Undersøgelse af nøglekomponenterne i de samlede flavonoider fra Angelica sinensis i antireumatoid arthritis baseret på spektrale effektforhold og komponent-knockout
Lamiophlomis Herba (LH), en traditionel kinesisk medicin, er den tørrede overjordiske del af Lamiophlomis rotata (Benth.) Kudo, en plante i familien Lamiaceae. Det er en lægeurt, der ofte bruges af tibetanere, og som også ofte bruges som traditionel kinesisk medicin. I 2020-udgaven af Pharmacopoeia of the People's Republic of China står der, at den fremmer blodcirkulationen, stopper blødninger, fordriver vind og lindrer smerter. Den kan bruges til at behandle skader forårsaget af fald, gigt og gul vandsygdom. Dens tibetanske medicinnavne er "Daba" og "Dabuba", som er blevet registreret i tibetanske medicinske værker som "Yue Wang Yao Jian", "Four Medical Classics", "Jing Zhu Ben Cao" osv. Den har hidtil været anvendt i 1200 år; i "Jingzhu Bencao" står der, at "Du Yi Wei størkner essensen og afleder gult vand", hvilket indikerer, at Du Yi Wei kan bruges til behandling af "gult vand-sygdom". Ifølge de kliniske manifestationer kan den "sygdom med gult vand", der er registreret i tibetansk medicin, klassificeres som "bi-syndrom" i traditionel kinesisk medicin. "Knogle-bi" og "li jie-sygdommen", der er udviklet fra "bi-syndromet", er tættere forbundet med de kliniske egenskaber ved "rheumatoid arthritis (RA)" i moderne medicin. Derfor har Du Yi Wei potentiale til at behandle RA, og eksisterende forskning har også vist, at Du Yi Wei har anti-RA-effekter.
RA er en autoimmun sygdom, der er karakteriseret ved kroniske og multiple ledbetændelser. Dens patologiske træk omfatter tumorlignende proliferation af synovialceller og dannelse af vaskulære opaciteter, hvor fibroblastlignende synoviocytter (FLS) er de vigtigste effektorceller. På nuværende tidspunkt er patogenesen af RA stadig uklar. Dens forekomst og invaliditetsgrad er høj, og den er normalt latent. Den sene fase af sygdommen kan føre til forskellige grader af irreversibel invaliditet, som er en moderne ildfast sygdom, der er specificeret af Verdenssundhedsorganisationen. De almindeligt anvendte kemiske lægemidler til behandling af RA i klinisk praksis omfatter ikke-steroide antiinflammatoriske lægemidler, immunosuppressiva, glukokortikoider og biologiske lægemidler. De første tre kemiske lægemidler har betydelige bivirkninger, mens den dyre pris på biologiske lægemidler begrænser deres langsigtede anvendelse. Derfor er det særligt nødvendigt at udvikle nye kliniske lægemidler mod leddegigt med lave bivirkninger og stabile terapeutiske effekter.
Forskergruppen brugte for første gang netværksfarmakologi til at udforske det farmakologiske stofgrundlag og Du Yi Weis virkningsmekanisme i behandlingen af leddegigt. Det blev fundet, at den terapeutiske virkning af Du Yi Wei på RA er relateret til dets 23 komponenter, blandt hvilke flavonoider tegner sig for næsten 40%, hvilket indikerer, at flavonoider spiller en vigtig rolle i Du Yi Weis anti RA-proces, især luteolin; Og det foreslås, at den vigtigste mekanisme for Du Yi Weis anti RA-effekt kan inducere apoptose af synoviale celler ved at hæmme PI3K Akt-signalvejen. I mellemtiden blev Du Yi Weis anti-RA-effekt og farmakologiske stofbasis undersøgt gennem en rotteadjuvant arthritis-model, og resultaterne viste, at de samlede flavonoider fra Du Yi Wei har gode anti-RA-effekter. De samlede flavonoider i Du Yi Wei kan være et af de vigtigste farmakologiske stoffer for dets anti-RA-effekt, men de vigtigste anti-RA-komponenter i Du Yi Weis samlede flavonoider er stadig uklare og kræver yderligere forskning. Derfor har denne undersøgelse til formål at udforske de vigtigste anti-RA-komponenter i de samlede flavonoider af Angelica sinensis gennem spektrale effektforhold og komponent knockout-teknikker med henblik på at tilvejebringe et teoretisk grundlag og en reference for den kliniske anvendelse af Angelica sinensis til behandling af RA.

Diskussion og konklusion
En foreløbig undersøgelse af fingeraftrykket af totale flavonoider i Angelica sinensis blev udført ved hjælp af højtydende væskekromatografi med diodearray-detektor (HPLC-DAD). Ligheden mellem fingeraftryksspektrene for hver batch af Angelica sinensis samlede flavonoidprøver og de etablerede kontrolfingeraftryksspektre var større end 0,9, hvilket indikerer, at de kemiske komponenter i forskellige batcher af Angelica sinensis samlede flavonoidprøver var konsistente. Forskergruppen undersøgte virkningerne af forskellige koncentrationer og administrationstider af totale flavonoider i Angelica sinensis på FLS-cellers levedygtighed i det tidlige stadium. Baseret på dette blev CCK-8-metoden brugt til at behandle FLS-celler i en koncentration på 64 μg/mL i 48 timer for at undersøge virkningerne af forskellige partier af totale flavonoider i Angelica sinensis på FLS-cellernes levedygtighed. Resultaterne viste, at alle 13 partier af totale flavonoider i Angelica sinensis kunne hæmme FLS-cellernes levedygtighed betydeligt. Baseret på fingeraftryksspektret af totale flavonoider i Angelica sinensis og resultaterne af celleeffektivitetseksperimenter blev grå relationsanalyse og partielle mindste kvadraters (PLS) regressionsanalyse brugt til at etablere spektrum-effekt-forholdet mellem totale flavonoider i Angelica sinensis mod RA. Resultaterne viste, at komponenterne verbascosid og verbascosid i de samlede flavonoider i Angelica sinensis spillede en vigtig rolle i dens anti-RA-effekt. Baseret på tyndlagskromatografi blev det høje indhold af verbascosid i de samlede flavonoider i Angelica sinensis effektivt fjernet, og effekten af hver prøve på FLS-cellernes levedygtighed blev bestemt ved hjælp af CCK-8-metoden. Resultaterne viste, at hele komponenten og målkomponentprøverne kunne hæmme FLS-cellernes levedygtighed betydeligt, mens den negative målkomponentprøve ikke havde nogen signifikant hæmmende virkning på FLS-cellernes levedygtighed. Samtidig blev virkningerne af ækvivalente mængder verbascosid og verbascosid på levedygtigheden af RA-FLS-celler sammenlignet. Resultaterne viste, at både verbascosid og verbascosid kunne hæmme FLS-cellernes levedygtighed betydeligt, men der var ingen signifikant forskel mellem verbascosidgruppen og verbascosidgruppen.
Sammenfattende viser resultaterne af denne undersøgelse, at komponenterne verbascosid og verbascosid spiller en vigtig rolle i anti-RA-effekten af de samlede flavonoider i Angelica sinensis. Kombineret med fingeraftryksanalysen af de samlede flavonoider i Angelica sinensis er indholdet af verbascosid betydeligt højere end indholdet af verbascosid, hvilket indikerer, at verbascosid (C21H20O11) er den vigtigste komponent i de samlede flavonoider i Angelica sinensis til bekæmpelse af leddegigt. Det kan give et videnskabeligt grundlag for den kliniske anvendelse af totale flavonoider fra Du Yi Wei til behandling af leddegigt. Osmanthusglykosider findes i stor udstrækning i forskellige lægeplanter og har betydelige virkninger inden for antiinflammatoriske, antioxidante, kræftbekæmpende og hypoglykæmiske aspekter med minimale toksiske bivirkninger. Selvom komponenterne i verbascosid er relativt almindelige, er der i øjeblikket mangel på litteratur om verbascosids anti-RA-effekter. I denne undersøgelse blev CCK-8-metoden brugt til at undersøge effekten af verbascosid på RA-FLS-cellers levedygtighed, og det blev klart påvist, at verbascosid har en hæmmende effekt på FLS-cellers levedygtighed. Efterfølgende kan der etableres en rotteartritmodel til in vivo-effektivitetsverifikation, og dens virkningsvej kan forklares, hvilket giver flere referencer og grundlag for den kliniske brug af totale flavonoider af Angelica sinensis til behandling af RA.