Undersøgelse af kvalitetsevaluering af Bombyx mori ved hjælp af kemisk mønstergenkendelse kombineret med HPLC-fingeraftryk
Bombyx mori er et af de mest anvendte lægemidler til dyr i klinisk praksis og bruges hovedsageligt til behandling af sygdomme som leversvamp, anfald, infantil forskrækkelse, stivkrampe osv. Dets kilde er den tørrede krop af 4. til 5. larvestadie af silkeormen Bombyx mori Linnaeus, som blev inficeret med Beauveria bassiana (Bals.) Vuillart og døde. Kemiske undersøgelser har vist, at de vigtigste aktive ingredienser er proteiner, aminosyrer, flavonoider og andre komponenter. Moderne farmakologiske undersøgelser har vist, at det proteinrige ekstrakt af Bombyx mori har antiepileptiske, immunmodulerende og hæmmende virkninger Tumorvæksten hos G7-tumorbærende mus har forbedrede beskyttende virkninger, fremmer genopretningen af motorisk svækkelse induceret af MPTP hos mus med Parkinsons sygdom, forhindrer dopaminudtømning og så videre.
Som silkeorm med en enkelt diæt bestemmer dens egenskab ved kun at spise morbærblade den rige og forskelligartede absorption, transformation og metabolisme af de vigtigste flavonoider i morbærblade i dens krop. Forskning har vist, at flavonoider i silkeorme undergår biotransformation efter infektion med Fusarium oxysporum. For eksempel omdannes flavonoider som quercetin og kaempferol til quercetin-7-O - β - D-4-O-methylglucosid og kaempferol-7-O - β - D-4-O-methylglucosid gennem 4-O-methylglucosyleringsreaktion. Xing et al. fandt, at når dødstidspunktet øges, varierer indholdet og transformationen af flavonoider i kroppen også, og spekulerede i, at quercetin 7-O - β - D-4-O-methylglucoside og kaempferol-7-O - β - D-4-O-methylglucoside kan bruges som en af deres kvalitetskontrolindikatorer. Derfor kan flavonoider tjene som vigtige indikatorer til evaluering af silkeormens kvalitet.

Kombinationen af fingeraftryksspektrum og kemisk mønstergenkendelse er en effektiv metode til at evaluere kvaliteten af traditionel kinesisk medicin, som er blevet brugt i vid udstrækning til kvalitetsevaluering af traditionel kinesisk medicin, afkog af kinesisk medicin, formelgranulat osv. På nuværende tidspunkt er der forskellige undersøgelser af fingeraftryksspektre relateret til silkeorme, herunder ultraviolet fingeraftryk, infrarødt fingeraftryk, HPLC, HPCE og proteinfingeraftryksspektre. Sammensætningskategorierne dækker vandopløselige komponenter, lipidopløselige komponenter, alkoholopløselige komponenter osv. Der er dog problemer med dårlig separationseffektivitet og begrænsede identifikationstoppe, hvilket gør det vanskeligt at karakterisere deres kvalitetsegenskaber. Forskere har vist, at silkeorme produceret i Sichuan har bedre kvalitet og højere niveauer af Beauveria bassiana sammenlignet med andre regioner som Guangxi, Yunnan og Zhejiang. Selvom der har været nogle forskningsrapporter om den kemiske sammensætning og kvalitetskontrol af Bombyx mori, er der i øjeblikket ingen god kvalitetskontrolmetode på grund af dens komplekse sammensætning og lave indhold. Derfor brugte denne undersøgelse højtydende væskekromatografi til at etablere fingeraftryksspektre af 20 partier silkeormsmedicinske materialer fra forskellige oprindelser og gennemførte differentieringsforskning ved at kombinere kemiske identifikationsmetoder såsom lighedsanalyse, klyngeanalyse og hovedkomponentanalyse. Med henvisning til kravene til silkeorm i 2020-udgaven af den kinesiske farmakopé blev fugtindholdet, det samlede askeindhold, det syreuopløselige askeindhold og ekstraktet bestemt. Indholdet af den effektive ingrediens Beauveria bassiana blev bestemt ved hjælp af forskningsgruppens tidligere metode med det formål at foretage en omfattende evaluering af kvaliteten af medicinske materialer af forskellig oprindelse, tilvejebringe et videnskabeligt grundlag for kvalitetskontrol og standardforbedring af medicinske materialer til silkeorm og give reference til forskning i andre medicinske materialer.

Dette eksperiment undersøgte forbehandlingsbetingelserne såsom ekstraktionsmetode, ekstraktionsmiddel og ekstraktionstid og fastslog, at ekstraktionsmetoden (tilbagesvalingsekstraktion, ultralydsekstraktion) var optimal for ultralydsekstraktion, ekstraktionsmidlet (methanol, 80% methanol, acetonitril og vand) var optimalt for 80% methanol, og ekstraktionstiden (15, 30, 45 minutter) var optimal i 30 minutter. Silkeormens etablerede fingeraftryk har en lighed mellem 0,92 og 0,99, hvilket er relativt højt og giver et grundlag for kvalitetsevalueringen af silkeormen.
Det fingeraftryksspektrum, som vores forskningsinstitut har etableret, fokuserer primært på flavonoiderne i de medicinske materialer fra Bombyx mori. Wang et al. brugte netværksfarmakologi og molekylære dockingteknikker til at studere resultaterne, som viste, at quercetin, kaempferol og andre komponenter kan være de vigtigste materielle basiskomponenter for Bombyx moris evne til at lindre vind og spasmer. Flere undersøgelser har også vist, at quercetin og kaempferol er en af de vigtigste aktive ingredienser i behandlingen af epilepsi. Som en vigtig urt til at lindre vind og spasmer kan et af stofferne, der ligger til grund for Bombyx moris virkning, være flavonoider. I denne undersøgelse blev der også foretaget en korrelationsanalyse mellem topområderne for hver fælles top og de medicinske materialers egenskaber, ekstrakter, samlede askeindhold og indhold af hvid muskardin. Resultaterne viste, at tværsnitsegenskaberne var positivt korreleret med overfladeegenskaberne, længden af det medicinske materiale og indholdet af hvid muskardin og positivt korreleret med topområderne i top 1, 2, 3, 4, 6 og 7. Efter sammenligning blev top 1, 2, 4, 6 og 7 identificeret som rutin, hyperosid, astragalosid, quercetin og kaempferol, som er de vigtigste flavonoider i morbærblade. Dette indikerer, at omdannelsen af flavonoider under dannelsen af silkeorme er relateret til tværsnittets "glasagtige krop". Der er en stærk sammenhæng mellem kvaliteten af lægeurter og dannelsen, hvilket også bekræfter det kvalitetskarakteristiske punkt "hvid farve, lige striber og sorte og lyse tværsnit foretrækkes til silkeorme" siden oldtiden.

Sammenfattende omfatter det fingeraftryksspektrum, der er etableret i denne artikel, ikke kun de mulige materialebaserede komponenter i silkeormens "Xifeng Zhijing" farmakologiske virkning, men har også en vis sammenhæng med kvalitetsindikatorerne for selve silkeormens medicinske materiale, som omfattende kan afspejle kvaliteten af silkeormens medicinske materiale og give et videnskabeligt grundlag for kvalitetskontrollen af silkeormens medicinske materiale. I kvalitetskontrolstandarderne for Cordyceps sinensis-medicinske materialer bør det fuldt ud overvejes, at det er et kompleks af "bakterieinsektblade", og flere indikatorer bør bruges til omfattende at evaluere dets kvalitet og etablere en mere videnskabelig og rimelig kvalitetsstandard for medicinske materialer.