Undersøgelse af de kemiske komponenter i lignaner og deres levercellebeskyttende effekter i kinesisk ulvebær
Leonuri Fructus stammer fra den tørrede og modne frugt af Leonurus japonicus Houtt, en plante i familien Lamiaceae. Dens medicinske egenskaber omfatter fremme af blodcirkulationen, regulering af menstruationen, rensning af leveren og forbedring af synet. Den blev første gang nævnt i "Shennong Bencao Jing" og er kendt for sin skarpe og milde smag samt sin evne til at forbedre synet, give næring til essensen og fjerne fugt. Den har en lang historie med medicinsk brug. Yimucao og Wuweizi er to traditionelle kinesiske lægemidler fra samme plante med forskellige medicinske dele. Deres traditionelle virkninger har også ligheder og forskelle. "Compendium of Materia Medica" skelner mellem de to kinesiske lægemidlers funktioner og indikationer: "Yimucao fremmer blodcirkulationen og giver næring til blodet ... Det er virkelig blodfamiliens hellige medicin. Wuweizi er fremragende til behandling af kvinders uregelmæssige meridianer, fødsler og alle former for blod- og qi-sygdomme. Dens rødder, stængler, blomster og blade bruges alle som medicin og kan bruges sammen. Hvis det behandler stagnation i hænder og fødder, adskillelse af yin og blod, vind og varme, rensning og udrensning af levervarme, forbedring af synet og essensen og regulering af kvinders meridianer, så er Wuweizi alene god. Hvis det behandler hævelser, toksiner, sår og mavesår, kan det fjerne inflammation. Vand fremmer blodcirkulationen, og hvis en kvinde lider af forskellige sygdomme under graviditeten, er det tilrådeligt at bruge det i kombination for at få det bedste ud af det. Ud fra dette kan man se, at både motherwort og wolfberry har den funktion at fremme blodcirkulationen og fjerne blodstasis, men førstnævnte er god til at fremme blodcirkulationen og fjerne blodstasis, mens sidstnævnte er god til at rense leveren og forbedre synet. Bredden og dybden af den nuværende forskning i Polygonatum sibiricum er dog langt mindre end i Leonurus heterophyllus. Kemiske undersøgelser har vist, at mere end 300 kemiske komponenter er blevet isoleret og identificeret i Leonurus heterophyllus, og der er meget litteratur, der forklarer dens farmakologiske virkninger og mekanismer inden for vasodilatation, antiblodpladeaggregering og regulering af glat livmodermuskulatur. Der er dog rapporteret om mindre end 70 forbindelser i Polygonatum sibiricum, hvor de vigtigste komponenttyper er triterpenoider, cykliske peptider, flavonoider, steroler, phenylpropanoider, lignaner og alkaloider. Moderne farmakologiske undersøgelser har vist, at Polygonatum sibiricum har virkninger som livmodersammentrækning, levercellebeskyttelse, hæmning af tyrosinase- og acetylcholinesterase-aktivitet, anti-cancer, anti-inflammatorisk, neurobeskyttende osv. De fleste farmakologiske undersøgelser fokuserer dog kun på de farmakologiske virkninger af ekstraktet, og der er relativt lidt forskning i de farmakologiske virkninger og mekanismer for de enkelte komponenter. I den indledende forskning fandt forskerholdet, at tetrahydrofuranlignaner i frøene af kinesisk ulvebær har betydelig levercellebeskyttende aktivitet, og udforskede den mulige virkningsmekanisme gennem fluorescensfarvning, Western blot og andre metoder. For yderligere at undersøge de aktive ingredienser med leverbeskyttende virkninger i Fructus Polygonatum sibiricum brugte denne undersøgelse derfor forskellige kromatografiske og spektroskopiske teknikker til at isolere og identificere 8 lignaner fra n-butanolfraktionen af Fructus Polygonatum sibiricum. Derefter blev MTT, Hoechst 33342 fluorescensfarvning og Western blot-teknikker brugt til at karakterisere forbindelsernes beskyttende virkninger og mekanismer i forhold til levercelleskade.

 

I denne undersøgelse blev otte lignaner isoleret og identificeret fra n-butanolfraktionen af Polygonatum sibiricum, og forbindelserne 1-8 blev alle isoleret fra Polygonatum sibiricum for første gang. På nuværende tidspunkt er triterpenoider de vigtigste forbindelser, der er isoleret fra frøene af Polygonatum sibiricum, og forskerholdet har indtil videre isoleret 23 lignaner fra Polygonatum sibiricum. Litteraturforskning har vist, at de monomere forbindelser, der er isoleret fra Leonurus og Leonurus, hovedsageligt er terpenoider, men der er kun få rapporter om lignaner i Leonurus. Derfor spekuleres der i, at lignaner er forskellige stoffer mellem Leonurus og Leonurus.

Acetaminophen, også kendt som paracetamol, er et anilinbaseret febernedsættende og smertestillende lægemiddel. Overforbrug kan let forårsage leverskader eller endda leversvigt, primært ved at forårsage mitokondriel dysfunktion og celleapoptose i leverceller, hvilket resulterer i alvorlig levertoksicitet. Derfor bruges APAP ofte som model for lægemiddelinduceret leverskade. I dette eksperiment blev APAP brugt til at etablere en in vitro leverskadesmodel, og de isolerede forbindelser blev screenet for levercellebeskyttende aktivitet. Resultaterne viste, at forbindelserne 1 og 3 signifikant hæmmede APAP-induceret levercelleskade med EC50-værdier på henholdsvis 10,23 ± 2,45 μ mol/L og 5,20 ± 1,28 μ mol/L. I mellemtiden blev det observeret gennem fluorescensfarvningseksperimenter, at forbindelse 3 kan hæmme apoptose i HL-7702-celler.

Den intrinsiske vej til celleapoptose reguleres af B-celle lymfom (Bcl-2) familieproteiner, som danner et protein-protein interaktionsnetværk og regulerer celleapoptose ved at påvirke permeabiliteten af den mitokondrielle ydre membran. Bcl-2 og Bax er et par nøgleproteiner, der regulerer celleapoptose. Bcl-2 er et antiapoptotisk protein, som øger levercellernes modstandskraft over for de fleste DNA-skadefaktorer, mens Bax er et proapoptotisk protein, som øger mitokondriemembranens permeabilitet og frigiver cytokrom c, hvilket fører til celleapoptose. Forholdet mellem Bcl-2 og Bax-proteinudtryk afspejler cellernes overlevelsesevne efter at være blevet stimuleret af apoptose. For yderligere at udforske mekanismen for forbindelse 3 til at hæmme celleapoptose blev Western blot-teknologi brugt til at påvise dens ekspressionsniveauer af Bcl-2- og Bax-proteiner. Resultaterne viste, at forbindelse 3 kunne opregulere Bcl-2-proteinekspression, nedregulere Bax-proteinekspression og øge Bcl-2/Bax-forholdet, hvilket tyder på, at forbindelse 3 kan udøve antiapoptotiske virkninger ved at regulere ekspressionsniveauerne af Bcl-2 og Bax-proteiner og derved udøve en beskyttende virkning på leverceller.

Denne undersøgelse udforskede det farmakologiske stofgrundlag og virkningsmekanismen for levercellebeskyttende aktivitet i Radix Polygonatum sibiricum, hvilket giver et grundlag for at belyse den traditionelle effekt af Radix Polygonatum sibiricum og lette den rationelle udvikling og udnyttelse af medicinske ressourcer i fremtiden. Indtil videre har forskerholdet isoleret seks lignaner med levercellebeskyttende aktivitet fra Fructus Ranunculi, herunder frutoligid A fruleoligid B 、lariciresinol-4-O-β-D-glucosid 、lariciresinol-4′-O-β-D-glucosid 、 (+) - Isoquercetin -9 '- O - β - D-glucosid, artemisinin. "Compendium of Materia Medica" antyder, at det kinesiske ulvebær er godt til at rense leveren og forbedre synet, men der er i øjeblikket begrænset forskning i dets materielle grundlag og virkningsmekanisme for at rense leveren og forbedre synet. Gennem forskerholdets forskning fandt man ud af, at lignanerne i kinesisk ulvebær har gode levercellebeskyttende virkninger, hvilket kan være det aktive stof, der ligger til grund for kinesisk ulvebærs rensning af leveren og forbedring af synet.