Identifikation af Ficus microcarpa og dens beslægtede arter baseret på ITS2-sekvens og HPLC-fingeraftryk
Ficus pandurata Hance, også kendt som mælketræ eller mælkefrø, er en plante i Ficus-slægten i Moraceae-familien. Den er hovedsageligt udbredt i Guangdong, Guangxi, Jiangxi, Hainan, Fujian, Hunan, Hubei, Jiangxi, Anhui, Zhejiang og andre steder. Ifølge "Dictionary of Traditional Chinese Medicine", "Fujian Medicinal Records" og "Jiangxi Folk Herbal Formula Testing" bruges roden og bladdelene af Ficus microcarpa som medicin. Den har en mild natur, en sød og lidt kølig smag og er ugiftig. Den fjerner varme, styrker milten, stimulerer appetitten, nærer qi og genererer væsker samt fjerner fugt og stagnation. Den bruges til at fjerne vind og fugt, afgifte, behandle malaria og fremme amning. For eksempel viser "Jiangxi Folk Herbal Formula Testing", at moderate mængder af Ficus microcarpa-rødder og Malan kan bruges til at behandle gulsot, når de tages oralt i et afkog med klart vand; En passende mængde banyanrod, Brahma-rod, Stephania tetrandra, Acanthopanax senticosus-rod og malurtstamme kan bruges til at behandle smerter i lænden med en blanding af Baijiu og vand af samme volumen. I Guangdong har Ficus microcarpa en lang historie med mad og medicin og en dyb massebase, som er blevet en vigtig del af den lokale karakteristiske Tonic Diet og råmaterialerne til diætmedicin. Moderne forskning har vist, at Ficus microcarpa indeholder aktive ingredienser som triterpenoider, flavonoider, coumariner og fenoliske syrer. Blandt dem har bergamotlakton forskellige farmakologiske aktiviteter såsom antitumor, blodsukkerregulering, forbedring af søvnløshed, forebyggelse og behandling af osteoporose, anti-aging, antiinflammatoriske og antiallergiske virkninger; Psoralen har farmakologiske virkninger såsom antiosteoporose, neurobeskyttelse, antitumor, østrogenlignende, antiinflammatoriske osv. Begge har virkninger mod osteoporose, er rigelige og let tilgængelige og er repræsentative aktive ingredienser i Ficus microcarpa.
På nuværende tidspunkt findes der tre hovedtyper af blandede produkter af Ficus microcarpa-medicinske urter på markedet: Ficus microcarpa var. holophylla, Ficus microcarpa var. angustifolia og Ficus microcarpa var. hirta. Quanyuan Qinye Ficus og Tiaoye Ficus er varianter af Qinye Ficus med overgangsbladformer mellem de tre; desuden bruger både Ficus microcarpa og Ficus microcarpa deres rødder som medicin og har en mælkeagtig aroma. De sælges ofte på markedet under handelsnavnet Milk Tree Roots, hvilket resulterer i ujævn kvalitet af de medicinske materialer. På nuværende tidspunkt fokuserer moderne forskning i Ficus microcarpa hovedsageligt på farmakognosi, kemisk sammensætning og farmakologisk aktivitet, og der er ingen rapporter om kvalitetsstandarderne for Ficus microcarpa. DNA-stregkodeidentifikation er en molekylærbiologisk identifikationsmetode, der bruger en standard, relativt kort DNA-sekvens til artsidentifikation. Denne metode er af stor betydning for at fremme udviklingen og udnyttelsen af nye kinesiske medicinressourcer, afhjælpe manglen på talenter inden for identifikation af kinesisk medicin, styre cirkulationen af kinesiske medicinmarkeder og løse de skjulte frøproblemer, som morfologi er vanskelig at overvinde. HPLC-fingeraftryk er en pålidelig metode til at identificere ægtheden, evaluere kvalitetskonsistens og stabilitet af kemiske komponenter i traditionel kinesisk medicin opnået gennem kromatografiske teknikker baseret på forståelsen af den samlede virkning af stofgrupper. I dette eksperiment blev ITS2-sekvenser brugt til molekylær identifikation af Ficus microcarpa og dens beslægtede arter. HPLC-fingeraftryksspektre blev etableret for at bestemme forskellene i indholdet af psoralen og bergamotlakton og for at identificere Ficus microcarpa og dens beslægtede arter fra forskellige oprindelser. Dette giver et videnskabeligt grundlag for kvalitetskontrol og evaluering af medicinske materialer fra Ficus microcarpa.

Eksperimentet analyserede ITS2-sekvensen, den genetiske K2P-afstand, NJ-træklyngeanalysen og den sekundære struktur af Ficus microcarpa og dens beslægtede arter. Både NJ-træklyngeanalyse og sekundærstruktur kan effektivt skelne mellem Ficus microcarpa og dens beslægtede arter. Den genetiske afstand inden for og mellem K2P-arter har dog visse begrænsninger i forhold til at identificere Ficus microcarpa og dens beslægtede arter og kræver en kombination af NJ-træklusteranalyse og sekundær struktur til identifikation.

Eksperimentet undersøgte kromatografiske forhold såsom forskellige ekstraktionsmidler, detektionsbølgelængder, søjletemperaturer, mobile fasesystemer og kromatografiske søjler. Resultaterne viste, at ved brug af 95% ethanolekstraktion, XBridge Peptide BEH C18 (5 μ m, 4,6 mm × 250 mm) kromatografisk søjle, detektionsbølgelængde 330 nm, søjletemperatur 30 °C, strømningshastighed 1,0 ml/min og mobilfase methanol-pH8 fosfatbufferopløsning var topformerne og separationsgraden for hvert farvespektrum gode. Vi har etableret HPLC-fingeraftryksspektre af Ficus microcarpa og dens beslægtede arter, hvilket udfylder hullet i undersøgelsen af HPLC-karakteristiske spektre af Ficus microcarpa. Fingeraftryksspektrene for Ficus microcarpa og dens beslægtede arter viser betydelige forskelle i antallet af karakteristiske toppe og relativ retentionstid, som intuitivt kan skelne Ficus microcarpa fra dens beslægtede arter og anvendes til kvalitetsevaluering af Ficus microcarpa. Der er i alt 10 kromatografiske toppe i Ficus microcarpa fra forskellige oprindelser, hvoraf de fleste ikke blev påvist i Ficus microcarpa og Ficus microcarpa. Ligheden mellem nært beslægtede arter og Ficus microcarpa er mindre end 0,807; der er en betydelig forskel i indholdet af psoralen og bergamotlakton mellem Ficus microcarpa og dens beslægtede arter. Indholdet af Ficus microcarpa og Ficus microcarpa er betydeligt lavere end indholdet af Ficus microcarpa, hvilket indikerer en forskel i kvalitet mellem Ficus microcarpa og dens beslægtede arter. Det har en vigtig praktisk vejledningsværdi for brugen af indholdet af psoralen og bergamotlakton som kvalitetskontrolindikatorer for Ficus microcarpa. Derfor kan fingeraftryksspektre, lighed og indholdsbestemmelse objektivt og præcist skelne mellem ægtheden af Ficus microcarpa-lægemidler, som effektivt kan bruges til kvalitetskontrol og ægthedsidentifikation af Ficus microcarpa-lægemidler.

Sammenfattende er DNA-stregkoden og HPLC-fingeraftrykket for Ficus microcarpa og dens beslægtede arter blevet etableret. Metoden er enkel, pålidelig, stabil og har god repeterbarhed, hvilket kan bruges til fingeraftryksforskning og autenticitetsidentifikation af Ficus microcarpa og dens beslægtede arter. Samtidig giver den et videnskabeligt grundlag for yderligere at forbedre kvaliteten af Ficus microcarpa.
I PPI-netværket blev der udvalgt 42 vigtige mål baseret på gradrangering, som hovedsageligt blev opdelt i 5 kategorier: proteintyrosinfosfataser (PTPN1, PTPN2, PTPN6, PTPN11 osv.), phosphatidylinositol 3-kinaser (PIK3R1, PIK3CB, PIK3CA osv.), mitogenaktiverede proteinkinaser (MAPK1, MAPK3, MAPK8, MAPK14 osv.), cyclinafhængige kinaser (CDK1, CDK2, CDK4 osv.) og andre vigtige mål (VEGFA, HSP90AA1, LCK osv.). Disse vigtige mål kan fungere som reference for målrettet behandling af UC.