders\u00f8ge virkningerne og de molekyl\u00e6re mekanismer af RCE-4 p\u00e5 spredning, invasion og migration af livmoderhalskr\u00e6ft gennem Wnt\/\u03b2 - catenin og Hippo\/YAP-signalvejene, hvilket giver teoretisk st\u00f8tte til den fremtidige kliniske anvendelse af RCE-4.<\/p>\n
Vores laboratorium har vist gennem MTT-eksperimenter, at RCE-4 kan h\u00e6mme spredningen af Ca Ski-celler p\u00e5 en tidsafh\u00e6ngig og dosisafh\u00e6ngig m\u00e5de. Resultaterne af klondannelsesfors\u00f8get i denne unders\u00f8gelse validerer yderligere effektiviteten af RCE-4. Derudover blev effekten af RCE-4 p\u00e5 invasionen og migrationen af Ca Ski-celler p\u00e5vist gennem scratch-eksperimenter og in vitro-invasionseksperimenter i Transwell-kammeret. Resultaterne viste, at RCE-4 signifikant h\u00e6mmede Ca Ski-cellers migrations- og invasionsevne og udviste koncentrationsafh\u00e6ngighed.
\nWnt\/\u03b2 - catenin-signalvejen spiller en vigtig rolle i tumormigration, og indtr\u00e6den af \u03b2 - catenin i kernen er n\u00f8glen til aktivering af denne vej. Resultaterne viste, at RCE-4 kan h\u00e6mme den nukleare indtr\u00e6ngen af \u03b2-catenin gennem tre veje: h\u00e6mning af udtrykket af p-GSK3 \u03b2, fremme af fosforyleringen af \u03b2-catenin og h\u00e6mning af udtrykket af PAK4, hvorved transkriptionen af downstream-gener som matrixmetalloproteinaser MMP2\/7\/9\/14 h\u00e6mmes. Interessant nok har den seneste forskning vist, at h\u00e6mning af PAK4's aktivitet synergistisk kan forbedre den terapeutiske effekt af PD-1-immunblokadebehandling. PD-1-terapi har ringe effekt i frav\u00e6r af pr\u00e6infiltration af immunceller i tumorv\u00e6v, hvilket ogs\u00e5 er hoved\u00e5rsagen til udviklingen af resistens over for PD-1-terapi. Brugen af PAK4-h\u00e6mmere kan forbedre tumorv\u00e6vets respons p\u00e5 PD-1-blokadebehandling in vivo betydeligt. I betragtning af den betydelige h\u00e6mmende effekt af RCE-4 p\u00e5 PAK4 giver dette os en ny forskningsretning.
\nForholdet mellem Hippo\/YAP-signalvejen og tumorcelleinvasion er ogs\u00e5 blevet bekr\u00e6ftet, men indtil videre er der relativt f\u00e5 l\u00e6gemidler rettet mod Hippo\/YAP-signalvejen. I 2018 fandt Gill et al. ud af, at der er en s\u00e6rlig positiv feedback-loop omkring YAP\/TAZ-molekylernes indtr\u00e6den i kernen, som best\u00e5r af fem proteinmolekyler: NUAK2, LATS1, p-LATS1, YAP\/TAZ i cytoplasmaet og kernen. NUAK2 kan h\u00e6mme udtrykket af LATS1 for at forhindre dets fosforylering og derved fremme overf\u00f8rslen af YAP\/TAZ-kompleksmolekyler fra cytoplasmaet til kernen. YAP\/TAZ-molekyler, der kommer ind i kernen, binder sig til NUAK2-transkripter, og det transkriberede NUAK2 kommer ind i cytoplasmaet og danner et positivt feedback-loop. Opdagelsen af denne cyklus g\u00f8r Hippo\/YAP-signalvejen mere kompleks og forklarer vanskeligheden ved at regulere Hippo\/YAP-signalvejen for at h\u00e6mme invasionen af tumorceller. Resultaterne af dette eksperiment viste, at RCE-4 kan h\u00e6mme YAP\/TAZ's nukleare indtr\u00e6ngen gennem flere veje, herunder h\u00e6mning af fosforyleringen af MST1, forbedring af fosforyleringen af YAP og reduktion af udtrykket af YAP. Reduktionen af YAP\/TAZ i kernen f\u00f8rer til et fald i udtrykket af NUAK2 og bryder dermed denne positive feedback-loop. Afbrydelsen af cyklussen f\u00f8rer til et fald i udtrykket af downstream-proteiner som intercellul\u00e6rt adh\u00e6sionsmolekyle-1 (ICAM-1), vaskul\u00e6rt celleadh\u00e6sionsmolekyle-1 (VCAM-1), CYR61 og SOX2, hvilket h\u00e6mmer Ca Ski-cellernes migrationsevne betydeligt.
\nDet er v\u00e6rd at bem\u00e6rke, at Wnt\/\u03b2 - catenin- og Hippo\/YAP-signalvejene i cellerne ikke er helt uafh\u00e6ngige af hinanden, og at de interagerer p\u00e5 mange m\u00e5der. For eksempel kan fosforyleret YAP\/TAZ binde sig til \u03b2-catenin, hvilket f\u00e5r det til at forblive i cytoplasmaet og h\u00e6mmer dets transkriptionelle aktivitet. YAP kan inducere inaktivering af GSK3 \u03b2, som igen stabiliserer cytoplasmatisk \u03b2 - catenin og fremmer nuklear overf\u00f8rsel af \u03b2 - catenin. Denne unders\u00f8gelse har endnu ikke udf\u00f8rt dybdeg\u00e5ende forskning i den gensidige feedback-regulering af de to signalveje. Samtidig har dette forskningsstadie ogs\u00e5 visse begr\u00e6nsninger. Det er ikke blevet valideret for andre cellelinjer af livmoderhalskr\u00e6ft som Hela og SiHa, og der mangler resultater fra dyrefors\u00f8g. Dette er ogs\u00e5 vores n\u00e6ste forskningsretning.
\nSammenfattende har RCE-4 en god evne til at h\u00e6mme invasionen og migrationen af Ca Ski-celler. Dens molekyl\u00e6re mekanisme opn\u00e5s hovedsageligt ved at blokere n\u00f8gletrinnet for \u03b2 - catenin og YAP\/TAZ, der kommer ind i kernen, og derved h\u00e6mme aktiveringen af Wnt\/\u03b2 - catenin-signalvejen og aktivere Hip po\/YAP-signalvejen.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Study on the Activity and Mechanism of RCE-4, an Active Ingredient of Lucky Grass, in Inhibiting the Proliferation, Invasion, and Migration of Ca Ski Cells in Cervical Cancer Cervical cancer is a common gynecological malignant tumor, and currently, surgery, radiotherapy, and chemotherapy are the main treatments for it in clinical practice. However, due to the […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n