Evaluering af kvaliteten af lotusblomster fra forskellige oprindelser baseret på fingeraftryksspektrum kombineret med kemisk mønstergenkendelsesmetode
Sovende lotus er en flerårig vandplante i familien Nymphaeaceae, der er hjemmehørende i Ili, Altay, Bohu og andre områder i Xinjiang. De tørrede blomsterknopper fra den sovende lotus, som er en almindeligt anvendt lægeurt i uyghur-medicin, er medtaget i Uyghur Medicine Volume of the Drug Standards of the Ministry of Health of the People's Republic of China. De virker febernedsættende, hostelindrende, varmeafledende, afgiftende og beroligende på sindet og kan bruges til at behandle hovedpine, feberfremkaldt hoste, akut og kronisk vindchok hos børn forårsaget af feber. Sovende lotus indeholder hovedsageligt flavonoider og phenolforbindelser. Moderne farmakologiske undersøgelser har vist, at den har forskellige biologiske aktiviteter, såsom antioxidant, antiinflammatorisk, hypoglykæmisk, antiviral osv. For bedre at kunne kontrollere den iboende kvalitet af den kinesiske lægeurt har denne undersøgelse til hensigt at bruge fingeraftryksspektrum kombineret med kemisk mønstergenkendelsesmetode til at udføre bestemmelse af multikomponentindhold, omfattende analysere forskellene i sammensætningen af kinesiske lægeurter i forskellige produktionsområder, afklare forskellene i produktionsområder og karakteristiske komponenter, give reference til identifikation og kvalitetsstandardformulering af kinesiske lægeurter og lægge et fundament for yderligere udvikling og anvendelse.















Valg af ekstraktionsmiddel. Der er mange kemiske komponenter og forskellige egenskaber i lægeurten Sleeping Lotus. For bedre at kunne afspejle oplysningerne om de kemiske komponenter i lægeurten i kromatogrammet har denne artikel konsulteret et stort antal litteraturer og valgt methanol, 50%-methanol og ethanol som ekstraktionsmidler i dette eksperiment. Ved brug af 50%-methanol og ethanol som ekstraktionsmidler blev det på grund af analysen af fingeraftryksspektrene for 15 partier af Sleeping Lotus konstateret, at der var 23 fælles toppe ved en bølgelængde på 273 nm. Peak 1 havde en god adskillelse af gallussyre og et stort peak-område, så det blev brugt som referencetop. Der er 17 almindelige toppe ved 350 nm, hvoraf 4 komponenter er blevet identificeret, nemlig garvesyre, fyrværkeriglykosid, lilla skyglykosid og quercetin. I mellemtiden blev ligheden mellem fingeraftryksspektrene for 15 partier af prøver evalueret, og resultaterne viste god lighed med kontrolfingeraftryksspektrene. Det lille antal toppe fører til ufuldstændig ekstraktion. Gennem en omfattende analyse af forskellige faktorer blev den optimale ekstraktionsmetode med methanol som opløsningsmiddel bestemt.
Valg af detektionsbølgelængde. Denne undersøgelse brugte en diodearray-detektor til at udføre fuld bølgelængdescanning (190-800 nm) på lotusblomstens fingeraftryksspektrum. Baseret på det præsenterede 3D-spektrum kan det ses, at den kromatografiske topseparation er høj, topsymmetrien er god, basislinjen er stabil, og topkapaciteten er stor under bølgelængdeforholdene på 273 nm og 350 nm. Det opnåede spektrum af testopløsningen kan vise rigere information. Derfor blev 273 nm og 350 nm valgt som målebølgelængder.
Valg af kromatografiske betingelser. Indflydelsen af methanol og acetonitril som mobile faser på fingeraftryksspektret af lotusblomster blev undersøgt. Når man bruger methanol og acetonitril som mobile faser til isokratisk analyse, er adskillelseseffektiviteten dårlig. For at opnå bedre adskillelse af hver kromatografisk top vælges gradienteluering. Sammenlignet med methanolacetonitril som mobil fase kan der opnås flere kromatografiske toppe i fingeraftrykskromatogrammet. Ved at sammenligne kromatogrammerne fra to forskellige mobile faser blev det konstateret, at separationsevnen med acetonitril var bedre end med methanol. Derfor blev acetonitril valgt som den mobile fase i denne undersøgelse.
Evaluering af analysemetoder. Ved at analysere fingeraftryksspektrene fra 15 partier af sovende lotusblomster fandt man ud af, at der var 23 fælles toppe ved en bølgelængde på 273 nm. Peak 1 havde en god adskillelse af gallussyre og et stort peak-område, så det blev brugt som referencetop. Der er 17 almindelige toppe ved 350 nm, hvoraf 4 komponenter er blevet identificeret, nemlig garvesyre, fyrværkeriglykosid, lilla skyglykosid og quercetin. I mellemtiden blev ligheden mellem fingeraftryksspektrene for 15 partier af prøver evalueret, og resultaterne viste god lighed med kontrolfingeraftryksspektrene. Kombinationen af HPLC-fingeraftryk og klyngeanalyse, PCA, OPLS-DA kan bruges til klynge- og komponentdiskriminationsanalyse af medicinske materialer fra forskellige oprindelser og partier. Denne undersøgelse brugte kemiske mønstergenkendelsesmetoder til at udføre klyngeanalyse, PCA og OPLS-DA-klassifikationsmønstre på lægeurten Nelumbo nucifera. Analyseresultaterne af de tre metoder var konsistente. Femten partier af Nelumbo nucifera blev inddelt i fire kategorier ved 273 nm, hvor forskellene hovedsageligt blev afspejlet i top 17, 1, 4, 15, 20, 23, 3, 6, 2 og 21. Blandt dem var top 1 gallussyre, top 15 var puerarin, og top 20 var quercetin. Ved 350 nm er det opdelt i tre kategorier med forskelle, der hovedsageligt afspejles i screeningen af top 14, 1, 13, 7, 8, 11, 10 og 2. Blandt dem er top 14 quercetin, top 7 er fyrværkeriglykosid, og top 8 er lilla skyglykosid. Disse komponenter kan tjene som de vigtigste karakteristiske komponenter til at skelne mellem og identificere kvaliteten af lotusmedicinske materialer fra forskellige produktionsområder. Vores forskningsgruppe vil fortsætte med at udføre dybdegående undersøgelser af ukendte differentierede komponenter for at give en mere omfattende reference til evaluering af kvaliteten af lotusmedicinske materialer.