Forskning i kvalitetsevaluering af Baimao Root Standard Soup fra forskellige oprindelser baseret på UPLC-fingeraftryk og kvantificering af flere indekskomponenter
Udvælgelse af indholdsindikatorer. Standardafkoget af traditionel kinesisk medicin er et enkelt urteafkog, der fremstilles ved at bruge kinesiske urtemedicinskiver som råmaterialer, med henvisning til de traditionelle afkogningsvaner for kinesisk urtemedicin, ved at bruge vand som opløsningsmiddel og ved at anvende en standardiseret afkogningstilstand. Som et standardstof eller -system bruges standardafkog af traditionel kinesisk medicin ofte til at standardisere den kliniske brug af traditionel kinesisk medicin, standardisere brugen af nye afkog af traditionel kinesisk medicin, såsom formelgranulat, og sikre nøjagtigheden af den kliniske brug af traditionel kinesisk medicin. Derfor kan etablering af kvalitetsstandarder for standardafkog af traditionel kinesisk medicin give vigtige referencer til etablering af kvalitetsstandarder for moderne kinesiske medicinformuleringer, såsom tilsvarende kinesiske medicinformelgranulater og klassiske formler.
Roden af Poaceae-planten Imperata cylindrica Beauv Det tørrede rhizom af var. major (Nees) C. E. Hubb. virker blodkølende, standser blødninger, fjerner varme og giver diurese. Moderne forskning har vist, at rødderne af Houttuynia cordata indeholder forskellige kemiske komponenter som triterpenoider, flavonoider, organiske syrer, phenylpropanoider, endosulfaner og polyoler, som har forskellige farmakologiske aktiviteter som hæmostase, diurese, analgesi, antibakteriel, antiinflammatorisk, antioxidant, blodtrykssænkning, leverbeskyttelse og regulering af immunfunktionen. 2020-udgaven af den kinesiske farmakopé mangler indholdsindikatorer for kvalitetsstandarderne for medicinske materialer fra Houttuynia cordata-rod, og de nuværende kvalitetsstandarder er vanskelige at afspejle den iboende kvalitet af Houttuynia cordata-rod fuldt ud. Tidligere forskningsrapporter har for det meste brugt fingeraftryk/karakteristisk spektrum kombineret med bestemmelse af klorogensyreindhold til kvalitetskontrol af Polygonatum sibiricum-rødder, men der har ikke været nogen kvantitativ undersøgelse af kombinationen af fingeraftryksspektrum og flere indikatorkomponenter. Forskning har vist, at fenoliske syrekomponenter i traditionel kinesisk medicin har antiinflammatoriske, antibakterielle, antioxidante, antitumor- og andre virkninger og er naturlige aktive produkter med stor forskningsværdi og anvendelsespotentiale. Roden af Houttuynia cordata indeholder en stor mængde fenoliske syrekomponenter, og dens farmakologiske aktiviteter som antiinflammatorisk, antibakteriel og antioxidant er tæt forbundet med de funktionelle indikationer af Houttuynia cordata-rod. Derfor etablerede denne undersøgelse UPLC-fingeraftrykket af Houttuynia cordata-rodens standardafkog og opnåede samtidig bestemmelse af chlorogensyre, neochlorogensyre, kryptochlorogensyre og p-lys kanelsyreindhold i standardafkoget for første gang. Kombineret med kemometriske analysemetoder giver det et grundlag for kvalitetsevaluering af Houttuynia cordata rodstandardafkog i forskellige produktionsområder.

Udvælgelse af indholdsindikatorer. På nuværende tidspunkt er der relativt lidt forskning i indikatorerne til bestemmelse af indholdet af Polygonatum sibiricum-rødder, primært med fokus på bestemmelse af fenoliske syrer og sukkerarter. Der er også rapporter om bestemmelse af indholdet af Polygonatum sibiricum og Caryophyllin i Polygonatum sibiricum-rødder. Indholdet af Polygonatum sibiricum og Caryophyllin i medicinske materialer er dog meget lavt. Standardafkoget af Polygonatum sibiricums rødder bruger vand som opløsningsmiddel, og de aktive ingredienser er hovedsageligt vandopløselige komponenter. Polygonatum sibiricum og Caryophyllin har ikke kun et lavt indhold, men også fedtopløselige komponenter, så de er ikke egnede som indikatorkomponenter. Sukkerkomponenternes specificitet er dårlig, og de er heller ikke egnede som indikatorkomponenter. Fra undersøgelsen af fingeraftryksspektre blev det også konstateret, at selvom rødderne af Polygonatum sibiricum har mange kemiske komponenter, er indholdet af effektive ingredienser relativt lavt. Identificer to kromatografiske toppe med højere toptyper fra fingeraftryksspektret, som begge er fenoliske syrekomponenter og tæt forbundet med den farmakologiske aktivitet af standardafkoget af Houttuynia cordata. Derfor foretrækkes bestemmelse af fenoliske syrekomponenter i udvælgelsen af indholdsindikatorer. Forskning har vist, at chlorogensyre, neochlorogensyre og cryptochlorogensyre er relativt stabile under sure pH-forhold, men ustabile under neutrale og alkaliske forhold, med en vis grad af konvertering mellem dem. I forbindelse med undersøgelsen af fingeraftryksspektrene for Houttuynia cordata-rod og standardafkog fandt vi, at sammenlignet med Houttuynia cordata-rod viste fingeraftryksspektrene for Houttuynia cordata-rod-standardafkog en betydelig stigning i forholdet mellem toparealerne for top 1 (neochlorogen syre), top 8 (cryptochlorogen syre) og top 5. Derfor spekulerer vi i, at der under afkogningsprocessen af Houttuynia cordata-rod er større sandsynlighed for omdannelse af chlorogensyre, neochlorogensyre og cryptochlorogensyre. Klorogensyre, neoklorogensyre og kryptoklorogensyre har lignende strukturer og farmakologiske aktiviteter. Derfor mener vi, at når man vælger indholdsindikatorer for standardafkoget af Zhimao-rod, er det bedst at bestemme den samlede mængde klorogensyre, neoklorogensyre og kryptoklorogensyre i stedet for blot at måle de enkelte klorogensyrekomponenter. Forskningsresultaterne viser, at der er betydelige forskelle i den samlede mængde af fire fenoliske syrekomponenter i standardafkoget af Polygonatum sibiricum fra forskellige produktionsområder, hvilket afspejler kvaliteten af Polygonatum sibiricum-medicinske materialer fra forskellige produktionsområder, som kan være relateret til de forskellige høsttider og forarbejdningsmetoder for medicinske materialer fra forskellige produktionsområder.

Etablering af analysemetoder. På nuværende tidspunkt er der ingen forskning i kvalitetskontrol af Houttuynia cordata-rod ved hjælp af fingeraftryksspektrum kombineret med multikomponentkvantificering. Det frysetørrede pulver af Houttuynia cordata root standardafkog indeholder en masse sukker, og strukturen af fenoliske syrekomponenter er ens, hvilket kræver høj kromatografisk adskillelse. Derfor bør separationseffekten af forskellige mobilfaseforhold, kromatografiske søjler, søjletemperaturer og strømningshastigheder på hver fingeraftrykstop, især den kromatografiske top til indholdsbestemmelse, undersøges fuldt ud, og de optimale kromatografiske forhold og søjler bør vælges; Vælg 280, 300, 325 og 350 nm som detektionsbølgelængder og udfør fuldbølgescanning for at registrere absorptionspektrene for prøven i området 200-400 nm. Resultaterne viser, at der ikke er nogen signifikant forskel i antallet og toptyperne for hvert kromatogram ved forskellige bølgelængder. Ved at bruge 325 nm som detektionsbølgelængde er absorptionsværdien af kromatogramtoppen den højeste. Derfor er 325 nm valgt som detektionsbølgelængde for dette karakteristiske spektrum. Ved hjælp af enkeltfaktoranalysemetoden blev ekstraktionsmidlerne (methanol, 10%-methanol, 50%-methanol, 70%-methanol, 70%-ethanol, 50%-ethanol, 10%-ethanol), ekstraktionsmetoder (ultralyd og tilbagesvaling), opløsningsmiddeldosering (15, 25, 50 ml) og ekstraktionstid (15, 30, 45 min) undersøgt for at bestemme en rimelig forberedelsesmetode til testopløsningen.

Lighedsevaluering og kemometrisk analyse. Resultaterne af lighedsberegningen af fingeraftryksspektre viser, at lighedsværdierne for tre partier standardafkog af Polygonatum sibiricum i Henan-produktionsområdet er betydeligt lavere end i andre produktionsområder, hvilket indikerer, at der er betydelige forskelle i den kemiske sammensætning af Polygonatum sibiricum-rødder i Henan sammenlignet med andre produktionsområder. Både HCA- og PCA-resultater kan effektivt skelne mellem prøver fra produktionsområderne Hebei, Anhui og Henan, men differentieringen af prøver fra Jiangsu-produktionsområdet er ikke indlysende. Fenoliske syrekomponenter som klorogensyre er letopløselige i vand og ustabile, når de udsættes for varme. Derfor kan behandling, opbevaring og transport i forskellige produktionsområder påvirke kvaliteten af medicinske materialer, hvilket fører til forskelle i kvaliteten af standardafkog af Polygonatum sibiricum fra forskellige produktionsområder. Ved hjælp af OPLS-DA blev tre differentierede biomarkører identificeret og rangeret efter VIP-værdier, nemlig peak 9>peak 6>peak 5. Dette indikerer, at der er betydelige forskelle i peak 9, peak 6 og peak 5 i standardafkoget af Houttuynia cordata fra forskellige produktionsområder. Det er blevet bekræftet, at peak 9 er p-lys kanelsyre, peak 5 er klorogensyre, og peak 6 kræver yderligere forskning. På nuværende tidspunkt har mange provinser indført lokale politikker for at tilskynde til friskklipning af lægeurter i deres produktionsområder og reducere tabet af effektive ingredienser. Undersøgelser har vist, at indholdet af klorogensyre, neoklorogensyre og kryptoklorogensyre i skiverne, der er lavet ved at vaske og skære græskoralurter, mens de er friske, er betydeligt højere end i skiver, der er lavet ved traditionelle forarbejdningsmetoder. De antiinflammatoriske og smertestillende virkninger af græskoralskiver, der er forarbejdet, mens de er friske, er betydeligt bedre end de traditionelle skiver, hvilket indikerer, at det er muligt at kombinere græskoralforarbejdning med forarbejdning i produktionsområdet. Jiumao-rod er rig på fenoliske syrekomponenter, der er særligt velegnede til frisk forarbejdning i produktionsområdet, hvorved indholdet af medicinske materialer øges.

Denne undersøgelse etablerede en UPLC-fingeraftryksmetode for standardafkoget af Polygonatum sibiricum og bestemte samtidig fire fenoliske syrekomponenter. Metoden er nem at betjene, stabil, pålidelig og har god repeterbarhed, hvilket giver vigtig reference til kvalitetsevalueringen af Polygonatum sibiricum-standardafkog, medicinske materialer, afkogningsstykker og relaterede præparater.