Undersøgelse af den beskyttende effekt af aktive ingredienser fra gojibærspirer og -blade på akut alkoholisk leverskade
Kina er et stort land med leversygdomme. Med den udbredte brug af hepatitis B-vaccine til nyfødte falder viral leversygdom år for år, men med ændringen af folks livsstil stiger ikke-viral leversygdom år for år. Ikke-virale leversygdomme omfatter hovedsageligt alkoholisk leversygdom (ALD), alkoholisk fedtleversygdom, ikke-alkoholisk fedtleversygdom, ikke-alkoholisk leversygdom, lægemiddelinduceret leversygdom, skrumpelever og leverkræft, som i alvorlig grad påvirker menneskers sundhed. ALD er den vigtigste repræsentant for ikke-virale leversygdomme og en vigtig årsag til andre leversygdomme. Forekomsten stiger år for år og har en tendens til at være yngre. De tidlige stadier af ALD er leverlæsioner forårsaget af langvarigt stort alkoholforbrug, og dens patogenese er kompleks og dårligt undersøgt. På nuværende tidspunkt er der mangel på effektive lægemidler til behandling af ALD, og der er et presserende behov for at udvikle nye terapeutiske lægemidler.

I Compendium of Materia Medica står der, at "plukning af gojibærblade om foråret er kendt som det himmelske essensgræs". Tianjingcao har den virkning, at den nærer leveren, forbedrer synet og tonificerer mangler og nærer essensen. Gojibær er en traditionel kinesisk medicin, der beskytter leveren og forbedrer synet. I årenes løb har der været mange undersøgelser af gojibærfrugter, men der er relativt få rapporter om brugen af aktive ingredienser fra gojibærblade til behandling af ALD. Denne artikel bruger gojispirer og -blade som råmaterialer til at isolere og oprense de aktive ingredienser i gojispirer og -blade (AILBL). Undersøgelsen viste, at de aktive ingredienser hovedsageligt indeholder en gruppe antioxidanter, der hovedsageligt består af flavonoider. Patogenesen af ALD er kompleks. Moderne patologisk forskning har vist, at "second strike"-teorien refererer til oxidativ stress og inflammatorisk respons, hvoraf oxidativ stress er en nøglefaktor i forekomsten og udviklingen af ALD. Derfor er de effektive ingredienser i gojibærblade, der indeholder antioxidantaktive ingredienser, naturlige medicinske ressourcer til udvikling af klinisk behandling af ALD. Formålet med denne undersøgelse er at udforske de beskyttende virkninger og mulige antioxidantmekanismer af aktive ingredienser fra gojibærspirer og -blade på akut alkoholisk leverskade hos mus, hvilket giver et teoretisk grundlag for udviklingen af funktionelle fødevaretilsætningsstoffer eller sundhedsprodukter med evnen til at forebygge og behandle alkoholisk leverskade i fremtiden.

Først blev ABTS- og DPPH-metoderne brugt til at påvise AILBL's antioxidantaktivitet; derefter blev 48 ICR-hanmus tilfældigt opdelt i seks grupper: normal kontrolgruppe, alkoholmodelgruppe, positiv lægemiddelkontrolgruppe, silymarin (200 mg/kg, i.g.) og AILBL lav-, mellem- og højdosisgrupper (30, 100, 300 mg/kg). De blev administreret oralt en gang om dagen i en uge. Efter den sidste indgift i 12 timer blev der etableret en musemodel for akut alkoholisk leverskade ved indgift af 6 g/kg alkohol med 12 timers mellemrum i alt 3 gange. Påvisning og analyse af niveauerne af alaninaminotransferase (ALT), aspartataminotransferase (AST) i museserum og malondialdehyd (MDA) og reduceret glutathion (GSH) i levervæv. Brug af hæmatoxylin-eosin (H&E) og immunhistokemisk farvning til at observere de patologiske ændringer og oxidative stressrelaterede proteiner i levervæv.

Gojibær er et af de klassiske traditionelle kinesiske lægemidler, der ofte optræder i Sangenes Bog, Shennong Bencao Jing og medicinsk teori. Forskning har vist, at gojibær har forskellige farmakologiske virkninger, såsom at fugte lungerne, give næring til qi, beskytte leveren og forbedre synet. Folks forskning fokuserer mere på gojibær, mens der er relativt mindre forskning i gojispirer og -blade. Gojibær er rige på antioxidanter som gojipolysaccharider og flavonoider, som kan forbedre kroppens indlærings- og hukommelsesevne, evne til at modvirke træthed og immunitet. De kan også effektivt eliminere frie radikaler, forbedre intracellulær antioxidant enzymaktivitet, beskytte organer som lever og nyrer og give fysiologisk og biokemisk beskyttelse til kroppen. Sammenlignet med gojibær har vores forskning vist, at indholdet af flavonoider i gojibærblade er højere, og det har en betydelig evne til at fjerne frie radikaler in vitro, hvilket har en god forebyggende og terapeutisk effekt på ALD-forsøgsdyrmodeller. I fremtiden kan det udvikles til lægemidler eller sundhedsprodukter til forebyggelse og behandling af ALD.
Alkohol er en organisk forbindelse med små molekyler og høj permeabilitet, som let optages i cellerne og fremkalder store mængder frie radikaler, der forårsager oxidativ stress og skader på cellerne. Leveren er det vigtigste organ for alkoholmetabolisme og et vigtigt målorgan for alkoholinduceret skade. Alkohol og dets metabolit acetaldehyd har toksiske virkninger på leveren. Alkohol kan opregulere niveauerne af gener, der er relateret til lipidsyntese, og nedregulere niveauerne af gener, der er relateret til fedtsyreoxidation, hvilket fremskynder syntesen af fedtsyrer. Lipider som triglycerider og frie fedtsyrer kan dog ikke metaboliseres i tide, hvilket resulterer i aflejring i leveren; Acetaldehyd kan fremme aktiveringen af stellatceller, påvirke mitokondriernes produktion af ATP og påvirke den normale syntese og udskillelse af proteiner, hvilket fører til hindringer i udskillelsen af fedt og proteiner, hvilket forårsager aflejring af ekstracellulær matrix i leveren, hvilket resulterer i fedtlæsioner, nekrose og fibrose i leverceller og videreudvikler sig til mere alvorlig hepatitis, skrumpelever og leverkræft. For det andet metaboliseres alkohol gennem forskellige veje for at producere en stor mængde oxidative stressprodukter, såsom OH -, O2- -, H2O2 og andre frie radikaler, som forstyrrer redoxbalancen i leverceller, fremmer oxidativ stressrespons, beskadiger mitokondriernes normale funktion, nedbryder glutathion i mitokondrier, reducerer levercellernes selvantioxidantbeskyttelsesevne og fører til kontinuerlig ophobning af peroxider i leverceller, hvilket forværrer leverskader. Oxidativt stress er en vigtig faktor i patogenesen af ALD.

Omkring 20% af mennesker oplever leverskader efter overdrevent eller langvarigt alkoholforbrug, og den overdrevne produktion af reaktive iltarter og forstyrrelser i lipidmetabolismen under alkoholmetabolismen er vigtige faktorer, der fremkalder celleskader og apoptose. Når leverceller og mitokondrier angribes af reaktive iltarter, falder reducerende makromolekyler som GSH i cellerne hurtigt, DNA går i stykker, mitokondrier og cellemembraner beskadiges, og ALT og AST frigives i blodbanen. Derfor bruges serum ALT- og AST-niveauer ofte til at evaluere leverskader og leverfunktion. I dette eksperiment blev der etableret en model for akut alkoholisk leverskade gennem tre på hinanden følgende runder med alkoholindtagelse. Undersøgelsen viste, at ALT- og AST-niveauerne i serum hos musene i modelgruppen, der fik alkoholindgift alene, oversteg de normale niveauer, mens ALT- og AST-niveauerne i serum hos musene, der fik et positivt lægemiddel og forskellige koncentrationer af AILBL til forebyggelse og behandling, faldt markant. Den patologiske morfologi i levervævet hos musene i behandlingsgruppen blev godt forbedret, og udtrykket af nøgleproteinet for oxidativ stress CYP2E1 blev reduceret, hvilket indikerer, at AILBL har en god beskyttende effekt på akut alkoholisk leverskade.

AILBL er rig på forskellige antioxidante stoffer som f.eks. flavonoider, som er et vigtigt materielt grundlag for dets antioxidantegenskaber og beskyttelse mod cellulær oxidativ skade. Denne undersøgelse viste, at AILBL kan reducere MDA-niveauer betydeligt, fremme GSH-regenerering, forbedre leverens evne til at fjerne frie radikaler hos mus med akut alkoholisk leverskade og derved reducere den "sekundære strejke" -skade på leveren forårsaget af ophobning af peroxidationsprodukter i kroppen og har betydelige leverbeskyttende funktioner. I mellemtiden reducerede AILBL signifikant ethanolinduceret ROS-akkumulering in vitro ved at hæmme CYP2E1-ekspression.

Sammenfattende fandt vores laboratorium, at AILBL kan fjerne MDA i leverceller, øge GSH-niveauer, hæmme CYP2E1-ekspression i leverceller og forbedre alkoholinduceret oxidativ stress, lipidperoxidation og inflammation i leverceller ved at udvinde effektive ingredienser fra gojispirer og -blade og studere deres beskyttende virkninger mod akut alkoholisk leverskade. Denne undersøgelse vil gøre de aktive ingredienser i gojibærblade til effektive lægemidler eller sundhedstilskud til forebyggelse og behandling af leversygdomme som ALD og give nye bidrag til moderniseringen af forskningen i traditionel kinesisk medicin i Kina.