Effektiv adskillelse og oprensning af nyt fibrinolytisk enzym fra frugtlegemet af fløjlshornssvamp
Tromboemboliske sygdomme har en høj invaliditets- og dødelighedsprocent. Fibrin er hovedkomponenten i blodpropper, og derfor er fremme af fibrinnedbrydning et almindeligt middel til at forebygge og behandle trombotiske sygdomme. Eksogene fibrinolytiske enzymer, såsom urokinase (UK) og streptokinase (SK), anvendes i vid udstrækning til klinisk behandling af tromboemboliske sygdomme på grund af deres evne til indirekte eller direkte at hydrolysere fibrin. Selvom de har en betydelig trombolytisk effekt, har de også visse anvendelsesbegrænsninger såsom kort halveringstid og betydelige bivirkninger. Derfor er søgningen efter nye fibrinolytiske enzymer med stærk specificitet, god sikkerhed og lave bivirkninger blevet et aktuelt forsknings-hotspot.

Spiselige svampe er rige på proteiner, polysaccharider, terpener, aminosyrer, steroler, nukleosider og andre stoffer, som har forskellige fysiologiske funktioner som antioxidant, antitumor, immunregulering og neural regulering. På nuværende tidspunkt har forskningen i fibrinolytiske enzymer fra spiselige svampe og deres funktionelle egenskaber fået stor opmærksomhed. Det er blevet rapporteret, at fibrinolytiske enzymer er blevet isoleret og udvundet fra forskellige spiselige svampe, såsom Lentinus edodes, Cordyceps Militaris, Agrocybe aegerita, Tricholoma sejunctum, Lepista nuda, Pleurotus ferulae osv.

Hjortetakssvamp er en spiselig og medicinsk svamp, der er vidt udbredt i tempererede områder på den nordlige halvkugle. Den har fysiologiske funktioner som antioxidant, immunforstærkning, tumorundertrykkelse og blodlipidsænkning. I de indledende eksperimenter blev det konstateret, at ekstraktet af fløjlsgevirsvampens frugtlegeme indeholdt plasmin med høj aktivitet, hvilket var betydeligt højere end den rapporterede plasmin fra andre spiselige svampekilder. Denne artikel introducerer separations- og oprensningsmetoden for det fibrinolytiske enzym i frugtlegemet af fløjlsgevirsvamp og identificerer foreløbigt enzymet. På nuværende tidspunkt har vores forskningsgruppe ikke set andre rapporter relateret til fibrinolytisk enzym i fløjlsgevirsvamp. Denne undersøgelse kan danne grundlag for at udføre trombolytiske og antitrombotiske funktionelle tests af fibrinolytisk enzym i fløjlsgevirsvamp og også lægge et teoretisk fundament for dets anvendelse i udviklingen af funktionelle fødevarer.

I denne undersøgelse blev et fibrinolytisk enzym isoleret og oprenset fra frugtlegemet af fløjlsgevirsvamp ved hjælp af moderne kromatografisk separationsteknologi. Den N-terminale tolv aminosyresekvens af det fibrinolytiske enzym er Gly Ala Val Thr Gln Asn Ala Pro Trp Gly Leu. Efter sammenligning med NCBI-databasen blev det fibrinolytiske enzym identificeret som et nyt fibrinolytisk enzym. Den specifikke aktivitet af det fibrinolytiske enzym er 4105,78U/mg, oprensningsfaktoren er 206,09, og aktivitetsgenvindingsgraden er 30,91%. Ved hjælp af Native PAGE-elektroforese og SDS-PAGE-elektroforese blev det konstateret, at den relative molekylvægt af det fibrinolytiske enzym var 30,9 kDa. Ovenstående resultater indikerer, at det nye fibrinolytiske enzym, der stammer fra frugtlegemet af fløjlsgevirsvampe, har et godt trombolytisk potentiale og kan bruges til udvikling af funktionelle fødevarer til at reducere trombofili-tendensen.