Sammenlignende undersøgelse af kvaliteten af Paeonia lactiflora og dens forarbejdede produkter ved hjælp af HPLC's karakteristiske spektrum kombineret med indholdsbestemmelse
Hvid pæon er den tørre rod af Paeonia lactiflora Pall, en plante i Ranunculaceae-familien. Den er bitter, sur og lidt kold af natur. Den vender tilbage til lever- og miltmeridianerne. Den nærer blodet og regulerer meridianerne, tonificerer yin og stopper sveden, blødgør leveren og lindrer smerter og beroliger leverens yang. Anvendes mod blodmangel og gulfarvning, menstruationsforstyrrelser, spontan svedtendens, nattesved, smerter i ribbenene, mavesmerter, spasmer i lemmerne, hovedpine og svimmelhed. Den vigtigste aktive ingrediens i Paeonia lactiflora er totale glukosider af Paeonia lactiflora (TGP). TGP er en blanding af paeoniflorin, paeoniflorin, benzoylpaeoniflorin og andre ingredienser, som har antiinflammatoriske, immunregulerende og hepatobeskyttende virkninger. Stegt hvid pæon og hvid pæon i vin er begge forarbejdede produkter af hvid pæon. Moderne farmakologisk forskning har vist, at de farmakologiske virkninger af forarbejdet hvid pæon generelt er forbedret, og den smertestillende virkning af forarbejdede produkter er mere signifikant end for rå produkter, hvilket fuldt ud demonstrerer betydningen af forarbejdning af hvid pæon. De nationale standarder for behandling af kinesisk medicin indeholder behandlingsmetoderne for hvid pæon i vin, omrørt hvid pæon og omrørt hvid pæon i jord; "Jingyue Quanshu" og Jiao Shudes "Ten Lectures on Medication Experience" registrerer begge brugen af omrørt hvid pæon. Efter stegning af hvid pæon lindres dens kølende egenskaber, og den har den virkning, at den nærer blod og kollateraler, lindrer miltsmerter og kan bruges til at behandle diarré og mavesmerter forårsaget af miltmangel eller lever-milt-disharmoni. Bogen "Bian Que Xin Shu" var banebrydende for metoden med at "stege hvid pæon i vin", mens "Tang Ye Ben Cao" fortæller, at iblødsætning af hvid pæonvin i meridianen kan lindre centrale mavesmerter; The Compendium of Materia Medica siger, at "de, der undgår forkølelse, bør stege med vin" og "stege med vin for at give næring til yin". Efter omrøring med hvid pæonvin kan dens sure og kolde natur reduceres, og den er god til at harmonisere det midterste, langsomme og presserende. Den bruges ofte til smerter i ribbenene, mavesmerter, især mavesmerter efter fødslen.
Svovlgasning er en almindeligt anvendt metode til at forhindre insektangreb, skimmelvækst og forlænge opbevaringstiden for traditionelle kinesiske medicinske materialer. Svovlgasning kan dog forårsage for store SO2-rester i nogle traditionelle kinesiske lægemidler, hvilket resulterer i ændringer i de effektive ingredienser og deres indhold, reducerer deres effektivitet og endda gør dem til "gift", hvilket i alvorlig grad påvirker kvaliteten og sikkerheden af traditionelle kinesiske lægemidler. Moderne forarbejdningsstudier af Paeonia lactiflora har vist, at svovlgasning kan føre til et fald i indholdet af paeoniflorin i Paeonia lactiflora. Det spekuleres i, at svovlgasning kan omdanne noget paeoniflorin til en ny komponent, paeoniflorinsulfit, og derved reducere indholdet af paeoniflorin.
På grundlag af 2020-udgaven af den kinesiske farmakopéstandard for Paeonia lactiflora-lægemidler og forarbejdede produkter etablerede denne undersøgelse karakteristiske spektre af Paeonia lactiflora, Paeonia lactiflora-vin, Paeonia lactiflora stir fried og Paeonia lactiflora-svovl røget ved hjælp af HPLC højtydende væskekromatografi og identificerede seks aktive ingredienser: gallussyre, catechiner, paeoniflorin, paeoniflorin, 1,2,3,4,6-pentagalloylglukose og benzoylpaeoniflorin; samtidig måle indholdet af de seks aktive ingredienser nævnt ovenfor i hvid pæon, vin hvid pæon, omrørt stegt hvid pæon og svovlrøget hvid pæon og evaluere kvaliteten af hvid pæon, forarbejdede produkter og svovlrøgede produkter ved hjælp af lighedsberegning af karakteristiske spektre og kemometriske analysemetoder. Dette giver en reference til identifikation og kvalitetsevaluering af hvid pæon, forarbejdede produkter og svovlrøgede produkter.
Forberedelse af testopløsning. Dette studie undersøgte ekstraktionseffektiviteten af forskellige koncentrationer af methanol og ethanol gennem enkeltfaktoranalyse. Den kromatografiske top "samlet topareal/prøvestørrelse" blev brugt som evalueringsindeks for det karakteristiske spektrum, og det samlede indhold af gallussyre, catechiner, paeoniflorin, paeoniflorin, 1,2,3,4,6-pentagalloylglukose og benzoylpaeoniflorin blev brugt som indholdsbestemmelsesindeks. Endelig blev fortyndet ethanol bestemt som ekstraktionsopløsningsmiddel; En sammenlignende undersøgelse blev udført på to ekstraktionsmetoder, opvarmning af tilbagesvaling og ultralydsbehandling, og det blev konstateret, at forskellige ekstraktionsmetoder havde ringe effekt på ekstraktionseffektiviteten af Paeonia lactiflora. Derfor blev ultralydsbehandling valgt i betragtning af den enkle drift; Samtidig blev ultralydsbehandlingstiden (15, 30, 45 minutter) af prøverne undersøgt, og det blev konstateret, at 30 minutters ultralydsbehandling helt kunne udtrække forskellige komponenter. Baseret på ovenstående undersøgelse blev det fastslået, at den bedste forberedelsesmetode til den hvide pæon-testopløsning var at behandle 50 ml fortyndet ethanol med ultralydsbehandling (effekt 250W, frekvens 40kHz) i 30 minutter.
Etablering og analyse af funktionskort. Forskningsresultaterne af karakteristiske spektre viser, at der er 6 almindelige toppe i de HPLC-karakteristiske spektre af hvid pæon, stegt hvid pæon og vinhvid pæon og 7 almindelige toppe i de HPLC-karakteristiske spektre af svovlrøget hvid pæon. På grund af brugen af Agilent-, Waters- og Thermo-instrumenter fra forskellige producenter til prøvedetektion for at forkorte arbejdstiden og forbedre arbejdseffektiviteten, selv om den samme kromatografiske søjle bruges, kan retentionstiden for kromatografiske toppe i det karakteristiske spektrum variere på grund af forskelle i maskinens dødvolumen blandt forskellige producenter. Hvis top 4 tages som S-toppen, og den relative retentionstid beregnes, vil den relative retentionstid for hver karakteristisk top være relativt stabil. Peak 7 genereres efter svovlgasning af Paeonia lactiflora, som formodes at være paeoniflorinsulfit. Seks karakteristiske komponenter i Paeonia lactiflora, stegt Paeonia lactiflora og vin-Paeonia lactiflora blev identificeret ved hjælp af referencestandarder, nemlig gallussyre, catechiner, paeoniflorin, paeoniflorin, 1,2,3,4,6-pentagalloylglukose og benzoylpaeoniflorin. OPLS-DA-analyse identificerede tre differentierede biomarkører, der indikerede signifikante ændringer i peak 7, peak 4 (paeoniflorin) og peak 5 (1,2,3,4,6-pentagalloylglukose) efter forarbejdning og svovlgasning af Paeonia lactiflora.
Ændringer i den kemiske sammensætning af Paeonia lactiflora efter stegning under omrøring, ristning i vin og gasning med svovl. Resultaterne af indholdsbestemmelsen af seks kendte komponenter i hvid pæon, stegt hvid pæon, hvid pæon i vin og svovlrøget hvid pæon viste, at bortset fra gallussyre havde de andre fem komponenter varierende grader af ændringer. Efter stegning og vinrøgning faldt indholdet af paeoniflorin i hvid pæon, mens paeoniflorinlakton og benzoylpaeoniflorin begge steg. Dette kan skyldes omdannelsen af paeoniflorin til paeoniflorinlacton og benzoylpaeoniflorin under behandlingen af hvid pæon; Efter svovlgasning faldt indholdet af paeoniflorin, hvilket formodes at være forårsaget af omdannelsen af hvid pæon til paeoniflorinsulfit efter svovlgasning. Catechiner er ustabile, når de udsættes for varme. Derfor reducerede stege- og vinristningsprocesserne catechinindholdet i hvid pæon betydeligt, mens svovlgasningsprocessen ikke viste væsentlige ændringer i catechinindholdet på grund af manglen på åbenlys varmeeksponering. Derudover steg indholdet af 1,2,3,4,6-pentagalloylglukose markant efter vinristning og svovlgasning, hvilket antages at skyldes den katalytiske effekt af varme og nogle kemiske komponenter i hjælpematerialerne under behandlingen af Paeonia lactiflora, som fremmer omdannelsen af 1,2,3,4,6-pentagalloylglukose. Den specifikke mekanisme kræver yderligere forskning.
Ifølge teorien om traditionel kinesisk medicin bør der være forskelle i den kliniske anvendelse af forskellige forarbejdede produkter af traditionel kinesisk medicin, som er relateret til forskellene i deres interne kemiske sammensætning. Paeonia lactiflora giver næring til blodet, nærer yin, beskytter leveren og lindrer spasmer. Efter stegning under omrøring mindskes dens kølende egenskaber, og dens milt- og smertelindrende effekt øges. Efter ristning i alkohol reduceres de sure og kolde egenskaber, og de moderate og akutte virkninger forstærkes. Dette kan være relateret til faldet i indholdet af paeoniflorin i Paeonia lactiflora, stigningen i indholdet af glycosidlaktoner og benzoylpaeoniflorin. Selvom svovlgasning af Paeonia lactiflora kan forhindre insekter, forhindre skimmel og råd, fører overdreven svovlgasning til et betydeligt fald i indholdet af paeoniflorin, hvilket kan skyldes omdannelse af noget paeoniflorin til paeoniflorinsulfit, hvilket alvorligt påvirker de medicinske materialer. Kvaliteten af afkogsstykkerne bør kontrolleres nøje, og derfor bør svovlgasningsprocessen kontrolleres nøje. På et senere tidspunkt vil der blive foretaget yderligere undersøgelser af svovlgasningsprocessen for Paeonia lactiflora for at udforske virkningerne af forskellige grader af svovlgasning på de effektive komponenter i Paeonia lactiflora og bestemme den optimale svovlgasningsproces.