Etablering af UPLC-fingeraftryk og kvantitativ analyse af fire komponenter i standardafkog af gurkemeje
Efter tusindvis af års medicineringspraksis er afkog stadig den vigtigste doseringsform til klinisk brug af traditionel kinesisk medicin. Med samfundsudviklingen og den teknologiske udvikling har afkog fået nye "konnotationer", og der er også opstået "standardafkog" af traditionel kinesisk medicin. Standardafkog af kinesisk medicin er et standardstof, der fremstilles ved at henvise til afkogsmetoden for traditionel kinesisk medicin og anvende en standardiseret afkogstilstand. Det kan standardisere den kliniske brug af kinesisk medicin, standardisere brugen af nye afkog af kinesisk medicin, såsom kinesisk medicin formel granulat i klinisk praksis, og give reference til forskning og udvikling af kinesisk medicin formel granulat, klassiske formelpræparater og andre produkter.
Gurkemeje er det tørrede rhizom af Curcuma longa L., en plante i ingefærfamilien. Det virker blodbrydende, fremmer qi-cirkulationen og lindrer smerter. Det er en almindeligt anvendt traditionel kinesisk medicin i klinisk praksis. De vigtigste kemiske komponenter i gurkemeje er fenoler og terpenoider. Derudover indeholder det også en lille mængde alkaloider, flavonoider, steroler, som har antibakterielle, antiinflammatoriske, antioxidante, anti-tumor, antidiabetes, leverbeskyttelse, blodlipider og andre effekter. På nuværende tidspunkt er gurkemeje hovedsageligt udbredt i Sichuan, Yunnan, Shaanxi og andre regioner. Sichuan og Yunnan er de autentiske og vigtigste produktionsområder for gurkemeje, og markedsforsyningen er hovedsageligt dyrket. Der er få vilde ressourcer, hvilket gør det vanskeligt at danne en skala. På nuværende tidspunkt fokuserer kvalitetsevalueringen af gurkemeje hovedsageligt på analyse og bestemmelse af curcuminkomponenter og flygtige olier, og der forskes mindre i andre typer af komponenter.
Med udviklingen af moderne analyseteknologi er der sket betydelige fremskridt i kvalitetskontrollen af traditionel kinesisk medicin. Anvendelsen af kvalitetskontrolmetoder som fingeraftryk/karakteristisk spektrum, én måling og flere evalueringer, kvantificering af flere komponenter og identifikation af tynde lag med flere komponenter har gjort begrebet "overordnet kvalitetskontrol" af traditionel kinesisk medicin mere og mere klart. Denne undersøgelse etablerede et UPLC-fingeraftryk af gurkemeje-standardafkog kombineret med kemometrisk analyse for at identificere differentierede kvalitetsmarkører og kombineret med kvantitativ analyse af flere komponenter for at give reference til identifikation og kvalitetskontrol af gurkemeje-standardafkog og relaterede præparater.

Udvælgelse af måleindikatorer. Curcumin og flygtig olie er en af de vigtigste aktive komponenter i gurkemeje, men deres vandopløselighed er relativt lav. Standardafkog bruger vand som opløsningsmiddel, og vandopløselige komponenter bør være et vigtigt materialegrundlag for effektiviteten af afkog. Derfor blev der i undersøgelsen af kvalitetsstandarder for standardafkog ud over måling af gurkemejekomponenter også tilføjet bestemmelse af ferulinsyre. Sammenlignet med curcuminkomponenter har ferulinsyre relativt god vandopløselighed og er en forløber for syntesen af curcuminkomponenter. Samtidig kan curcuminkomponenter under afkogningsprocessen af standardafkog også omdannes til ferulinsyre. Moderne farmakologisk forskning har bekræftet, at ferulinsyre har antibakterielle, antivirale, antioxidante, antitrombotiske, lipidsænkende, reducerende myokardieiskæmi og iltforbrugseffekter, og dens medicinske værdi bliver stadig vigtigere. Der lægges vægt på mængden af ferulinsyre i standardafkoget, hvilket afspejler ændringerne i den kemiske sammensætning af gurkemeje under standardafkogsprocessen. Optimering af produktionsprocesser for moderne traditionelle kinesiske medicinformuleringer som f.eks. granulat baseret på "standardafkog" har stor vejledende betydning.

Etablering af analysemetoder. Polariteten af kemiske komponenter i standardafkog af gurkemeje varierer meget, herunder aktive ingredienser som curcumin med høj lipidopløselighed og vandopløselige ingredienser som ferulinsyre. Derfor kræver etableringen af fingeraftryksspektret maksimal ekstraktion af ovennævnte komponenter, samtidig med at man overvejer den gode kromatografiske adskillelse af kemiske komponenter med forskellige polariteter og etablerer en kvantitativ metode med flere komponenter, der er i overensstemmelse med betingelserne for fingeraftryksspektret. Derfor gennemførte vi en systematisk undersøgelse af mobilfasesystemet, detektionsbølgelængden og forberedelsesmetoden for testopløsningen for at bestemme de optimale kromatografiske forhold og forberedelsesmetoden for testopløsningen.
Evaluering af fingeraftryksspektre og resultater af indholdsbestemmelse. Ligheden mellem fingeraftryksspektrene fra 16 partier gurkemeje-standardafkog og kontrolfingeraftryksspektrene er over 0,95, hvilket indikerer, at den overordnede lighed mellem fingeraftryksspektrene er høj og kan bruges til identifikation og kvalitetskontrol af gurkemeje-standardafkog. Beregning af lighed kan afspejle den stabile sammensætning og de karakteristiske forhold mellem fingeraftrykstoppe, men den kan ikke fuldt ud beskrive og skelne mellem fordelingsmønstre og interaktionsforhold mellem komplekse komponenter i fingeraftryksspektret. Derfor blev der brugt mønstergenkendelsesmetoder inden for kemometri til at undersøge fingeraftryksspektret. Resultaterne viste, at 16 partier af gurkemeje-standardafkogsprøver havde en vis produktivitet med 10 fælles topområder som variabler, HCA og PCA klassificerede begge 16 partier af prøver i to kategorier, hvor prøver fra Sichuan-produktionsområdet blev klassificeret i en kategori, og prøver fra Yunnan-produktionsområdet blev klassificeret i en anden kategori. Der blev fundet i alt 6 differentierede biomarkører, nemlig peak, peak (ferulinsyre), peak 8 (bis(demethoxycurcumin)), peak 9 (demethoxycurcumin), peak 2 (vanillin) og peak 1 (p-hydroxybenzaldehyd). Peak 5 blev identificeret ved hjælp af massespektrometri med høj opløsning, og det antages, at det kan være 1-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-7-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1,4,6-heptadien-3-on. I øjeblikket er der mangel på referencestandarder, og der er behov for yderligere forskning og bekræftelse. Ved at måle indholdet af ferulinsyre, demethoxycurcumin, demethoxycurcumin og curcumin viste resultaterne, at standardafkoget af curcumin, demethoxycurcumin, dobbelt demethoxycurcumin og ferulinsyre fremstillet af gurkemejeråvarer i Dali, Yunnan, var højere end indholdet i prøver fra Yibin og Leshan, Sichuan. Dette giver også en reference til udvælgelse af råvarer til virksomhedsproduktion.
På nuværende tidspunkt er der mange undersøgelser af fingeraftryksspektret og indholdsbestemmelsen af gurkemeje, men de fokuserer hovedsageligt på karakterisering og bestemmelse af flygtige olier og curcuminkomponenter, og der er utilstrækkelig forskning i komponenter med relativt høj vandopløselighed. Denne undersøgelse etablerer UPLC-fingeraftryksspektret for standardafkog af gurkemeje og bestemmer samtidig fire effektive ingredienser, hvilket giver vigtige referencer til forbedring af kvalitetsstandarderne for gurkemejemedicinske materialer samt etablering af produktkvalitetsstandarder for gurkemejeformelgranulat til traditionel kinesisk medicin og klassiske formelpræparater. Denne metode er nem at betjene, stabil og pålidelig med god repeterbarhed.