Isolering af kemiske komponenter fra cypres og deres hæmning af tumorcellers proliferationsaktivitet
Selaginella pulvinata (Hook.&Grev.) Maxim. er en flerårig urteagtig plante af Selaginella-slægten i familien Selaginellaceae. Den er også kendt som Evergreen, Longevity Grass, Nine Dead Resurrection Grass osv. Der findes over 50 arter af Selaginella-planter i Kina, som er vidt udbredt i Guangxi, Liaoning, Yunnan, Fujian, Zhejiang, Shandong, Jilin, Hunan, Shaanxi, Hebei og andre steder. Bogen "Seeking Truth from Materia Medica" fortæller, at behandlingen er opdelt i to kategorier: moden og rå, lidt kold, når den er rå, og stærk nok til at bryde gennem blodet og meridianerne og dermed behandle symptomer som stagnation og lymfeknuder; hvis den er ristet, vil den være varm og effektiv til at stoppe blødninger og dermed behandle symptomer som tarmrødme og prolaps. Moderne farmakologisk forskning har vist, at pudeformet Selaginella virker varmeafledende og afgiftende, anti-inflammatorisk, anti-tumor, anti-aging, immunregulerende og behandler hjerte-kar-sygdomme. Hovedkomponenterne i Platycodon grandiflorus omfatter flavonoider, flavoner, alkyner, alkaloider, organiske syrer osv. Blandt dem er flavonoider og alkyner de vigtigste aktive ingredienser i Platycodon grandiflorus, og selaginelinforbindelser er en ny type alkynskeletforbindelser, der kun findes i planter af Platycodon grandiflorus-slægten. Derfor er det af stor betydning at oprense flavonoiderne og alkynfenolerne i den polstrede cypres og foretage dybdegående farmakologiske undersøgelser af deres virkningsmekanismer.
På grund af de lignende strukturer af selaginelin og flavonoider er det vanskeligt at adskille dem ved hjælp af konventionelle separationsmetoder. Ved hjælp af massespektrometristyret automatisk rensnings- og separationsteknologi blev molekylvægtene og fragmenterne af selaginelliner og flavonoider derfor påvist ved hjælp af massespektrometri, og de tilsvarende forbindelser blev fremstillet online i flydende fase. Samtidig blev vakuum- og atmosfærisk tryk-kolonnekromatografi brugt til selektivt at adskille flavonoider og alkynephenoler fra ethylacetatekstraktionsdelen af 95%-ethanol-ekstraktet af Selaginella cuspidata. Der blev opnået fire flavonoider og syv selaginelliner, og deres strukturer blev bestemt ved hjælp af kemiske og spektrale data. Disse forbindelsers in vitro-proliferationshæmmende aktivitet på humane ikke-småcellet lungekræftceller (NSCLC) H322 blev evalueret.
Ved hjælp af massespektrometri-styret PHPL-MS-separationsteknologi kombineret med vakuum- og atmosfærisk trykkolonnekromatografi blev der udført selektiv fremstilling og adskillelse af flavonoider og alkynfenoler i polstret cypres, hvilket resulterede i fire flavonoider (1-4) og syv alkynfenoler (5-11). Denne metode kan hurtigt og effektivt opnå flavonoider og alkynfenoler med høj renhed. Evalueringsresultaterne af hæmmende tumorcelleproliferationsaktivitet viste, at disse naturlige forbindelser har god proliferationshæmmende aktivitet på human ikke-småcellet lungecancercellelinje H322 med IC50-værdier på 16,70 μ mol/L for forbindelse 3 og 9,54 μ mol/L for forbindelse 10. Både flavonoider og alkyner har vist stærk aktivitet i antitumor- og COX-2-hæmning, mens alkyner har vist in vitro-synergistiske effekter på den antifungale aktivitet af fluconazol og ketoconazol. Derfor har de forbindelser, der er fremstillet i denne artikel, værdi for yderligere forskning og strukturel modifikation. Især findes de alkyne phenoliske strukturer i øjeblikket kun i planter af Selaginella-slægten. Den etablerede hurtige fremstillingsmetode giver også et effektivt middel til hurtig og storstilet adskillelse og oprensning af flavonoider og alkynfenolforbindelser i Selaginella med pude.