Samtidig bestemmelse af seks flavonoider i Wuyao-blade ved hj\u00e6lp af ultrah\u00f8jtydende v\u00e6skekromatografi-tandem-massespektrometri
\nLindera aggregata (Sims) Kosterm, en plante, der tilh\u00f8rer kamferfamilien og Piper-sl\u00e6gten, har antiinflammatoriske, smertestillende, antioxiderende og antitumorale virkninger. Den produceres hovedsageligt i Kinas syd\u00f8stlige kystprovinser, hvor Tiantai County i Zhejiang-provinsen er den mest ber\u00f8mte, og derfor kaldes den Tiantai Wuyao. I 2018 blev den udvalgt som en af de nye \"Zhejiang Eight Flavors\" i Zhejiang. Moderne farmakologisk forskning har vist, at sort medicin ogs\u00e5 har immunmodulerende virkninger p\u00e5 centralnervesystemet og det kardiovaskul\u00e6re system, hvilket g\u00f8r markedsudsigterne brede. De medicinske dele af Wuyao vokser dog langsomt og er ofte 8-10 \u00e5r om at opfylde kravene til behandling af medicinske urter af h\u00f8j kvalitet. I l\u00f8bet af v\u00e6kstcyklussen kasseres st\u00e6ngel- og bladdele ofte, hvilket resulterer i lav ressourceudnyttelse. I de folkelige omr\u00e5der i Zhejiang bruges Wuyao-blade ofte til at behandle akut cellulitis, reumatoid arthritis og andre bet\u00e6ndelser, og de laves ogs\u00e5 ofte til tedrikke for at s\u00e6nke fedtindholdet, beskytte leveren og have andre sundhedsm\u00e6ssige fordele. Tidligere unders\u00f8gelser har vist, at Wuyao-bladekstrakter har en vis lipids\u00e6nkende effekt. Forskerteamet gennemf\u00f8rte en farmakologisk korrelationsunders\u00f8gelse af Wuyao-bladekstrakter og fandt, at de har en bestemt virkningsmekanisme mod hyperlipid\u00e6mi og osteoporose. Samtidig blev der ogs\u00e5 udf\u00f8rt systematisk kemisk komponentseparation og ekstraktion af Wuyao-blade i den tidlige fase. Seks flavonoider blev isoleret for f\u00f8rste gang fra ethanolekstraktet af Wuyao-blade, som blev identificeret som: kaempferol-3-O - \u03b1 - L-rhamnoside (1), quercetin (2), kaempferol-3-O - \u03b2 - D-xyloside (3), kaempferol-3-O - \u03b1 - L-arabinofuranoside (4), kaempferol-3-O - (2 \u2033 -3-O-trans-3-O-p-3-O-coumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnoside (5), kaempferol-3-O - (2 \u2033, 4 \u2033 -3-O-di-3-3-O-3-3-O-di-3-glukosid) O-trans-3-O-p-3-O-coumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnosid (6), kemisk struktur vist i figur 1.<\/p>\n
P\u00e5 nuv\u00e6rende tidspunkt findes der relevante forskningsrapporter om kvalitetsevaluering af Wuyao-blade. Yi et al. brugte HPLC til at bestemme indholdet af fire flavonoider i Wuyao-blade fra forskellige oprindelser i Hunan-provinsen. Sun et al. brugte UV-spektrofotometri til at bestemme det samlede flavonoidindhold i Wuyao-bladekstrakter og unders\u00f8gte de relevante faktorer for udvinding af samlede flavonoider for at optimere udvindingsprocessen. Samtidig brugte Sun et al. HPLC til at bestemme indholdet af fire sesquiterpenoidlaktoner i Wuyao-blade fra forskellige oprindelser. Dette er dog traditionelle detektionsmetoder, som mangler h\u00f8j effektivitet og n\u00f8jagtighed i indholdsbestemmelsen. Med udviklingen af massespektrometri-teknologien er der blevet udviklet ultrah\u00f8jtydende v\u00e6skekromatografi-tandem-massespektrometri-teknologi med h\u00f8j effektivitet, h\u00f8j specificitet og h\u00f8j f\u00f8lsomhed. Kromatografi-tandem-massespektrometri (UPLC-MS\/MS) er blevet en vigtig analysemetode til at p\u00e5vise kvaliteten af traditionelle kinesiske medicinske materialer. Derfor vil denne unders\u00f8gelse bruge UPLC-MS\/MS-teknologi til kvantitativt at unders\u00f8ge de seks vigtigste flavonoider i Wuyao-blade fra forskellige oprindelser og kombinere entropiv\u00e6gten - \u03b1 - L-approximate ideal solution ranking method (TOPSIS) til analyse og evaluering for at tilvejebringe et videnskabeligt grundlag for den interne kvalitetskontrol af Wuyao-blade.<\/p>\n
<\/p>\n
Valg af ekstraktionsbetingelser. I denne unders\u00f8gelse blev UPLC-MS\/MS-metoden brugt til samtidig at bestemme indholdet af seks indikatorforbindelser, nemlig kaempferol-3-O - \u03b1 - L-rhamnosid (1), quercetin (2), kaempferol-3-O - \u03b2 - D-xyloside (3), kaempferol-3-O - \u03b1 - L-arabinofuranosid (4), kaempferol-3-O - (2\"- trans - p-coumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnosid (5) og kaempferol-3-O - (2\", 4\"- di trans - p-coumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnosid (6), i Wuyao-blade inden for 10 minutter. Methanolkoncentrationerne var henholdsvis 30%, 50% og 70%. Baseret p\u00e5 analysen af spektret blev 70%-methanol valgt for at opn\u00e5 den bedste ekstraktionseffekt. Samtidig blev der foretaget en sammenligning mellem opvarmning af tilbagesvaling og ultralydsekstraktionsmetoder. Baseret p\u00e5 indholdsresultaterne var de opn\u00e5ede ekstraktionshastigheder sammenlignelige. I betragtning af tid og forbrugsomkostninger blev ultralydsekstraktion vedtaget.
\nBetingelser for kromatografi og massespektrometri. Dette studie unders\u00f8gte tre mobilfasesystemer: acetonitrilvand, acetonitril-0,1% myresyrevand og acetonitril-0,1% ammoniumformiatvand. Peakomr\u00e5det og peakformen for seks flavonoider blev brugt som evalueringsindikatorer til at bestemme det passende mobilfasesystem. Det blev konstateret, at n\u00e5r acetonitrilvand blev valgt som den mobile fase, var der et tailing-f\u00e6nomen i forbindelserne af kaempferol-3-O - (2 \"- trans-pcoumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnosid og kaempferol-3-O - (2\", 4 \"- di-trans-pcoumaroyl) - \u03b1 - L-rhamnosid; N\u00e5r acetonitril 0.1% ammoniumformiatvand v\u00e6lges som den mobile fase, udviser quercetin 3-O - \u03b1 - L-arabinofuranosid let tailing; N\u00e5r acetonitril 0,1% myresyrevand blev valgt som den mobile fase, var topformerne for alle seks forbindelser relativt symmetriske. Derfor blev acetonitril 0,1% myresyrevand valgt som mobilfasesystem. Ved valg af massespektrometribetingelser anvendte unders\u00f8gelsen positive og negative iontilstande til at bestemme indholdet af seks m\u00e5lforbindelser. For at sikre, at m\u00e5lforbindelserne har bedre stabilitet, h\u00f8jere responsv\u00e6rdier og bedre topformer, har flere gentagne eksperimenter vist, at brug af negativ ionscanningstilstand til detektion kan g\u00f8re de seks flavonoidforbindelser mere stabile med bedre topformer og responsv\u00e6rdier under detektionsbetingelserne. Samtidig var retentionstiderne for flavonoiderne 2 og 5, der blev ekstraheret fra ionkromatogrammet i figur 2, stort set de samme under unders\u00f8gelsen af kromatografi- og massespektrometribetingelserne. Sammenlignet med traditionelle HPLC-analyseteknikker er kromatografi-massespektrometri baseret p\u00e5 masse-til-ladningsforholdsanalyse ikke afh\u00e6ngig af top-til-top-separation og har kort signalopsamlingstid og h\u00f8j f\u00f8lsomhed. I denne unders\u00f8gelse blev UPLC-MS\/MS-analyseteknologi derfor brugt til samtidig at bestemme seks flavonoider i Wuyao-blade, hvilket har flere fordele.
\nAnalyse af resultater. Denne unders\u00f8gelse indsamlede medicinske pr\u00f8ver fra 10 Wuyao-produktionsomr\u00e5der i Kina og brugte UPLC-MS\/MS-teknologi til samtidig at bestemme indholdet af seks kemiske komponenter i Wuyao-blade. TOPSIS-metoden med entropiv\u00e6gt blev brugt til omfattende at analysere og evaluere de seks forbindelser fra de 10 produktionsomr\u00e5der. Den omfattende rangordning var som f\u00f8lger: Tiantai, Zhejiang>Jinhua, Zhejiang>Changsha, Hunan>Ningde, Fujian>Kunming, Yunnan>Tonglu, Zhejiang>Guilin, Guangxi>Yingtan, Jiangxi. Resultaterne viste, at den omfattende kvalitet af Wuyao-blade i Tiantai, Zhejiang var relativt h\u00f8j, hvilket er relateret til den traditionelle tro p\u00e5, at Tiantai, Zhejiang er et \u00e6gte produktionsomr\u00e5de for Wuyao-medicinske materialer. Samtidig bekr\u00e6fter det ogs\u00e5 optegnelsen i Compendium of Materia Medica, at for Wuyao er Tiantai vinderen; Dictionary of Traditional Chinese Medicine registrerer, at produktionen af Wuyao er den st\u00f8rste i Zhejiang, og kvaliteten af de produkter, der produceres i Tiantai, Zhejiang, er den bedste, og derfor kaldes den \"Tiantai Wuyao\" eller \"Tai Wuyao\". Samtidig afspejler evalueringsresultaterne ogs\u00e5, at der er betydelige forskelle i indholdet af de seks vigtigste flavonoider i Wuyao-blade fra forskellige oprindelser, og der er ogs\u00e5 betydelige forskelle i Wuyao-blade fra forskellige byer i den samme provins. Dette kan v\u00e6re relateret til kilderne til Wuyao-introduktion i forskellige plantebaser og forskellige \u00f8kologiske milj\u00f8er.
\nP\u00e5 nuv\u00e6rende tidspunkt er Wuyao Ye blevet godkendt som en ny ressourcef\u00f8devare, s\u00e5 dens produktudvikling vil fortsat blive udforsket. Denne unders\u00f8gelse har etableret en metode, der er nem at betjene, har god pr\u00e6cision, stabilitet og repeterbarhed, og som samtidig kan bestemme indholdet af seks flavonoider i Wuyao Ye. Den kan bruges til kvantitativ analyse og omfattende evaluering af de vigtigste flavonoider i Wuyao Ye, og den anvendte TOPSIS-metode med entropiv\u00e6gt giver ogs\u00e5 et teoretisk grundlag for at evaluere kvaliteten af andre l\u00e6geurter med medicinsk v\u00e6rdi.<\/p>","protected":false},"excerpt":{"rendered":"
Simultaneous determination of six flavonoids in Wuyao leaves by ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry Lindera aggregata (Sims) Kosterm, a plant belonging to the Camphor family and the Piper genus, has anti-inflammatory, analgesic, antioxidant, and anti-tumor effects. It is mainly produced in southeastern coastal provinces of China, with Tiantai County in Zhejiang Province being […]<\/p>","protected":false},"author":1,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"open","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[20],"tags":[],"yoast_head":"\n