Undersøgelse af adskillelse og fremstilling af anthocyaniner fra grøn morbær ved hjælp af højhastigheds modstrømskromatografi og deres antioxidantaktivitet
Morbær, som er frugten af morbærtræer i morbærfamilien, er rig på næringsstoffer og har forskellige virkninger som f.eks. anti-cancer, antioxidant, smertestillende og anti-inflammatorisk, og skønhed i sort hår. Grønne morbær, også kendt som gule morbær, henviser til umodne morbær. Som traditionel kinesisk medicin er grønne morbær lettere at plukke, transportere og opbevare end modne morbær, og deres indhold af anthocyaniner, catechiner og epicatechiner er meget højere end i modne morbær. Der har været undersøgelser både herhjemme og internationalt om udvinding og isolering af anthocyaniner fra forskellige planter som f.eks. vindruekerner, roser, majssilke, tranebær, kakaobønner osv. Liu et al. brugte LSA-10 harpiks til at berige og rense anthocyaniner fra hvidtjørn; Chen Wenliang et al. brugte membranseparation og filtrering til at adskille oligomere anthocyaniner fra vindruekerner, hvilket resulterede i et indhold af 65% oligomere anthocyaniner, men opnåede ikke monomerseparationskomponenter; Glavnik et al. analyserede anthocyaninerne i japansk tigerrør ved hjælp af højtydende tyndlagskromatografi og identificerede monomerer, decamerer og anthocyaniner af B-typen fra dets råekstrakt. Denne metode er imidlertid vanskelig at forberede; Sun et al. brugte semiforberedende højtydende væskekromatografi til at adskille anthocyaniner fra druekerner, men forbehandlingen var kompleks, og adskillelsesudbyttet var lavt; Denne artikel vælger højhastigheds modstrømskromatografi (HSCCC), som har en stor adskillelseskapacitet, kan bruges til batchforberedelse og adskillelse, er let at betjene og har høj adskillelseseffektivitet.
Procyanidiner (PC), som er en type polyfenoliske forbindelser, findes i stor udstrækning i planter. De består hovedsageligt af catechiner, epicatechiner (EC), epigallocatechiner (EGC) og epicatechingallater (ECG) og har en stærk antioxidantaktivitet. Dette arbejde har til formål at bruge højhastigheds modstrømskromatografi til at adskille og oprense anthocyaniner fra grønne morbær. Højtydende væskekromatografi (HPLC) vil blive brugt til at identificere de kemiske komponenter i hver komponent og analysere deres renhed; ved at undersøge rensningsevnen for DPPH-radikaler, ABTS+-radikaler og hydroxylradikaler i hver komponent kan styrken af deres antioxidantkapacitet afspejles. Dette arbejde udvider omfanget af dyb forarbejdning og udnyttelse af morbær, giver retning for den industrielle produktion af anthocyaniner i grønne morbær og har en vis referenceværdi for udviklingen og udnyttelsen af morbær som medicinske ressourcer.

‍

Med grøn morbær som råmateriale blev råekstraktet opnået gennem ekstraktion, affedtning, fjernelse af urenheder og ekstraktionsberigelse under de eksperimentelle forhold. Det optimale opløsningsmiddelsystem til HSCCC-separation og -oprensning var n-hexan-ethylacetatvand (1:20:20, V/V/V). 200 mg råekstrakt af anthocyaniner fra grønne morbær blev adskilt i fem komponenter ved hjælp af HSCCC, nemlig F1 (28,5 mg), F2 (10,43 mg), F3 (6,85 mg), F4 (10,65 mg) og F5 (13,65 mg). Hver komponent indeholdt catechiner, anthocyanin B2, anthocyanin A1 osv. Blandt dem indeholdt F4 epigallocatechingallat med en renhed på 95,05%; F5 indeholder catechiner med en renhed på 73,75%. De adskilte komponenter har alle en vis antioxidantaktivitet. Med Vc som kontrol er evnen til at fjerne frie DPPH-radikaler som følger: Vc>F5>F4>F2>F3>F1> råekstrakt af grønne morbær; ABTS+-fri radikalopfangningsevne: Vc>F5>F4>F2>F3>F1> råekstrakt af grøn morbær; Hydroxylradikal rensningsevne: F1>F5>Vc>F4>F2> råekstrakt af grønne morbær>F3. HSCCC har en stor forberedelseskapacitet og intet pakkemateriale i den kromatografiske søjle. I dette eksperiment kan råekstraktet adskilles en gang for at opnå fem komponenter, og nogle komponenter har monomere stoffer med høj renhed og stærk antioxidantaktivitet. Artiklens forskningsindhold har åbnet op for nye ideer til produktion af anthocyaniner og givet teoretisk støtte til undersøgelsen af den medicinske effekt af anthocyaniner i grønne morbær.