Hurtig screening af lipids\u00e6nkende aktive ingredienser i rabarber ved hj\u00e6lp af kemisk modificerede biokompatible materialer fra L02-levercellemembranen
\nScreeningen af aktive ingredienser i traditionel kinesisk medicin er hovedsageligt baseret p\u00e5 aktivitetssporing med monomerkomponenter som screeningsobjekter, hvilket har ulemperne ved stor arbejdsbyrde, besv\u00e6rlig drift og lav effektivitet. Sammenlignet med traditionelle aktivitetssporingsmetoder er cellemembrankromatografi (CMC) en hurtigt udviklende biologisk affinitetskromatografiteknik i de senere \u00e5r, som har karakter af specifik genkendelse og effektiv adskillelse. Det grundl\u00e6ggende princip i CMC er at binde cellemembranen til overfladen af en silicagelb\u00e6rer for at danne en station\u00e6r fase. Cellemembranreceptoren kan specifikt binde sig til l\u00e6gemiddelmolekyler, og interaktionen mellem l\u00e6gemiddelmolekyler og cellemembranreceptorer kan studeres ved hj\u00e6lp af kromatografisk analyse. CMC kombinerer fordelene ved kromatografisk teknologi, cellul\u00e6r og molekyl\u00e6r biologi og receptorfarmakologi for at opn\u00e5 tiln\u00e6rmelsesvis dynamisk simulering af handlingsprocessen for aktive farmaceutiske ingredienser in vivo inden for den kromatografiske s\u00f8jle; Sammenlignet med almindeligt anvendte adsorbenter s\u00e5som ionbytterharpikser og makropor\u00f8se adsorptionsharpikser har CMC fordelen ved at kombinere kromatografisk adskillelse med aktivitetsscreening. Det er let at betjene, hurtigt og stabilt og har h\u00f8j f\u00f8lsomhed, hvilket g\u00f8r det s\u00e6rligt velegnet til screening af aktive ingredienser i komplekse systemer som f.eks. traditionel kinesisk medicin.
\nVed fremstilling af cellemembrankromatografi kan den opdeles i fysisk adsorption og kemisk modifikation baseret p\u00e5 de forskellige bindingsformer af cellemembran og silicagelb\u00e6rer. Fysisk adsorption cellemembran biologisk affinitetskromatografi fremstilles ved at udnytte fusionseffekten af selve cellemembranen og adsorptionseffekten af siliciumhydroxylgrupper p\u00e5 overfladen af silicagel; Denne type kraft er relativt svag, hvilket f\u00e5r cellemembranen til let at l\u00f8sne sig fra b\u00e6reren, hvilket resulterer i en kort levetid for den kromatografiske s\u00f8jle. Kemisk modifikation af cellemembranen til biologisk affinitetskromatografi involverer kovalent binding mellem silicagel og cellemembran; Silanolgruppen i silicagel gennemg\u00e5r en kondensationsreaktion med silankoblingsmiddel for at indf\u00f8re aminogrupper, som krydsbinder med glutaraldehydmolekyler. Den ene ende af den frie aldehydfunktionelle gruppe kan opn\u00e5s p\u00e5 overfladen af silicagel; cellemembranen indeholder et stort antal aminogrupper, som er tilb\u00f8jelige til at gennemg\u00e5 aldoaminkondensationsreaktioner ved stuetemperatur og derved opn\u00e5 den kovalente forbindelse mellem silicagel og cellemembranen. I kemisk modificeret cellemembran-bioaffinitetskromatografi er b\u00e6rersilicagelen kovalent bundet til cellemembranen, som er relativt stabil, og cellemembranen l\u00f8snes ikke let, hvilket forl\u00e6nger levetiden for kromatografikolonnen.<\/p>\n
Rabarber er en autentisk l\u00e6geurt fra Gansu-provinsen og en af de almindeligt anvendte traditionelle kinesiske l\u00e6gemidler i klinisk praksis; Den har farmakologiske virkninger som antibakteriel, antitumor, antiinflammatorisk, antiviral og lipids\u00e6nkende. Mange forskere og forskningsgrupper har bekr\u00e6ftet den lipids\u00e6nkende virkning af rabarber i tidligere unders\u00f8gelser, og vores forskningsgruppe har screenet 30% ethanolekstrakt som den effektive del til lipids\u00e6nkning hos hyperlipidemiske rotter, men dets specifikke farmakologiske stofgrundlag er stadig uklart; Forskningsgruppen udarbejdede ogs\u00e5 et fysisk adsorption L02 levercellemembran biologisk affinitetskromatografimateriale, men dets cellemembranafl\u00f8sning er alvorlig, og dets anvendelse er begr\u00e6nset. I lyset af dette blev APTES-modificeret silicagel i dette eksperiment brugt som b\u00e6rer til at fremstille L02 levercellemembran biologisk affinitetskromatografimateriale. M\u00e5let p\u00e5 cellemembranens overflade blev brugt til specifikt at adsorbere de kemiske komponenter i 30% ethanolekstraktet af rabarber. HPLC-analyse blev udf\u00f8rt p\u00e5 \u00e6ndringerne i kromatografiske toppe for hver kemisk komponent f\u00f8r og efter adsorption. Baseret p\u00e5 \u00e6ndringen i toparealet for den kromatografiske top blev de lipids\u00e6nkende aktive komponenter i rabarber hurtigt screenet; og unders\u00f8ge materialets genanvendelighed, hvilket giver nye ideer til high-throughput screening af stofgrundlaget for rabarbers lipids\u00e6nkende effekt.<\/p>\n
Silikonegel gennemg\u00e5r tv\u00e6rbindings- og kondensationsreaktioner med APTES og glutaraldehyd og forbindes kovalent med cellemembranen for at fremstille L02-cellemembranens bioaffinitetsmateriale, der er modificeret med APTES som b\u00e6rer. Scanningselektronmikroskopi og infrar\u00f8d spektroskopi bekr\u00e6fter den vellykkede fremstilling. APTES-modificeret L02-cellemembran-bioaffinitetsmateriale blev brugt til at adsorbere 30% ethanolekstrakt af rabarber, og resultaterne viste, at 11 komponenter kunne bindes specifikt; Herunder 4 anthraquinonglykosider, 5 anthraquinonglykosider og 2 ukendte komponenter, blandt hvilke aloe emodin \ud83d\ude2f - \u03b2 - D-glucosid, rhein \ud83d\ude2f - \u03b2 - D-glucosid, emodin \ud83d\ude2f - \u03b2 - D-glucosid og ukendt komponent 1 er de vigtigste specifikke komponenter, der kan bruges som potentielle aktive ingredienser til verifikation af lipids\u00e6nkende aktivitet. P\u00e5 grund af de mange m\u00e5l p\u00e5 overfladen af cellemembraner er dette materiale imidlertid kun egnet til forel\u00f8big screening af lipids\u00e6nkende aktive ingredienser; Og i den senere fase skal LC-MS \/ MS bruges til forel\u00f8big strukturel identifikation af to ukendte komponenter. Sammenlignet med den fysiske adsorption af L02-cellemembranbioaffinitetsmaterialer introducerer dette materiale kemiske kovalente bindinger til en vis grad, hvilket undg\u00e5r frig\u00f8relse af cellemembranen og forl\u00e6nger brugstiderne. Det kan bruges til hurtig screening af aktive ingredienser i rabarber til s\u00e6nkning af blodlipider og kan ogs\u00e5 give reference til hurtig screening af andre aktive ingredienser til s\u00e6nkning af blodlipider.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Rapid screening of lipid-lowering active ingredients in rhubarb using chemically modified L02 liver cell membrane biocompatible materials The screening of active ingredients in traditional Chinese medicine mainly relies on activity tracking, with monomer components as the screening objects, which has the disadvantages of large workload, cumbersome operation, and low efficiency. Compared with traditional activity tracking […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n