Etablering af UPLC-fingeraftryksspektrum og bestemmelse af indikatorkomponenter for lægeurten Verbena officinalis
Verbena officinalis L., en plante i Verbenaceae-familien, er den tørrede overjordiske del af planten. Den har den virkning, at den fremmer blodcirkulationen, opløser blodstase, afgifter, diurese, reducerer gulfarvning og modvirker malaria. Undersøgelser af den kemiske sammensætning har vist, at verbena indeholder flygtige olier, iridoider, phenylpropanoider, flavonoider og andre komponenter, som har forskellige farmakologiske aktiviteter såsom antiinflammatorisk, antioxidant, smertestillende, hoste- og astmalindring, anti myokardieiskæmi og cerebral iskæmi. 2020-udgaven af Pharmacopoeia of the People's Republic of China, Part One, bruger oleanolic acid og ursolic acid som indholdsindikatorer for den medicinske urt verbena, men dens specificitet er ikke stærk. Desuden bruges traditionelle afkog i traditionel kinesisk medicin, og lipofile komponenter som oleanolsyre og ursolsyre bruges som indholdsindikatorer. Det er værd at diskutere, om dette hjælper med kvalitetskontrollen af lægeurter. Der er litteraturrapporter om, at ved at måle det høje indhold af cyclohexene ether terpenoid glycosider, såsom verbascosid og verbascosid, samt phenylpropanoid glycosid, verbascosid, i verbascosid, har det en vis specificitet og positiv betydning for at sikre den kliniske effekt af verbascosid. Ovenstående indholdsindikatorer er blevet brugt i kvalitetskontrolundersøgelsen af verbascosid-standardafkog og formelgranulat. Fingeraftryksspektre er også blevet brugt til kvalitetskontrol af verbascosid, men identifikationen af kemiske komponenter er hovedsageligt fokuseret på verbascosid, verbascosid og verbascosid. Der har ikke været nogen rapporter om undersøgelsen af andre vandopløselige komponenter. I denne undersøgelse blev etableringen af et fingeraftryksspektrum af verbenaurt kombineret med identifikation af massespektrometri med høj opløsning samt etablering af metoder til indholdsbestemmelse af fire aktive ingredienser, nemlig verbascosid, verbascosid, verbascosid og isoverbascosid, brugt til at give reference til den overordnede kvalitetskontrol af verbenaurt.

Udvælgelse af indholdsindikatorer. Ifølge litteraturrapporter og vores tidligere forskning kan verbascosid omdannes til isoverbascosid under visse betingelser. Både verbascosid og isoverbascosid har antioxidant, antihæmolytisk, antiangiotensinase-aktivitet, blodtrykssænkende og immunfunktionsforbedrende effekter. Dette indikerer, at verbascosid og isoverbascosid er af stor betydning for kvalitetskontrollen og evalueringen af verbena. Derfor vil vores virksomhed på baggrund af eksisterende forskning øge bestemmelsen af isoverbascosid for at give reference til kvalitetskontrollen af kinesiske urtepræparater, der indeholder verbena. Undersøgelser af den kemiske sammensætning har vist, at både verbascosid og verbascosid er iridoidglykosider. verbascosid, også kendt som 5-hydroxyverbascosid, har en ekstra hydroxylgruppe i kulstofposition 5 sammenlignet med verbascosid. De to komponenters kemiske strukturer er ens, og deres absorptionskurver i UV-synlige 3D-spektre er stort set de samme. Derfor anbefales det at kombinere de to komponenter til detektion og beregne den samlede mængde af de to komponenter. I denne undersøgelse blev der etableret fire metoder til bestemmelse af indholdet af aktive ingredienser. Fremstillingsmetoden for testopløsningen var i overensstemmelse med fingeraftryksspektret, men de kromatografiske betingelser blev fastlagt separat og var ikke i overensstemmelse med fingeraftryksspektret. De vigtigste overvejelser var indikatorkomponenternes separationsgrad, renhed og metodens reproducerbarhed. Resultaterne af indholdsbestemmelsen viste, at der var visse forskelle i indholdet af verbascosid, verbascosid, verbascosid og isoverbascosid i forskellige produktionsområder af verbenaurt. Selv inden for det samme produktionsområde var der også forskelle i indholdet af forskellige partier af urter, som hovedsageligt var relateret til forskelle i høsttidspunkt, forarbejdningsmetoder, opbevaringsmetoder og opbevaringstid for urterne. Derudover fandt vores virksomhed i vores forskning, at der er betydelige forskelle i indholdet af verbascosid, verbascosid, verbascosid og isoverbascosid i forskellige medicinske dele af den samme verbenaurt. Blandt dem er indholdet af verbascosid, verbascosid, verbascosid og isoverbascosid i blomster og blade betydeligt højere end i stænglerne. Derfor er streng kontrol af høsttidspunktet for lægeurter og sikring af forholdet mellem blomster og blade i urterne af stor betydning for kvalitetskontrollen af verbena-lægeurter.
Forskning i fingeraftryksspektre. UPLC-metoden blev brugt til at etablere fingeraftryksspektret for Herba Verbena. De kromatografiske betingelser for fingeraftryksspektret og fremstillingsmetoden for testopløsningen blev systematisk undersøgt. Resultaterne af lighedsberegningen viste, at ligheden mellem fingeraftryksspektrene for 15 partier af medicinske materialer var over 0,9, og den samlede lighed var høj, hvilket kan bruges til identifikation og kvalitetskontrol af Herba Verbena. Ved at bruge massespektrometri med høj opløsning til at identificere fælles toppe blev der identificeret tre typer aktive ingredienser, nemlig iridoidglykosider, phenylpropanoidglykosider og flavonoider. For første gang blev fingeraftryksspektre brugt til at karakterisere de tre typer aktive ingredienser i verbena, og for første gang blev isoverbascosid, luteolin 7-diglukosid og apigenin 7-O-glukuronid identificeret ud fra verbenas fingeraftryksspektrum, hvilket bedre afspejler verbenas overordnede integritet og egenskaber. Ved at bruge det relative topareal af fælles toppe som variabler klassificerede både klyngeanalyse og hovedkomponentanalyse de 15 partier af medicinske materialer i tre kategorier. Blandt dem havde de medicinske materialer fra Henan, Jiangsu og Guizhou lignende kemiske sammensætningsforhold. OPLS-DA fandt syv kromatografiske toppe med signifikante forskelle i topforhold, nemlig top 2, 6, 16, 10, 11, 5 og 9. Disse forskelle kan hænge sammen med forskelle i høsttidspunkt og behandlingsmetoder for de medicinske materialer.
Sammenfattende kan denne metode effektivt analysere kvalitetsforskellene på kinesiske lægeurter fra forskellige oprindelser og give en reference til evaluering af kvaliteten af kinesiske lægeurter fra forskellige oprindelser.