Unders\u00f8gelse af den immunmodulerende effekt af saponiner fra Panax ginseng og Panax ginseng p\u00e5 RAW 264.7-celler in vitro
\nMakrofager, der er involveret i kroppens uspecifikke immunitet, er den f\u00f8rste forsvarslinje mod patogener. Aktiverede makrofager kan frigive forskellige inflammatoriske faktorer og cytokiner (s\u00e5som NO og TNF - \u03b1) for at deltage i kroppens immunrespons og regulere immunresponsen. Forskning har vist, at saponiner i traditionel kinesisk medicin kan aktivere makrofager, forbedre cellernes fagocytiske evne, fremme udskillelsen af relaterede aktive molekyler og opregulere udtrykket af relaterede proteiner. Radix Pseudostellaria fibroblast roots saponins (RPFRS) er en af de bioaktive komponenter, der er isoleret fra ginsengrodderne af Pseudostellaria heterophylla, og som har den virkning, at de forbedrer kroppens immunitet, antioxidation osv. I dag bruges hovedroden af Panax ginseng som medicin, mens rodsilken kasseres, hvilket medf\u00f8rer et stort spild. Forskning har vist, at det gennemsnitlige indhold af totale saponiner i rodsilken fra Panax ginseng er 1,14 gange s\u00e5 h\u00f8jt som i rodknolden. Forskergruppens forel\u00f8bige forskning har vist, at ekstraktet af Panax ginseng og Panax ginseng, der hovedsageligt best\u00e5r af saponiner, har en immunbeskyttende effekt p\u00e5 immunsupprimerede mus og kan forbedre deres immunfunktion. P\u00e5 nuv\u00e6rende tidspunkt er der kun f\u00e5 rapporter om immuneffekterne af RPFRS alene, og mononukle\u00e6re makrofager fra mus (RAW 264.7-celler) bruges ofte som en model til in vitro-immunaktivitetsunders\u00f8gelser. Derfor var dette eksperiment m\u00e5lrettet RAW 264.7-celler og unders\u00f8gte de immunmodulerende virkninger og mulige mekanismer af RPFRS in vitro ved at opdage immunologiske indikatorer s\u00e5som celleproliferation, fagocytisk aktivitet, relaterede cytokiner og mRNA-ekspression. Form\u00e5let med unders\u00f8gelsen er at berige det immunologiske indhold i RPFRS og skabe et teoretisk grundlag for udvikling og anvendelse af Panax ginseng.<\/p>\n
<\/p>\n
Effekten af RPFRS p\u00e5 spredningen af RAW 264.7-celler. Saponiner har visse h\u00e6molytiske og toksiske egenskaber og har lavere toksiske doser sammenlignet med andre planteekstrakter, s\u00e5 man skal v\u00e6re opm\u00e6rksom p\u00e5 doseringen, n\u00e5r man bruger dem. For at afg\u00f8re, om RPFRS har toksiske virkninger p\u00e5 RAW 264.7-celler og screene for den optimale koncentration af RPFRS til eksperimenter, blev MTT-metoden brugt til at bestemme effekten af forskellige koncentrationer af RPFRS p\u00e5 proliferationen af RAW 264.7-celler. Resultaterne af dette eksperiment viste, at RPFRS signifikant kunne fremme spredningen af RAW 264.7-celler i koncentrationsomr\u00e5det 12,5-800 \u03bc g\/mL (P<0,01) og viste et dosis-respons-forhold i koncentrationsomr\u00e5det 12,5-100 \u03bc g\/mL. Derfor blev koncentrationer p\u00e5 12,5-200 \u03bc g\/mL valgt til efterf\u00f8lgende eksperimenter.<\/p>\n
Effekten af RPFRS p\u00e5 den fagocytiske aktivitet af RAW 264.7-celler. Fagocytose er en af makrofagernes vigtigste funktioner. I uspecifik immunitet kan makrofager dr\u00e6be eller ford\u00f8je patogener i celler, d\u00f8de celler i kroppen og andre store partikelantigener gennem fagocytose. I specifik immunitet kan de spille en rolle i immunregulering og antigenpr\u00e6sentation. Der er forskningsrapporter om, at b\u00e5de Platycodon grandiflorus saponiner D og Magnolia grandiflorus saponiner kan forbedre fagocyteringsevnen hos musemakrofager. I overensstemmelse med tidligere unders\u00f8gelser viser resultaterne af dette eksperiment, at RPFRS kan \u00f8ge OD-v\u00e6rdien af RAW 264.7-cellers fagocytose af neutralt r\u00f8dt p\u00e5 en dosisafh\u00e6ngig m\u00e5de ved koncentrationer p\u00e5 12,5-200 \u03bc g\/mL (P<0,01), hvilket indikerer, at RPFRS kan forbedre den fagocytiske aktivitet af RAW 264.7-celler og forbedre deres immunfunktion.<\/p>\n
Effekten af RPFRS p\u00e5 udskillelsen af NO og iNOS mRNA-ekspression i RAW 264.7-celler. Makrofager kan eliminere patogener ved at udl\u00f8se immuninflammatoriske reaktioner og hj\u00e6lpe kroppen med at regulere specifikke immunresponser, mens NO syntetiseret af nitrogenoxidsyntase (iNOS) er t\u00e6t forbundet med dens inflammatoriske immunresponsfunktion. Yang et al. fandt, at proteinhydrolysatet af Panax ginseng kan f\u00e5 RAW 264-celler til at udskille NO og aktivere makrofager med TNF - \u03b1, hvilket forbedrer deres immunaktivitet. Resultaterne af dette eksperiment viste, at sammenlignet med den blanke kontrolgruppe kunne RPFRS \u00f8ge indholdet af NO i supernatanten af RAW 264.7-celler betydeligt (P<0.05), og samtidig blev udtrykket af iNOS i RAW 264.7-celler ogs\u00e5 \u00f8get betydeligt (P<0.01), som begge viste en dosisafh\u00e6ngig stigning. Dette resultat er i overensstemmelse med resultaterne fra Li et al. om, at astragalosid IV kan \u00f8ge udtrykket af NO og iNOS mRNA i supernatanten fra RAW 264.7-celler.
\nEffekten af RPFRS p\u00e5 cytokinudskillelse og mRNA-ekspression i RAW 264.7-celler. Cytokiner som IL-6, IL-10, IL-1 \u03b2 og TNF - \u03b1 spiller hovedsageligt en rolle i lokale og systemiske inflammatoriske reaktioner. IL-6 kan f\u00e5 B-lymfocytforstadier til at blive antistofudskillende celler. IL-10 kan som en antiinflammatorisk faktor h\u00e6mme makrofagaktivitet og inflammatoriske cytokiner som IL-6 og TNF - \u03b1. IL-1 \u03b2 kan fremme aktivering og degranulering af makrofager og neutrofiler samt udtrykket af andre inflammatoriske faktorer. TNF \u03b1 er det vigtigste pro-inflammatoriske cytokin, der produceres af makrofager som reaktion p\u00e5 forskellige stimuli, hvilket kan fremme udskillelsen af cytokiner som IL-6 og IL-8. Sun et al. fandt, at sojab\u00f8nnesaponin Ab kan \u00f8ge niveauerne af TNF - \u03b1 og IL-1 \u03b2 i supernatanten af RAW 264.7-celler. Li et al. fandt, at astragalosid IV kan \u00f8ge niveauerne og mRNA-ekspressionen af IL-6, IL-1 \u03b2 og TNF - \u03b1 i supernatanten fra RAW 264.7-celler. Resultaterne af denne unders\u00f8gelse viste, at sammenlignet med den blanke kontrolgruppe kunne RPFRS dosisafh\u00e6ngigt \u00f8ge niveauerne af IL-6, IL-10, IL-1 \u03b2 og TNF - \u03b1 i supernatanten af RAW 264.7-celler. RPFRS \u00f8gede ogs\u00e5 mRNA-ekspressionsniveauerne af IL-6, IL-10, IL-1 \u03b2 og TNF - \u03b1 i RAW 264.7-celler i varierende grad, hvilket indikerer, at RPFRS kan regulere deres immunfunktion ved at stimulere udskillelsen af cytokiner.
\nEffekten af RPFRS p\u00e5 udtrykket af NF-\u03ba B pathway-relaterede proteiner i RAW 264.7-celler. NF-\u03ba B kan som en nuklear transkriptionsfaktor aktivere udtrykket af forskellige gener relateret til tidlige forsvarsreaktioner og derved regulere fysiologiske processer som celleapoptose, immunrespons, inflammation og v\u00e6vsmodellering. Aktiveringen af NF - \u03ba B-signalvejen stimuleres af forskellige signalmolekyler. TLR2 og TLR4, som er medlemmer af m\u00f8nstergenkendelsesreceptorfamilien, er st\u00e6rkt udtrykt p\u00e5 overfladen af makrofager, B-celler og DC-celler og kan overv\u00e5ge og genkende sygdomsrelaterede molekyl\u00e6re m\u00f8nstre for at igangs\u00e6tte signaltransduktion i signalvejen. Sidstn\u00e6vnte kan ogs\u00e5 stimulere MyD88 til at udl\u00f8se en signalkaskade og fremkalde NF-\u03ba B-aktivering. MyD88 og TRIF binder sig til TLR-bindende proteiner i cytoplasmaet, aktiverer MAPK-vejen under p\u00e5virkning af ubiquitin, fremmer I \u03ba B - \u03b1-phosphorylering for at aktivere NF - \u03ba B-vejen og regulere downstream-genekspression. He et al. fandt, at efter intervention med forskellige doser af totale saponiner fra Platycodon grandiflorum faldt niveauerne af IL-6, IL-1 \u03b2 og TNF - \u03b1 i synovialv\u00e6vet i ankelleddet hos kollageninducerede arthritisrotter, mens niveauerne af TLR2, TLR4, MyD88 og andre proteiner faldt. Shin et al. fandt, at varmebehandlede ginsenosider Rg1 og Rg3 kan fremme udskillelsen af IL-6 og TNF - \u03b1 i RAW264.7-celler samt phosphorylering af MAPK og nedbrydning af I \u03ba B - \u03b1 for at aktivere NF - \u03ba B-signalvejen. Resultaterne af dette eksperiment viste, at under virkningen af RPFRS faldt mRNA-ekspressionen af TLR4 i RAW 264.7-celler faldt, mens mRNA-ekspressionen af MyD88 og NF - \u03ba B steg; I overensstemmelse med dette viste resultaterne af WB et fald i ekspressionen af TLR4, I \u03ba B \u03b1 og cytoplasmatiske NF - \u03ba B-proteiner, mens ekspressionen af TLR2, MyD88, TRIF og nukleare NF - \u03ba B-proteiner steg, hvilket indikerer translokationen af NF - \u03ba B fra cytoplasmaet til kernen. Efter aktivering af NF-\u03ba B-vejen kan den vende transkriptionsinduktionen medieret af proinflammatoriske cytokiner, hvilket svarer til resultaterne af cytokinindhold og mRNA-ekspression n\u00e6vnt ovenfor. Dette indikerer, at RPFRS kan aktivere RAW 264.7-celler gennem den TLR2- og TLR4-medierede TRIF\/MyD88-NF - \u03ba B-transduktionsvej.
\nRPFRS kan fremme spredning af RAW 246.7-celler, forbedre fagocytisk aktivitet, \u00f8ge indholdet og mRNA-ekspressionen af relaterede cytokiner, nedregulere mRNA-ekspressionen af TLR4, opregulere ekspressionen af TLR2, MyD88, TRIF og nukleart NF - \u03ba B-protein, nedregulere ekspressionen af TLR4, I \u03ba B - \u03b1 og cytoplasmatisk NF - \u03ba B-protein og vise en vis dosiseffekt. RPFRS kan ud\u00f8ve immunbeskyttelse ved at h\u00e6mme stimuleringen af TLR4 af LPS og kan ogs\u00e5 aktivere RAW 264.7-celler gennem TLR2\/4-MyD88\/TRIF-NF - \u03ba B-signalvejen, der deltager i immunresponsprocessen og ud\u00f8ver immunregulerende virkninger. Der er behov for yderligere forskning for at unders\u00f8ge forholdet mellem RPFRS og andre signalveje, der er involveret i immunregulering af RAW 264.7-celler, samt deres komponenter og immunaktivitet.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Study on the immunomodulatory effect of saponins from Panax ginseng and Panax ginseng on RAW 264.7 cells in vitro Macrophages involved in non-specific immunity of the body are the first line of defense against pathogens. Activated macrophages can release various inflammatory factors and cytokines (such as NO and TNF – \u03b1) to participate in the […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n