Optimering af ekstraktions- og oprensningsprocessen af totale flavonoider fra saflorblade og undersøgelse af deres aktivitet mod akut leverskade
Den tørrede blomst af Asteraceae-planten Carthamus tinctorius L. er en værdifuld traditionel kinesisk lægeurt og en af de mest anvendte lægeurter i mongolsk medicinsk klinisk praksis. Denne medicin er kølig af natur, lidt bitter i smagen og har en nærende effekt på hjerte- og levermeridianerne. Det er et godt lægemiddel til at fremme blodcirkulationen, fjerne blodstasis og lindre smerter. Traditionelt har brugen af og forskningen i saflorplanten kun fokuseret på dens medicinske blomster. Men blomsterudbyttet er meget lavt, hvilket betyder, at en stor del af de blade, der produceres efter høst af de medicinske dele - "blomsterne" - bliver kasseret, hvilket resulterer i ressourcespild. Forskere har undersøgt den kemiske sammensætning af de overjordiske dele af saflor, men de fleste af dem fokuserer på alkaloider og terpener. Der er dog relativt lidt forskning i dens flavonoider, som har farmakologiske aktiviteter som antioxidant, antiviral, hepatobeskyttende, anticancer og antiinflammatorisk. Planteafledte flavonoider har også naturlige egenskaber med lav toksicitet og har brede perspektiver i udviklingen af effektiv og sikker naturmedicin, hudplejeprodukter og sundhedsprodukter. På nuværende tidspunkt er der ingen forskning i ekstraktions- og oprensningsprocessen og den biologiske aktivitet af flavonoider fra saflorblade. Relaterede undersøgelser har vist, at alkoholekstraktet af saflorstængler har en betydelig anti CCI4-induceret akut leverskadeeffekt. Derfor er det værd at undersøge, om ekstrakt af saflorblade også har leverbeskyttende virkninger. Derfor optimerede dette eksperiment ud fra perspektivet om fuldt ud at udnytte de ikke-medicinske ressourcer af saflor ekstraktions- og oprensningsprocessen for at opnå samlede flavonoider fra Carthamus blade tinctorius L. blad, TFCTLL) ， Og yderligere undersøge dens hepatobeskyttende virkning, hvilket giver dataunderstøttelse til fuld udnyttelse af ikke-medicinske dele ressourcer af saflor og dens farmakologiske aktivitetsforskning.

 

Denne undersøgelse brugte safloraffald saflorblade som eksperimentelle materialer for første gang og ekstraherede totale flavonoider fra saflorblade ved hjælp af opvarmningsrefluksmetode. Baseret på enkeltfaktoreksperimenter blev en Box Behnken-responsoverfladetest designet til at optimere den optimale ekstraktionsproces for totale flavonoider fra saflorblade. Forholdet mellem fast stof og væske blev bestemt til at være 1:27, ethanolkoncentrationen var 80%, og ekstraktionstiden var 65 minutter. Den faktiske ekstraktionshastighed var 4,921%, hvilket var 0,014% lavere end den teoretiske værdi. Statistisk analyse blev udført på enkeltfaktor- og responsoverfladeresultater, og det blev konstateret, at der ikke var nogen signifikant forskel mellem de to (P>0,05). Denne model forudsiger godt og stabilt og kan bruges til at udvinde totale flavonoider fra saflorblade. På grund af den lave ekstraktionshastighed af råekstraktet, der indeholder totale flavonoider fra saflorblade, opnået gennem den optimale ekstraktionsproces, kræves yderligere berigelse og oprensning af råekstraktet til efterfølgende aktivitetsundersøgelser.

Makroporøs harpiks er blevet brugt i vid udstrækning til adskillelse og rensning af naturlige produkter i de senere år, især til berigelse af flavonoider. På grund af sin enkle betjening, ingen forurening, lave energiforbrug og gode adskillelseseffekt er den blevet brugt i vid udstrækning i rensningsforskningen af flavonoider. De fleste flavonoider er svagt polære, så svagt polære og upolære harpikser har bedre oprensningseffekter på flavonoider. Hou et al. undersøgte berigelsen og oprensningen af totale flavonoider i Artemisia annua ved hjælp af makroporøs adsorptionsharpiks. Der blev udført statiske adsorptionseksperimenter for at undersøge adsorptions- og desorptionsevnen for NKA-9, GPD100, HPD400, HPD600, AB-8, D101, X-5 og GM301 makroporøse adsorptionsharpikser for totale flavonoider. Resultaterne viste, at AB-8 makroporøs adsorptionsharpiks havde den bedste adsorptions- og desorptionsevne. Relateret litteratur har også rapporteret om fire typer makroporøse adsorptionsharpikser, HPD-100, HPD-600, D101 og HP-20, som har betydelige fordele ved adsorption og opløsning af flavonoider sammenlignet med andre typer harpikser. Derfor blev der i dette forsøg valgt fem typer makroporøse adsorptionsharpikser, der er egnede til berigelse af totale flavonoider, AB-8, HPD-100, HPD-600, D101 og HP-20, til oprensning af TFCTLL. Efter at have opnået den optimale oprensningsproces blev ekstraktet af saflorblade ekstraheret under den optimale proces adsorberet på en forbehandlet makroporøs harpikskromatografikolonne AB-8 og elueret med 95% ethanol. Den samlede flavonoidrenhed nåede 61,42%, og eluenten blev opsamlet og koncentreret til et tørt ekstrakt. Giver et fundament for efterfølgende aktivitetsforskning.

Relaterede undersøgelser har vist, at alkoholekstrakter fra saflorstængler har betydelige virkninger mod CCI4-induceret akut leverskade. Har ekstrakt af saflorblade også leverbeskyttende virkninger? Denne undersøgelse identificerede fire flavonoider i TFCTLL, herunder verbascosid, quercetin-7-O - β - D-glucosid, verbascosid og vitexin. De relevante forskningsresultater har vist, at det har specifikke antiinflammatoriske, antioxidante og anti-fibrotiske virkninger, som kan reducere serum ALT- og AST-aktivitet, hæmme niveauerne af inflammatoriske faktorer som TNF - α og IL-1 β, hæmmer aktiveringen af antioxidantenzymer og NF - κ B pathway og lindrer leverskader ved at regulere lipidmetabolisme, antioxidant, antiinflammatorisk, reducere jernaflejring, regulere tumorcelleproliferation, anti-apoptose, fremme autofagi og andre veje. Det bruges ofte til at behandle akut leverskade og relaterede sygdomme.

Akut leverskade er en pludselig unormal leverfunktionssygdom forårsaget af forskellige årsager på kort sigt. Den kliniske prognose er dårlig, og hvis der ikke gribes aktivt ind og behandles, kan den videreudvikle sig til skrumpelever og leverkræft, hvilket truer menneskers liv og helbred. Der er forskellige faktorer, der kan forårsage leverskade, herunder kemisk leverskade, bakteriel og viral induceret biologisk leverskade. CCI4 er det mest anvendte hepatotoksin i dyreforsøg til at fremkalde kemisk leverskade, og en enkelt dosis CCI4 kan fremkalde levercelleskade af typen ALI. Det kan forårsage skade på levercellernes struktur og funktion, hvilket fører til overløb af intracellulær ALT og AST i blodbanen, hvilket resulterer i en stigning i ALT- og AST-aktivitet i blodet, som er positivt korreleret med graden af leverskade. Derfor bruges ALT- og AST-aktivitet ofte som indikatorer til at evaluere graden af leverskade. Resultaterne af dyreforsøget i denne undersøgelse viste, at efter intraperitoneal injektion af CCI4 steg aktiviteterne af ALT, AST og TBA i serum markant, og der opstod læsioner i levervævet, hvilket tyder på en vellykket etablering af en musemodel med CCI4-induceret akut leverskade. Efter behandling med TFCTLL blev aktiviteterne af ALT, AST og TBA i museserum reduceret betydeligt, og graden af levervævsskader blev lindret, hvilket indikerer, at TFCTLL har en beskyttende virkning på CCI4-induceret akut leverskade hos mus.

Denne undersøgelse tager udgangspunkt i saflorens medicinske ressourcer, omdanner traditionelt ikke-medicinsk affald og biprodukter til ressourcebaserede lægemidler, udnytter saflorens medicinske materialer fuldt ud og undersøger saflorbladenes hepatobeskyttende virkninger. Resultaterne viser, at TFCTLL opnået efter ekstraktion og rensning har en effekt på mus med akut leverskade. Denne undersøgelse kan fungere som reference for den efterfølgende udvikling og anvendelse af TFCTLL og er også af stor betydning for den værdifulde udnyttelse af saflorressourcer.