Glycyrrhiza uralensis-polysakkarid GiP-B1 aktiverer makrofag RAW264.7 via TLR4\/MyD88\/NF - \u03ba B-signalvej
\nDet medf\u00f8dte immunsystem er en vigtig forsvarslinje for kroppen til at modst\u00e5 patogeninvasion, og Toll-lignende receptorer (TLR'er) samt antigenpr\u00e6senterende celler som makrofager og dendritiske celler, der udtrykker TLR'er, er vigtige komponenter i det medf\u00f8dte immunsystem. Forskning i TLR'ernes involvering i makrofagers immungenkendelse, regulering af signaltransduktion og initiering af immunrespons har vist, at alle medlemmer af TLR-familien, undtagen TLR3, kan genkende ligander som lipopolysaccharider (LPS), binde til myeloid differentieringsfaktor 88 (MyD88), rekruttere relevante kinaser og aktivere kinaseinhibitoren af nuklear faktor kappa B (IKK), som phosphorylerer inhibitoren af NF - \u03ba B (I \u03ba B), der binder til NF - \u03ba B. Og dissocierer, aktiverer NF - \u03ba B i kernen, indleder eller h\u00e6mmer transkriptionen af m\u00e5lgener og regulerer derved det medf\u00f8dte immunrespons.
\nPolysaccharider, som er en effektiv klasse af biologiske responsregulatorer, aktiverer makrofagimmunresponser gennem mekanismer, der er relateret til TLR\/NF - \u03ba B-signalvejstransduktion. Forskning har vist, at mange plantepolysaccharider specifikt kan binde sig til receptorer som TLR2\/4 p\u00e5 overfladen af makrofager, aktivere NF-\u03ba B-signalvejen, regulere transkriptionen af cytokiner og udtrykket af co-stimulerende molekyler i fagocytiske celler og igangs\u00e6tte downstream-kaskader for at aktivere medf\u00f8dt og erhvervet immunitet.
\nGlycyrrhiza inflata Bat. er en karakteristisk medicinsk planteressource i Xinjiang. Dens t\u00f8rrede r\u00f8dder og jordst\u00e6ngler er blevet optaget i den kinesiske farmakop\u00e9 som l\u00e6geurter. Vores forskningsgruppe har bekr\u00e6ftet, at det r\u00e5 polysakkarid GiP og de oprensede komponenter fremmer spredningen af makrofager og lymfocytter. Den oprensede komponent GiP-B1, som har et h\u00f8jt indhold, er et surt polysaccharid med en poly Rha GalA-hovedk\u00e6de med en relativ molekylv\u00e6gt p\u00e5 mere end 2,0 \u00d7 106Da og et uronsyreindhold p\u00e5 16,8%. Det kan markant fremme spredning og fagocytose af RAW264.7-makrofager, \u00f8ge udskillelsen af IL-1 \u03b2 og TNF - \u03b1 af makrofager og fremme genereringen af NO og NOS. Forskergruppen brugte yderligere monoklonalt antistof anti-TLR4 til at gribe ind i makrofager og fandt, at udskillelsen af TNF - \u03b1, IL-1 \u03b2, 1L-6 og NO induceret af GiP-B1 samt udtrykket af iNOS, 1L-1 \u03b2, TNF - \u03b1 og 1L-6 mRNA blev h\u00e6mmet i varierende grad, hvilket tyder p\u00e5, at GiP-B1-aktivering af makrofager kan v\u00e6re relateret til TLR4 og dets relaterede signalveje. For at unders\u00f8ge forholdet mellem GiP-B1-aktiverede makrofager og TLR4\/NF - \u03ba B-signalvejen transfekterede denne unders\u00f8gelse RAW264.7-makrofager med TLR4-interfererende RNA (TLR4 siRNA) in vitro for at unders\u00f8ge, om GiP-B1-intervention kan aktivere makrofager gennem den TLR4-medierede NF - \u03ba B-signalvej for at belyse den molekyl\u00e6re mekanisme for GiP-B1-aktiverede makrofager.<\/p>\n
Makrofager er vigtige eksekutorer af den medf\u00f8dte immunitet i kroppen. Som specialiserede fagocyterende v\u00e6vsceller kan de genkende konserverede patogenassocierede molekyl\u00e6re m\u00f8nstre (PAMP'er) p\u00e5 overfladen af patogene mikroorganismer gennem m\u00f8nstergenkendelsesreceptorer (PRR'er) s\u00e5som TLR'er, der udtrykkes p\u00e5 deres overflade. Gennem downstream-signalveje regulerer de udtrykket af forskellige immunresponsgener for at fjerne patogener. Forskning har vist, at mange naturlige plantepolysaccharider kan fungere som ligander for TLR4, hvilket letter makrofagsignalering gennem b\u00e5de MyD88-afh\u00e6ngige og ikke-afh\u00e6ngige veje, fremmer NF - \u03ba B-indtr\u00e6den i kernen og binder til specifikke genkendelsessekvenser p\u00e5 DNA-promotorer, der formidler udtrykket af cytokiner som IL-1, IL-6, TNF - \u03b1 osv. Disse cytokiner fungerer ogs\u00e5 som stimulatorer af NF - \u03ba B, hvilket yderligere aktiverer NF - \u03ba B til at for\u00e5rsage vedvarende inflammatoriske reaktioner og aktivere adaptive immunresponser.
\nSom kildeplante til den traditionelle kinesiske medicin lakrids omfatter de vigtigste medicinske stoffer i lakrids med h\u00e6vede frugter ikke kun chalconer med kr\u00e6fth\u00e6mmende aktivitet, men ogs\u00e5 polysaccharider med antioxidant, alfa-glucosidaseh\u00e6mmende aktivitet og immunregulerende aktivitet. I vores forskergruppes indledende forskning blev det konstateret, at det r\u00e5 polysakkarid GiP og dets oprensede komponenter fra Glycyrrhiza uralensis har den virkning, at de fremmer makrofag- og lymfocytproliferation. Blandt dem har den oprensede komponent GiP-B1 med h\u00f8jere indhold en betydelig fremmende effekt p\u00e5 spredning, fagocytose og cytokinudskillelse af RAW264.7-makrofager. Den forel\u00f8bige forskningsgruppe brugte anti-TLR4 til at behandle celler og fandt ud af, at dens virkningsmekanisme er relateret til aktiveringen af TLR4\/NF - \u03ba B-signalvejen efter pr\u00f8veintervention. Denne artikel bruger siRNA-teknologi til at d\u00e6mpe TLR4-genet gennem TLR4 siRNA og finder ud af, at GiP-B1 fremmer spredningen af RAW264.7-makrofager og h\u00e6mmer udskillelsen af cytokiner TNF - \u03b1, IL-1 \u03b2 og IL-6. Dette indikerer, at TLR4 er involveret i GiP-B1's effekt p\u00e5 RAW264.7-makrofagproliferation og cytokinsekretion, dvs. at GiP-B1-aktivering af makrofager er relateret til TLR4, hvilket er i overensstemmelse med resultaterne af tidligere antistofblokadeeksperimenter. Baseret p\u00e5 de typer cytokiner, der udskilles af makrofager aktiveret af GiP-B1 gennem TLR4, s\u00e5som TNF - \u03b1, IL-1 \u03b2, IL-6 osv., tyder det desuden p\u00e5, at GiP-B1-aktivering af makrofager kan inducere polarisering mod M1-type. M1-type makrofager fremmer ikke kun inflammatoriske reaktioner, men har ogs\u00e5 antigenpr\u00e6sentationsevner, som kan aktivere adaptive immunresponser fra T-celler, fremkalde Th1-celleimmunresponser og ud\u00f8ve v\u00e6rtsimmun clearance-funktioner mod patogener og tumorceller. Tidligere unders\u00f8gelser har ogs\u00e5 vist, at GiP-B1 har visse in vitro anti-tumoreffekter. Hvorvidt dens virkningsmekanisme er relateret til, at GiP-B1 fremmer makrofagpolarisering, og om den kan fremme kroppens anti-tumorimmunfunktion ved at regulere makrofager i tumormikromilj\u00f8et, kr\u00e6ver stadig yderligere dybdeg\u00e5ende forskning.
\nFor yderligere at demonstrere forholdet mellem GiP-B1-aktivering af makrofager og TLR4\/NF - \u03ba B-stien unders\u00f8gte dette eksperiment ogs\u00e5 mRNA- og proteinekspressions\u00e6ndringer af opstr\u00f8ms regulerende gener TLR4, afh\u00e6ngigt molekyle MyD88, nedstr\u00f8ms receptorgener NF \u03ba Bp65, I \u03ba B \u03b1 osv. i makrofager reguleret af GiP-B1 under TLR4 siRNA-intervention. Resultaterne viste, at p\u00e5 grund af d\u00e6mpning af TLR4-genet faldt ekspressionsniveauet for TLR4 mRNA, indholdet af fri NF - \u03ba Bp65 i kernen faldt markant, og aktiveringen af NF - \u03ba B-vejen faldt ogs\u00e5 tilsvarende; GiP-B1 \u00f8ger ikke kun ekspressionen af TLR4-genet i makrofager under normale forhold, opregulerer mRNA- og proteinudtrykket af TLR4-signalafh\u00e6ngigt molekyle MyD88 og downstream-gener NF - \u03ba Bp65 og p-I \u03ba B \u03b1, men opregulerer ogs\u00e5 mRNA- og proteinudtrykket af TLR4 og MyD88, NF - \u03ba Bp65, og p-I \u03ba B \u03b1 for\u00e5rsaget af RNA-interferens, hvilket yderligere beviser, at GiP-B1 kan fungere som en af TLR4-liganderne, aktivere TLR4\/NF - \u03ba B-signalvejen afh\u00e6ngig af MyD88, aktivere nuklear transkriptionsfaktor p65 i NF - \u03ba B-familien, hvilket f\u00f8rer til fosforyleringsnedbrydning af I \u03ba B og dissociation fra NF - \u03ba B, og fremme NF - \u03ba B. Overf\u00f8rsel fra cytoplasma til kernen, binding til specifikke DNA-sekvenser, regulering af transkriptionen af inflammatoriske cytokiner, celleproliferation (antiapoptose) og andre gener, deltagelse i inflammatoriske reaktioner, immunresponser osv. GiP-B1 aktiverer makrofager gennem TLR4\/MyD88\/NF - \u03ba B-signalvejen, som er n\u00e6sten identisk med virkningsvejen for polysaccharider i de f\u00f8rn\u00e6vnte unders\u00f8gelser.
\nSammenfattende kan GiP-B1 regulere immunfunktionen af makrofager RAW264.7 gennem TLR4\/NF - \u03ba B-signalvejen, og dens regulerende effekt opn\u00e5s hovedsageligt gennem den MyD88-afh\u00e6ngige vej. Dette eksperiment giver eksperimentelt bevis for aktivering af makrofager af Glycyrrhiza uralensis polysaccharider, hvilket hj\u00e6lper med at belyse virkningsmekanismen for Glycyrrhiza uralensis polysaccharider i inflammatorisk respons, immunrespons og andre aspekter.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Glycyrrhiza uralensis polysaccharide GiP-B1 activates macrophage RAW264.7 via TLR4\/MyD88\/NF – \u03ba B signaling pathway The innate immune system is an important defense line for the body to resist pathogen invasion, and Toll like receptors (TLRs), as well as antigen-presenting cells such as macrophages and dendritic cells expressing TLRs, are important components of the innate immune […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n