Forskning i kvalitetsevaluering af verbena og overførselsloven for standardafkogsdosering baseret på UPLC Feature Map og One Test Multiple Evaluation Method
Verbena officinalis L., en tør overjordisk del af planten Verbena officinalis L. i familien Verbenaceae, blev første gang registreret i "Catalogue of Famous Physicians" og klassificeret som en lavere kvalitet. De kemiske komponenter i verbena er hovedsageligt iridoidglykosider, flavonoider, steroler, triterpener, polyfenoler, flygtige olier, tanniner, betakaroten, koffeinsyre, sukkerarter osv. De vigtigste aktive ingredienser er iridoidglykosider. Den har en kølig natur, en bitter smag og hører til lever- og miltmeridianerne. Den fremmer blodcirkulationen, opløser blodstase, afgifter, fremmer diurese, reducerer gulsot og modvirker malaria. Klinisk bruges den til ophobning af symptomer som dysmenoré, amenoré, faryngitis, absces, ødemer, gulsot og malaria. Der er mange ressourcer i verbena, bl.a. iridoidglykosider, som har forskellige virkninger som antioxidant, hepatobeskyttende, neurobeskyttende, hjerte- og hjerneiskæmibeskyttende, antiinflammatorisk osv. Kinesiske urteafkog (standardafkog) er de mest anvendte traditionelle kinesiske medicinpræparater i klinisk praksis og også de længste og mest anvendte præparater i den kinesiske medicins historie. Uanset om det drejer sig om afkog af traditionel kinesisk medicin, afkog af brudstykker, formelgranulat af traditionel kinesisk medicin og andre afkog af ny kinesisk medicin, tages de alle ved afkog eller vandskylning. Derfor er det af stor betydning at bruge forskning i standardafkog som den foretrukne kontrol til undersøgelse af andre kinesiske medicinpræparater. Denne undersøgelse belyser den kvantitative overførselslov fra afkogsstykker til standardafkog og lægger grunden til forskning og kvalitetsevaluering af traditionelle kinesiske medicinformuleringer af verbena.
Denne undersøgelse fokuserer på fremstilling af verbascosid, 5-hydroxyverbascosid og verbascosid i verbascosidskiver og etablerer dets UPLC-karakteristiske kort. Kortoplysningerne analyseres ved hjælp af kemisk tilstandsanalyse, og indholdet af verbascosid, 5-hydroxyverbascosid og verbascosid i verbascosid bestemmes samtidig ved ultrahøjtydende væskekromatografi kombineret med en test multiplevalueringsmetode. Resultaterne sammenlignes med dem, der opnås ved ekstern standardmetode. Og mål standardafkogningsudbyttet, verbascosid, 5-hydroxyverbascosid og verbascosidindhold, beregn overførselshastigheden og udfør på baggrund af dette en undersøgelse af overførslen af verbascosidafkogningsstykker til standardafkogningen for at demonstrere rationaliteten af forskellige kvalitetsindikatorer.

Den isokratiske eluering af det karakteristiske spektrum af verbena-prøven kan ikke opnå baseline-separation, så gradienteluering blev brugt. I de indledende eksperimenter sammenlignede denne undersøgelse mobile faser som methanolvand, acetonitrilvand, acetonitril-0,1%-phosphorsyreopløsning og acetonitril-0,05%-phosphorsyreopløsning. Endelig blev acetonitril-0,05% fosforsyreopløsning valgt som den mobile fase. Under de ovennævnte kromatografiske forhold var den kromatografiske topseparation, det teoretiske pladenummer og topformsparametrene alle gode. Denne undersøgelse anvendte et eksperimentelt system med en enkelt faktor til at undersøge virkningerne af ekstraktionsmiddel, ekstraktionsmetode og -tid samt forholdet mellem fast stof og væske på ekstraktionseffektiviteten. Resultaterne viste, at ekstraktionseffektiviteten var højest, når ekstraktionsmidlet var 80% methanol, forholdet mellem faststof og væske var 1:50 (g/mL), og tilbagesvalingsekstraktion blev udført i 120 minutter. Derfor blev ovenstående metode brugt som ekstraktionsmetode til verbenaskiver.
Den overordnede kvalitetskontrol af multi-indeks-komponenter i traditionel kinesisk medicin er blevet en uundgåelig tendens i udviklingen af kvalitetskontrol af traditionel kinesisk medicin. Det karakteristiske/fingeraftryksspektrum er en effektiv kvalitetsevalueringsmetode, og ved at kombinere det med analysemetoden med én test og flere evalueringer kan man opnå integritet og nøjagtighed i kvalitetsevalueringen. Denne undersøgelse etablerede et UPLC-karakteristisk kort over verbascosid-afkogsstykker, identificerede 5 almindelige toppe og identificerede 3 komponenter. Analysetiden blev væsentligt forkortet sammenlignet med HPLC, og de kromatografiske forhold kunne bruges til bestemmelse af 5-hydroxyverbascosid, verbascosid og verbascosidindhold. Hovedkomponentanalysen blev udført på topområdet for karakteristiske toppe, og den omfattende evalueringsmodel for hovedkomponenter forbedrede kvalitetsevalueringen og analysemetoden for verbena yderligere.

Indholdsbestemmelsesindekset for verbena i den kinesiske farmakopé fra 2020 er den samlede mængde oleanolsyre og ursolsyre, som begge er triterpenoider med lav polaritet og lav vandopløselighed. Foreløbige eksperimentelle forskningsresultater viser, at det samlede indhold af oleanolsyre og ursolsyre i standardafkoget af verbena er mindre end 2,0 mg/g, og overførselshastigheden er mindre end 6%. Baseret på funktionskortet blev der derfor etableret en multievalueringsmetode til bestemmelse af indholdet af 5-hydroxyverbascosid, verbascosid og verbascosid. De polære komponenter i verbena er hovedsageligt cyclohexenetherterpener, blandt hvilke verbascosid og 5-hydroxyverbascosid er de vigtigste komponenter med det højeste indhold, og standardafkoget har en højere overførselshastighed. Overførselshastigheden for nogle partier overstiger 100%, mens det samlede overførselsområde for 5-hydroxyverbascosid og verbascosid ligger mellem 56,6% og 91,2%. Den mulige årsag er, at lignende komponenter gennemgår strukturel transformation under opvarmning, kogning og andre processer. Der er forskelle i indholdet og overførselshastigheden af verbascosid, 5-hydroxyverbascosid og verbascosid blandt de 18 partier af standardafkog af verbascosid, hvilket kan være relateret til indholdet og teksturen af afkogstykkerne. Nogle afkogningsstykker har lysere farver, længere opbevaringstid og mere snavs under behandlingen, hvilket kan være årsagen til de store udsving i deres indhold og overførselshastighed. De tre udvalgte ingredienser har et højt indhold af verbena og har gode farmakologiske aktiviteter inden for antioxidanter, hepatobeskyttelse, neurobeskyttelse, beskyttelse mod hjerte- og hjerneiskæmi, antiinflammatoriske og andre aspekter. De er et af de vigtigste materielle grundlag for, at verbena kan udøve sine farmakologiske virkninger.

Resultaterne af den multiple evalueringsmetode med én test viste ingen signifikant forskel i forhold til den eksterne standardmetode og kan bruges til kvantitativ analyse af flere komponenter i verbena. UPLC-funktionskortet kombineret med multi-indeks-komponent en måling flere evalueringsmetoder kan give reference til forskning og kvalitetsevaluering af produktionsprocessen for verbena og verbena kinesiske urtepræparater.